致谢 | 第1-9页 |
目录 | 第9-13页 |
缩略词(Abbreviation) | 第13-15页 |
氨基酸简写符号 | 第15-16页 |
摘要 | 第16-18页 |
Abstract | 第18-20页 |
前言 | 第20-22页 |
1 文献综述 | 第22-34页 |
·植物花粉发育 | 第22-24页 |
·花粉发育过程 | 第22-23页 |
·花粉壁 | 第23页 |
·绒毡层发育 | 第23-24页 |
·植物的授粉受精 | 第24-25页 |
·花粉黏附 | 第24页 |
·花粉水合 | 第24页 |
·花粉萌发和花粉管生长 | 第24-25页 |
·成熟花粉粒中mRNA的储运 | 第25-26页 |
·表观遗传 | 第26-34页 |
·组蛋白甲基化 | 第26-28页 |
·组蛋白密码 | 第26页 |
·组蛋白甲基化 | 第26-28页 |
·组蛋白甲基化是一种可逆的修饰 | 第28页 |
·组蛋白去甲基化 | 第28-32页 |
·组蛋白去甲基化酶LSD1 | 第28-29页 |
·含有JmjC域的组蛋白去甲基化酶 | 第29-32页 |
·含有JmjC域的组蛋白去甲基化酶在植物花发育中的作用 | 第32-34页 |
2 白菜花粉发育与授粉受精相关基因BcJMJ30的序列与表达分析 | 第34-50页 |
·材料与方法 | 第34-39页 |
·植物基因组DNA、总RNA的提取及cDNA的合成 | 第34-36页 |
·植物材料 | 第34页 |
·植物基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
·植物总RNA的提取及检测 | 第35-36页 |
·cDNA的合成 | 第36页 |
·目的基因cDNA编码区的获得 | 第36页 |
·目的基因cDNA非编码区的获得 | 第36-37页 |
·3’RACE扩增 | 第36-37页 |
·5’末端TAIL-PCR | 第37页 |
·目的基因DNA序列全长的获得 | 第37页 |
·序列特征分析 | 第37-38页 |
·分子进化树的构建 | 第38-39页 |
·基因时空表达模式分析 | 第39页 |
·RT-PCR分析 | 第39页 |
·qRT-PCR分析 | 第39页 |
·组织原位杂交分析 | 第39页 |
·结果与分析 | 第39-45页 |
·目的基因cDNA全长的获得 | 第39-41页 |
·目的基因DNA全长的获得 | 第41页 |
·目的基因核苷酸及氨基酸序列分析 | 第41-44页 |
·进化分析表明目的基因与拟南芥JMJ30亲缘关系密切 | 第44页 |
·BcJMJ30在白菜‘Bajh97-01AB’中的时空表达模式 | 第44-45页 |
·BcJMJ30在白菜花粉发育与授粉受精中持续表达 | 第44页 |
·BcJMJ30在花粉与绒毡层中特异表达 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-50页 |
·白菜BcJMJ30组蛋白去甲基化酶的特性 | 第45-47页 |
·白菜BcJMJ30参与花粉发育和授粉受精 | 第47-50页 |
3 白菜组蛋白去甲基化酶基因BcJMJ30的功能分析 | 第50-66页 |
·材料与方法 | 第50-55页 |
·反义RNA载体的构建 | 第50-51页 |
·反义片段的获得 | 第50页 |
·双元载体pCAMBIA1301的制备 | 第50-51页 |
·表达质粒的构建 | 第51页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第51页 |
·农杆菌中质粒鉴定 | 第51页 |
·反义表达载体对菜心的遗传转化 | 第51-54页 |
·植物材料、菌株及抗生素 | 第52页 |
·菜心的遗传转化体系 | 第52-53页 |
·反义表达载体对菜心的遗传转化步骤 | 第53-54页 |
·转基因植株的分子检测 | 第54页 |
·转基因植株基因组DNA和总RNA的提取 | 第54页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第54页 |
·转基因植株的RT-PCR鉴定 | 第54页 |
·转基因植株开放花形态观察 | 第54-55页 |
·转基因植株花粉发育的扫描电镜观察 | 第55页 |
·转基因植株花粉生活力观察 | 第55页 |
·转基因植株的花粉萌发试验 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-63页 |
·BcJMJ30反义RNA载体的构建 | 第55-56页 |
·BcJMJ30反义片段的获得 | 第55-56页 |
·BcJMJ30反义表达载体在农杆菌中的鉴定 | 第56页 |
·获得转反义BcJMJ30菜心植株 | 第56-57页 |
·转反义BcJMJ30菜心植株的分子检测 | 第57-58页 |
·转反义BcJMJ30菜心植株的PCR检测 | 第57页 |
·转反义BcJMJ30菜心植株的RT-PCR鉴定 | 第57-58页 |
·转反义BcJMJ30菜心植株形态特征观察 | 第58页 |
·转反义BcJMJ30菜心植株花粉的细胞学观察 | 第58-59页 |
·转反义BcJMJ30菜心植株的花粉生活力观察 | 第59-60页 |
·转反义BcJMJ30菜心植株的花粉萌发试验 | 第60-62页 |
·转反义BcJMJ30菜心植株的花粉体外萌发观察 | 第60-61页 |
·转反义BcJMJ30菜心植株的花粉柱头萌发观察 | 第61-62页 |
·转反义BcJMJ30菜心植株的结荚情况观察 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-66页 |
4 白菜花粉发育与授粉受精相关基因BcMF22的序列与表达分析 | 第66-76页 |
·材料与方法 | 第66-68页 |
·植物材料 | 第66页 |
·目的基因cDNA编码区的获得 | 第66-67页 |
·目的基因cDNA非编码区的获得 | 第67页 |
·3’RACE扩增 | 第67页 |
·5’端同源扩增 | 第67页 |
·目的基因DNA序列全长的获得 | 第67-68页 |
·序列特征分析 | 第68页 |
·目的基因时空表达模式分析 | 第68页 |
·qRT-PCR分析 | 第68页 |
·组织原位杂交分析 | 第68页 |
·结果与分析 | 第68-72页 |
·获得目的基因的cDNA与DNA全长 | 第68-69页 |
·目的基因核苷酸与氨基酸序列分析 | 第69-70页 |
·BcMF22在白菜‘Bajh97-01A B’中的时空表达模式 | 第70-72页 |
·BcMF22在白菜花粉发育与授粉受精中持续表达 | 第70-72页 |
·BcMF22在花粉与授粉后雌蕊中的表达 | 第72页 |
·讨论 | 第72-76页 |
5 白菜花粉发育与授粉受精相关基因BcMF22的功能分析 | 第76-86页 |
·材料与方法 | 第76-78页 |
·反义RNA载体的构建 | 第76-77页 |
·反义片段的获得 | 第76-77页 |
·双元载体pCAMBIA1301的制备 | 第77页 |
·表达质粒的构建 | 第77页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第77页 |
·农杆菌中质粒鉴定 | 第77页 |
·转基因植株的获得 | 第77页 |
·转基因植株的分子检测 | 第77-78页 |
·转基因植株基因组DNA和总RNA的提取 | 第78页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第78页 |
·转基因植株的RT-PCR鉴定 | 第78页 |
·转基因植株花粉生活力观察 | 第78页 |
·转基因植株的花粉萌发试验 | 第78页 |
·结果与分析 | 第78-84页 |
·BcMF22反义RNA载体的构建 | 第78页 |
·BcMF22反义片段的获得 | 第78页 |
·BcMF22反义表达载体在农杆茼中的鉴定 | 第78页 |
·获得转反义BcMF22菜心植株 | 第78-79页 |
·转反义BcMF22菜心植株的分子检测 | 第79-81页 |
·转反义BcMF22菜心植株的PCR检测 | 第79-80页 |
·转反义BcMF22菜心植株的RT-PCR鉴定 | 第80-81页 |
·转反义BcMF22菜心植株花粉生活力观察 | 第81-82页 |
·转反义BcMF22菜心植株的花粉萌发试验 | 第82-83页 |
·转反义BcMF22菜心植株结荚情况观察 | 第83-84页 |
·讨论 | 第84-86页 |
结论 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-102页 |
博士期间发表的论文 | 第102页 |