| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语中英文对照 | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-16页 |
| 参考文献 | 第15-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-42页 |
| 第一章 真核生物基因转录水平调控的研究进展 | 第16-28页 |
| 1 真核生物基因转录水平调控概况 | 第16-17页 |
| 2 启动子研究进展 | 第17-26页 |
| ·真核生物启动子类型 | 第18-20页 |
| ·组织特异性启动子 | 第20页 |
| ·启动子结构研究方法 | 第20-24页 |
| ·启动子功能研究 | 第24-26页 |
| 3 转录水平的功能验证 | 第26页 |
| 4 小结 | 第26-28页 |
| 第二章 NRAMP1基因的研究进展 | 第28-35页 |
| 1 Nramp基因命名 | 第28-29页 |
| 2 Nramp1基因结构与定位 | 第29-30页 |
| 3 Nramp1基因的功能及作用机理 | 第30-32页 |
| 4 Nramp1基因抗病性研究 | 第32-33页 |
| ·Nramp1基因与结核病相关研究 | 第32-33页 |
| ·Nramp1基因与伤寒病相关研究 | 第33页 |
| ·Nramp1基因与其他疾病相关研究 | 第33页 |
| 5 Nramp1基因表达调控机制及表达特异性研究 | 第33-34页 |
| ·Nramp1基因的表达调控机制 | 第33-34页 |
| ·Nramp1基因细胞和组织表达特异性 | 第34页 |
| 6 小结 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-42页 |
| 第二部分 实验研究 | 第42-82页 |
| 第三章 猪NRAMP1基因特异性表达研究及转录起始位点确定 | 第42-60页 |
| 1 材料与主要仪器 | 第42-45页 |
| ·实验样品 | 第42-43页 |
| ·实验试剂 | 第43页 |
| ·主要溶液及其配制 | 第43-44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44-45页 |
| ·网络资源及生物信息学软件 | 第45页 |
| 2 实验方法 | 第45-54页 |
| ·猪肺泡巨噬细胞体外培养 | 第45-46页 |
| ·猪Nramp1基因核酸序列的获取 | 第46页 |
| ·引物设计 | 第46-47页 |
| ·猪各组织及PAM细胞总RNA提取 | 第47-48页 |
| ·RNA浓度和纯度检测 | 第48页 |
| ·Nrampl基因特异性表达研究 | 第48-49页 |
| ·Nramp1基因转录起始位点确定(TSS) | 第49-51页 |
| ·T-A克隆测序 | 第51-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-57页 |
| ·Nramp1基因mRNA在各组织及PAM中的表达谱分析 | 第54-55页 |
| ·Nramp1基因的转录起始位点确定 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 5 小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-60页 |
| 第四章 NRAMP1基因启动子缺失表达载体构建及功能特异性验证 | 第60-82页 |
| 1 材料与主要仪器 | 第60-62页 |
| ·实验样品 | 第60-61页 |
| ·材料与试剂 | 第61页 |
| ·常用试剂配制 | 第61页 |
| ·主要仪器及相关生物信息网站 | 第61-62页 |
| 2 实验方法 | 第62-72页 |
| ·Nramp1基因启动子缺失表达载体构建 | 第62-69页 |
| ·Nramp1基因启动子活性分析及功能特异性验证 | 第69-72页 |
| 3 结果与分析 | 第72-77页 |
| ·Nramp1基因5’调控区序列获得 | 第72-73页 |
| ·Nramp1基因启动子预测结果 | 第73-74页 |
| ·重组表达载体KpnⅠ和HindⅢ双酶切鉴定 | 第74页 |
| ·优化的转染条件 | 第74-75页 |
| ·猪Nramp1基因缺失启动子活性分析及功能特异性验证 | 第75-77页 |
| 4 讨论 | 第77-79页 |
| ·关于启动子缺失表达载体构建 | 第77页 |
| ·关于细胞培养、转染与双报告基因系统检测 | 第77-78页 |
| ·关于启动子活性调控的研究 | 第78-79页 |
| 5 小结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-82页 |
| 全文总结 | 第82-84页 |
| 附录Ⅰ | 第84-85页 |
| 附录Ⅱ | 第85-87页 |
| 附录Ⅲ | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
