| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-28页 |
| ·选题背景及意义 | 第12-13页 |
| ·动脉炎病毒的基本介绍、分类与相关疾病 | 第13-16页 |
| ·动脉炎病毒的基本介绍 | 第13-15页 |
| ·动脉炎病毒的分类及相关疾病 | 第15-16页 |
| ·PRRSV的研究历史 | 第16-23页 |
| ·PRRS的发现与传播史 | 第16页 |
| ·PRRS的症状及传染途径 | 第16-17页 |
| ·PRRSV的简介 | 第17-18页 |
| ·PRRSV的感染特性 | 第18-19页 |
| ·PRRSV的生活周期 | 第19页 |
| ·PRRSV的基因组 | 第19-21页 |
| ·PRRSV的分型 | 第21-22页 |
| ·PRRSV的非结构蛋白 | 第22-23页 |
| ·PRRSV nsp1β的研究历史 | 第23-25页 |
| ·PRRSV nsp1β的功能研究 | 第23-24页 |
| ·PRRSV nsp1β的保守性 | 第24-25页 |
| ·论文的研究目的和研究方法 | 第25-26页 |
| ·研究目的 | 第25页 |
| ·研究方法 | 第25-26页 |
| ·论文结构安排 | 第26-28页 |
| 第2章 PRRSV nsp1β的晶体结构 | 第28-50页 |
| ·PRRSV nsp1β的表达和纯化 | 第28-34页 |
| ·PRRSV nsp1β的基本生化性质分析 | 第28页 |
| ·PRRSV nsp1β表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·PRRSV nsp1β的表达 | 第30页 |
| ·PRRSV nsp1β的纯化 | 第30-34页 |
| ·PRRSV nsp1β硒代甲硫氨酸衍生物的表达和纯化 | 第34页 |
| ·PRRSV nsp1β的 C 端自剪切位点的确定 | 第34-36页 |
| ·nsp1β-nsp2N 的克隆构建 | 第34-35页 |
| ·nsp1β-nsp2N 的表达和纯化 | 第35-36页 |
| ·转 PVDF 膜用于蛋白质 N 端测序 | 第36页 |
| ·PRRSV nsp1β的晶体生长 | 第36-39页 |
| ·PRRSV nsp1β的晶体生长 | 第36-39页 |
| ·PRRSV nsp1β硒代甲硫氨酸衍生物晶体的制备 | 第39页 |
| ·PRRSV nsp1β的晶体的数据收集和处理 | 第39-42页 |
| ·PRRSV nsp1β的母体晶体的数据收集和处理 | 第39-40页 |
| ·PRRSV nsp1β的硒代甲硫氨酸衍生物晶体的数据收集和处理 . | 第40-42页 |
| ·多波长反常散射法（MAD）解析 PRRSV nsp1β的晶体结构 | 第42-47页 |
| ·硒原子位置的确定 | 第42-43页 |
| ·初始相位的解析 | 第43页 |
| ·相位改善和密度修饰 | 第43-44页 |
| ·结构模型的搭建、修正与精化 | 第44页 |
| ·最终结构模型的质量评估 | 第44-47页 |
| ·PRRSV nsp1β的晶体结构总体结构 | 第47-49页 |
| ·PRRSV nsp1β的蛋白酶活性的体外检测 | 第49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 第3章 PRRSV nsp1β的晶体结构分析 | 第50-63页 |
| ·PRRSV nsp1β的同源二聚化 | 第50-55页 |
| ·凝胶过滤层析实验 | 第50-51页 |
| ·化学交联实验 | 第51-52页 |
| ·同源二聚体结构分析 | 第52-55页 |
| ·PRRSV nsp1β的 C 端结构域行使其蛋白酶活性 | 第55-60页 |
| ·活性中心 | 第55-56页 |
| ·CTE 和 PCPβ结构域的相互作用 | 第56-58页 |
| ·一种可能的自剪切模式 | 第58-60页 |
| ·PRRSV nsp1β的 NTD 结构域功能研究 | 第60-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第4章 PRRSV nsp1β的核酸酶活性研究 | 第63-79页 |
| ·PRRSV nsp1β突变体的表达和纯化 | 第63-67页 |
| ·定点突变的克隆方法选择 | 第63-65页 |
| ·利用快速突变体系进行 nsp1β突变体克隆的构建 | 第65-66页 |
| ·PRRSV nsp1β突变体的表达和纯化 | 第66-67页 |
| ·PRRSV nsp1β的核酸酶活性的体外检测 | 第67-75页 |
| ·PRRSV nsp1β对 dsDNA 的体外降解实验 | 第67-68页 |
| ·二价金属离子对 PRRSV nsp1β核酸酶活性的影响 | 第68-69页 |
| ·PRRSV nsp1β对 ssRNA、dsRNA 及 ssDNA 的体外降解实验 .. | 第69-74页 |
| ·PRRSV nsp1β突变体对 dsDNA 的体外降解实验 | 第74-75页 |
| ·针对 PRRSV nsp1β核酸酶活性的抑制剂筛选 | 第75-76页 |
| ·PRRSV nsp1β与可能相互作用分子的复合物晶体生长 | 第76-77页 |
| ·PRRSV nsp1β的亚细胞定位 | 第77-78页 |
| ·本章小结 | 第78-79页 |
| 第5章 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
| 附录 A 基因编码序列 | 第87-90页 |
| A.1 PRRSV nsp1β的基因编码序列 | 第87页 |
| A.2 PRRSVnsp1 的基因编码序列 | 第87-88页 |
| A.3 PRRSVnsp2 的基因编码序列（部分） | 第88-90页 |
| 附录 B 氨基酸序列 | 第90-92页 |
| B.1 PRRSVnsp1 β的氨基酸序列 | 第90页 |
| B.2 PRRSVnsp1 的氨基酸序列 | 第90页 |
| B.3 PRRSVnsp2 的氨基酸序列（部分） | 第90-92页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第92页 |
