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丙酮酸激酶OsPK1对水稻重要农艺性状的影响及机制研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
主要符号对照表第11-13页
第1章 引言第13-30页
   ·水稻是单子叶植物基因组研究的模式植物第13-14页
     ·水稻作为单子叶植物基因组研究的模式植物具有重要现实意义第13页
     ·水稻作为单子叶植物基因组研究模式植物的优越性第13-14页
   ·T-DNA标签法在水稻功能基因组研究中的应用第14-15页
   ·水稻矮化突变体概述第15-17页
     ·矮秆基因第15页
     ·水稻矮化突变体节间的不同伸长模式第15-17页
   ·丙酮酸激酶研究进展第17-22页
     ·丙酮酸激酶是糖酵解途径中的关键调控酶第17-18页
     ·丙酮酸激酶的分类和亚单位组成第18-19页
     ·丙酮酸激酶的理化特性第19页
     ·丙酮酸激酶的调控第19页
     ·丙酮酸激酶家族第19-20页
     ·植物体中丙酮酸激酶生理作用研究进展第20-22页
   ·植物激素第22-28页
     ·植物激素的概念和种类第22页
     ·GA的生理效应和生物合成第22-23页
     ·CTK的生理效应和生物合成第23-24页
     ·ABA的生理效应和生物合成第24-25页
     ·生长素的生理效应和生物合成第25-26页
     ·糖酵解途径、丙酮酸激酶与植物激素生物合成的可能关系第26-28页
   ·本论文的研究背景、目的和内容第28-30页
     ·研究背景第28页
     ·研究目的第28-29页
     ·研究内容第29-30页
第2章 突变体ospk1表型分析第30-33页
   ·植物材料第30页
   ·茎纵切扫描电子显微镜观察第30页
   ·结果与讨论第30-33页
     ·幼苗期突变表型第30-31页
     ·成熟期突变表型第31-33页
第3章 突变体ospk1遗传分析与互补第33-46页
   ·本章引论第33页
   ·材料与方法第33-41页
     ·植物材料第33-34页
     ·水稻基因组DNA的提取方法第34页
     ·质粒DNA的小量提取第34-35页
     ·T载体转化到大肠杆菌感受态第35页
     ·农杆菌EHA105感受态的制备第35-36页
     ·农杆菌EHA105感受态的电击转化第36页
     ·突变体中T-DNA插入位置的确定第36-37页
     ·水稻总RNA的提取(Trizol 法)第37页
     ·RACE分析OsPK1的5’-和3’-UTR第37页
     ·定量RT-PCR第37-39页
     ·农杆菌介导的水稻遗传转化方法第39-40页
     ·遗传互补实验第40-41页
   ·结果与分析第41-46页
     ·突变体ospk1 T-DNA边界的确定第41-43页
     ·遗传互补第43-46页
第4章 OsPK1编码一个在胞质表达的丙酮酸激酶第46-56页
   ·材料与方法第46-49页
     ·生物信息学分析第46页
     ·亚细胞定位第46页
     ·OsPK1体外表达和酶活性分析第46-47页
     ·定量RT-PCR检测糖酵解/糖异生途径中的酶的表达第47页
     ·检测PEP/丙酮酸代谢相关的酶和丙酮酸激酶家族基因的表达第47-49页
   ·结果与分析第49-56页
     ·OsPK1是一个高度保守的基因第49-52页
     ·OsPK1的亚细胞定位第52页
     ·OsPK1展示丙酮酸激酶活性第52-53页
     ·糖酵解/糖异生途径中的酶的表达在 ospk1 中上调或下调第53-54页
     ·RT-PCR检测野生型和突变体中 PEP/丙酮酸代谢相关基因的表达第54-56页
第5章 OsPK1基因的表达模式分析第56-61页
   ·材料与方法第56-58页
     ·植物材料第56页
     ·定量RT-PCR检测 OsPK1 和 Os12g0145700 在各器官组织的表达第56页
     ·构建PROOsPK1:GUS第56页
     ·GUS 组织化学染色方法第56-57页
     ·GUS 染色后制作石蜡切片第57-58页
   ·结果与分析第58-61页
     ·定量 RT-PCR 检测 OsPK1 在各器官的表达第58页
     ·GUS 组织化学染色检测 OsPK1 的表达模式第58页
     ·石蜡切片检测 OsPK1 细胞水平的表达第58-61页
第6章 OsPK1 对植物激素合成和根吸收的影响第61-69页
   ·本章引论第61页
   ·材料与方法第61-63页
     ·植物材料第61页
     ·外施赤霉素对叶鞘长度的影响第61-62页
     ·植物激素的检测第62页
     ·定量 RT-PCR 检测 GA 合成途径中的三个关键调控酶的表达第62页
     ·糖的检测第62-63页
   ·结果与分析第63-69页
     ·ospk1 对外施 GA3是敏感的第63-64页
     ·OsPK1 表达降低影响赤霉素和脱落酸的合成及它们之间的平衡第64-66页
     ·野生型和突变体中 CTK 和 IAA 的含量分析第66页
     ·OsPK1 表达降低影响了糖的合成和运输以及根对外源蔗糖的吸收第66-69页
第7章 总结和讨论第69-75页
   ·总结第69-70页
   ·讨论第70-75页
     ·ospk1 是第 1 个报道的由丙酮酸激酶突变产生的水稻矮化突变体第70-71页
     ·OsPK1 主要在功能性的组织和细胞中表达第71-72页
     ·突变体 ospk1 突变表型之间的关联第72页
     ·OsPK1 的表达降低引起具生物活性的 GAs 的合成受到抑制,ABA/GA平衡被打破第72-73页
     ·突变体根对外源蔗糖的吸收和利用的能力减弱第73-74页
     ·OsPK1 表达降低影响到糖的合成、代谢和运输第74页
     ·OsPK1 研究展望与问题第74-75页
参考文献第75-83页
致谢第83-85页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第85页

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