摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
第1章 绪论 | 第9-19页 |
·禽巴氏杆菌病概述 | 第9-13页 |
·病原学研究特征 | 第9-10页 |
·流行病学及致病机理 | 第10-11页 |
·临床症状及病理变化 | 第11-12页 |
·禽巴氏杆菌病的检测方法 | 第12-13页 |
·Apm 重要免疫原的研究进展 | 第13-16页 |
·荚膜 | 第13-14页 |
·菌毛 | 第14页 |
·外膜蛋白 | 第14-15页 |
·交叉保护因子 | 第15-16页 |
·禽巴氏杆菌病疫苗研究进展 | 第16-17页 |
·灭活疫苗 | 第16页 |
·弱毒疫苗 | 第16页 |
·亚单位疫苗 | 第16页 |
·DNA 疫苗 | 第16-17页 |
·基因组表达文库研究进展 | 第17-18页 |
·基因组表达文库构建及免疫研究进展 | 第18页 |
·本实验的研究意义及主要内容 | 第18-19页 |
第2章 Apm 基因组表达文库的构建 | 第19-30页 |
·实验材料 | 第19-21页 |
·试验用菌株及载体 | 第19页 |
·主要试剂及其试剂盒 | 第19页 |
·试验仪器 | 第19-20页 |
·主要培养基及溶液的配制 | 第20-21页 |
·试验方法 | 第21-25页 |
·Apm 基因组的提取 | 第21-22页 |
·Apm 基因组的酶切处理 | 第22页 |
·真核表达载体质粒 pcDNA3.1(+)的处理 | 第22-23页 |
·大肠杆菌 DH5α电转化感受态的制备 | 第23页 |
·Apm 基因组与表达载体 pcDNA3.1(+)的连接 | 第23-24页 |
·电击法转化重组质粒 | 第24页 |
·Apm 基因组表达文库的质量检测 | 第24-25页 |
·结果与分析 | 第25-28页 |
·Apm 基因组的提取结果 | 第25-26页 |
·Apm 基因组酶切处理预实验电泳图 | 第26-27页 |
·真核表达载体质粒 pcDNA3.1(+) 的 BamHⅠ酶切电泳图 | 第27页 |
·Apm 基因组表达文库的质量检测 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
第3章 Apm 基因组表达文库的免疫检测 | 第30-40页 |
·试验材料 | 第30-32页 |
·菌种 | 第30页 |
·实验动物 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·仪器设备 | 第30-31页 |
·主要溶液的配制 | 第31-32页 |
·试验方法 | 第32-35页 |
·Apm 基因组表达文库各子文库中重组质粒的提取 | 第32-33页 |
·动物免疫实验 | 第33-34页 |
·小鼠断尾采血及分离血清 | 第34页 |
·免疫小鼠血清特异性抗体的检测 | 第34页 |
·小鼠半数致死量(LD50)的测定及强毒株攻毒实验 | 第34-35页 |
·脾淋巴细胞增殖实验 | 第35页 |
·结果和分析 | 第35-38页 |
·抗体检测结果 | 第35-36页 |
·半数致死量(LD50)的测定结果 | 第36-37页 |
·动物攻毒实验结果 | 第37页 |
·脾淋巴细胞增殖实验结果 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第4章 Apm 的 ptfa 基因原核表达 | 第40-48页 |
·试验材料 | 第40-41页 |
·试验用菌株及载体 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·主要溶液的配制 | 第40-41页 |
·主要实验仪器 | 第41页 |
·试验方法 | 第41-44页 |
·子文库 1 中重组质粒的分析 | 第41页 |
·pET32a-ptfa 重组质粒的构建 | 第41-42页 |
·电转化重组质粒 PET32a-ptfa | 第42页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第42-43页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第43-44页 |
·结果和分析 | 第44-47页 |
·子文库 1 中重组质粒酶切电泳图 | 第44-45页 |
·序列测定结果 | 第45页 |
·PCR 的扩增结果 | 第45页 |
·重组质粒 pET32a-ptfa 双酶切电泳图 | 第45-46页 |
·SDS-PAGE 电泳图 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
第5章 结论 | 第48-49页 |
·Apm 文库的构建和免疫检测 | 第48页 |
·ptfa 基因的原核表达 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
缩略语词汇表 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
攻读硕士学位期间研究成果 | 第56页 |