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半滑舌鳎Myostatin基因通路相关基因的克隆和表达

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 文献综述第12-32页
 0 引言第12页
 1 肌肉生长发育第12-18页
   ·鱼类的肌肉生长发育第13-14页
   ·肌肉早期生长发育调控的分子机制第14-18页
     ·Hedgehogs 信号通路第15页
     ·Wnt 信号通路第15页
     ·TGF-β超家族第15-18页
       ·TGF-β基因超家族的受体第15-17页
       ·Smad 蛋白家族第17-18页
       ·TGF-β超家族与肌肉发育第18页
 2 Myostatin(MSTN)第18-23页
   ·Myostatin 的基因结构第19-20页
   ·Myostatin 的表达分布第20页
   ·Myostatin 与肌肉生长的关系第20-21页
   ·Myostatin 基因通路的调控第21-23页
 3 Follistain(FST)第23-29页
   ·Follistain 的基因结构第23-24页
   ·Follistain 的表达分布第24-25页
   ·Follistatin 的生物学作用及机制第25-29页
     ·Follistatin/Activin 调控系统第25-26页
     ·FST 对生殖系统的生物学作用第26-27页
       ·FST 对垂体分泌的调节作用第26页
       ·Follistatin 对胚胎发育和分化的影响第26-27页
     ·Follistatin 促进肌肉生长的作用第27-28页
       ·Follistatin 对Myostatin 的抑制作用第27-28页
       ·Follistatin 的成肌作用第28页
     ·Follistatin 的其他生物学功能第28-29页
 4 ActivinII 型B 受体(ActRIIB)第29-31页
   ·ActRIIB 的基因结构第29页
   ·ActRIIB 的表达特点第29页
   ·ActRIIB 的生物学功能第29-31页
     ·ActRIIB 的信号传导和调控作用第29-30页
     ·ActRIIB 在Myostatin 通路中的作用第30-31页
     ·ActRIIB 与肌肉生长的关系第31页
 5 本研究的意义第31-32页
第二章 半滑舌鳎Follistatin 的克隆和表达分析第32-54页
 1 材料和方法第32-42页
   ·实验材料的获取第32页
     ·实验材料各组织样品的收集第32页
     ·不同发育时期胚胎样品的收集第32页
   ·实验中所用引物(表2-1)第32-33页
   ·总RNA 的提取、纯化及检测第33-35页
     ·总RNA 的提取第33-34页
     ·总 RNA 的纯化(去除 DNA)第34-35页
   ·cDNA 第一链的合成第35-36页
   ·半滑舌鳎Follistatin 核心片段的获得第36-37页
     ·半滑舌鳎Follistatin 基因核心片段的克隆第36页
     ·连接反应(连接反应体系10 μl)第36-37页
     ·连接产物的转化及筛选第37页
   ·半滑舌鳎Follistatin 基因3’UTR 的获得第37-39页
     ·3’cDNA 的合成第37-38页
     ·3’RACE 半巢式PCR第38-39页
   ·半滑舌鳎Follistain 基因的序列分析第39-40页
   ·半滑舌鳎Follistatin 基因的组织差异表达第40-42页
     ·不同组织cDNA 的合成第40页
     ·半定量RT-PCR第40页
     ·实时荧光定量PCR(Real-time PCR)第40-42页
       ·荧光定量PCR 的简介第40-41页
       ·标准曲线的制作第41页
       ·SYBR 法荧光定量PCR 检测半滑舌鳎FST 基因在不同组织中的表达第41-42页
     ·数据处理第42页
   ·半滑舌鳎FST 基因和MSTN 基因在不同发育时期的差异表达第42页
 2 结果和分析第42-52页
   ·总RNA 的提取与检测第42-43页
   ·半滑舌鳎Follistatin 基因cDNA 全长的克隆第43-45页
   ·半滑舌鳎Follistatin 基因序列和结构分析第45-50页
     ·半滑舌鳎Follistatin 氨基酸序列分析第45-46页
     ·Follistatin 的二级结构和空间结构预测第46页
     ·半滑舌鳎Follistatin 的同源性和系统进化分析第46-50页
   ·半滑舌鳎Follistatin 的组织表达分析:第50-51页
   ·半滑舌鳎FST 基因与MSTN 基因的发育时期表达比较分析第51-52页
 3 讨论第52-54页
第三章 半滑舌鳎ActRIIB 基因的克隆和表达分析第54-70页
 1 材料和方法第54-58页
   ·半滑舌鳎ActRIIB 基因核心片段的获得第54-55页
   ·半滑舌鳎ActRIIB 5’,3’UTR 的获得第55-57页
     ·5’UTR 的获得第56-57页
     ·3’UTR 的获得第57页
   ·半滑舌鳎ActRIIB 基因的序列分析第57页
   ·半滑舌鳎ActRIIB 基因的组织表达分析第57-58页
   ·半滑舌鳎ActRIIB 基因和MSTN 基因在不同发育时期的差异表达第58页
 2 结果第58-67页
   ·半滑舌鳎 ActRIIB 基因 cDNA 全长的克隆第58-59页
   ·半滑舌鳎 AcvRIIB 基因序列和结构分析第59-65页
     ·半滑舌鳎的 AcvRIIB 氨基酸序列分析第59-62页
     ·AcvRIIB 的二级结构和空间结构预测第62-63页
     ·半滑舌鳎 AcvRIIB 的同源性和系统进化分析第63-65页
   ·半滑舌鳎 AcvRIIB 的组织表达分析第65-66页
   ·半滑舌鳎 AcvRIIB 基因与 Myostatin 基因的发育表达比较分析第66-67页
 3 讨论第67-70页
参考文献第70-76页
致谢第76-77页
个人简历第77页

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