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禽多杀性巴氏杆菌基因组表达文库的构建、免疫检测及ptfa基因的原核表达

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第1章 绪论第9-19页
   ·禽巴氏杆菌病概述第9-13页
     ·病原学研究特征第9-10页
     ·流行病学及致病机理第10-11页
     ·临床症状及病理变化第11-12页
     ·禽巴氏杆菌病的检测方法第12-13页
   ·Apm 重要免疫原的研究进展第13-16页
     ·荚膜第13-14页
     ·菌毛第14页
     ·外膜蛋白第14-15页
     ·交叉保护因子第15-16页
   ·禽巴氏杆菌病疫苗研究进展第16-17页
     ·灭活疫苗第16页
     ·弱毒疫苗第16页
     ·亚单位疫苗第16页
     ·DNA 疫苗第16-17页
   ·基因组表达文库研究进展第17-18页
   ·基因组表达文库构建及免疫研究进展第18页
   ·本实验的研究意义及主要内容第18-19页
第2章 Apm 基因组表达文库的构建第19-30页
   ·实验材料第19-21页
     ·试验用菌株及载体第19页
     ·主要试剂及其试剂盒第19页
     ·试验仪器第19-20页
     ·主要培养基及溶液的配制第20-21页
   ·试验方法第21-25页
     ·Apm 基因组的提取第21-22页
     ·Apm 基因组的酶切处理第22页
     ·真核表达载体质粒 pcDNA3.1(+)的处理第22-23页
     ·大肠杆菌 DH5α电转化感受态的制备第23页
     ·Apm 基因组与表达载体 pcDNA3.1(+)的连接第23-24页
     ·电击法转化重组质粒第24页
     ·Apm 基因组表达文库的质量检测第24-25页
   ·结果与分析第25-28页
     ·Apm 基因组的提取结果第25-26页
     ·Apm 基因组酶切处理预实验电泳图第26-27页
     ·真核表达载体质粒 pcDNA3.1(+) 的 BamHⅠ酶切电泳图第27页
     ·Apm 基因组表达文库的质量检测第27-28页
   ·讨论第28-30页
第3章 Apm 基因组表达文库的免疫检测第30-40页
   ·试验材料第30-32页
     ·菌种第30页
     ·实验动物第30页
     ·主要试剂第30页
     ·仪器设备第30-31页
     ·主要溶液的配制第31-32页
   ·试验方法第32-35页
     ·Apm 基因组表达文库各子文库中重组质粒的提取第32-33页
     ·动物免疫实验第33-34页
     ·小鼠断尾采血及分离血清第34页
     ·免疫小鼠血清特异性抗体的检测第34页
     ·小鼠半数致死量(LD50)的测定及强毒株攻毒实验第34-35页
     ·脾淋巴细胞增殖实验第35页
   ·结果和分析第35-38页
     ·抗体检测结果第35-36页
     ·半数致死量(LD50)的测定结果第36-37页
     ·动物攻毒实验结果第37页
     ·脾淋巴细胞增殖实验结果第37-38页
   ·讨论第38-40页
第4章 Apm 的 ptfa 基因原核表达第40-48页
   ·试验材料第40-41页
     ·试验用菌株及载体第40页
     ·主要试剂第40页
     ·主要溶液的配制第40-41页
     ·主要实验仪器第41页
   ·试验方法第41-44页
     ·子文库 1 中重组质粒的分析第41页
     ·pET32a-ptfa 重组质粒的构建第41-42页
     ·电转化重组质粒 PET32a-ptfa第42页
     ·重组质粒的诱导表达第42-43页
     ·SDS-PAGE 电泳第43-44页
   ·结果和分析第44-47页
     ·子文库 1 中重组质粒酶切电泳图第44-45页
     ·序列测定结果第45页
     ·PCR 的扩增结果第45页
     ·重组质粒 pET32a-ptfa 双酶切电泳图第45-46页
     ·SDS-PAGE 电泳图第46-47页
   ·讨论第47-48页
第5章 结论第48-49页
   ·Apm 文库的构建和免疫检测第48页
   ·ptfa 基因的原核表达第48-49页
参考文献第49-54页
缩略语词汇表第54-55页
致谢第55-56页
攻读硕士学位期间研究成果第56页

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