| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 1 前言 | 第11-29页 |
| ·哈维氏弧菌 | 第15-23页 |
| ·哈维氏弧菌的生物学性质 | 第15-17页 |
| ·哈维氏弧菌的致病症状和病理变化 | 第17-19页 |
| ·哈维氏弧菌的致病机制 | 第19-21页 |
| ·哈维氏弧菌病的防治 | 第21-22页 |
| ·哈维氏弧菌疫苗研究 | 第22-23页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶 | 第23-28页 |
| ·TrxR的种类及结构 | 第23-25页 |
| ·TrxR的功能 | 第25-28页 |
| ·催化氧化还原活性 | 第25-26页 |
| ·防御氮氧化应激 | 第26-27页 |
| ·细胞的生长调节 | 第27-28页 |
| ·硒对硫氧还蛋白系统的影响 | 第28页 |
| ·本文的研究意义 | 第28-29页 |
| 2 哈维氏弧菌trxR基因的克隆、表达、及其免疫原性研究 | 第29-49页 |
| ·材料和方法 | 第29-33页 |
| ·菌株和质粒 | 第29-31页 |
| ·培养基 | 第31-33页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-44页 |
| ·哈维氏弧菌trxR基因的克隆 | 第33-38页 |
| ·哈维氏弧菌基因组DNA的提取 | 第33-34页 |
| ·引物的设计及合成 | 第34页 |
| ·基因的PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·扩增产物的检测及纯化 | 第35页 |
| ·PCR产物克隆质粒的构建及序列测定 | 第35-36页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·重组质粒的转化 | 第36-37页 |
| ·克隆质粒DNA提取 | 第37-38页 |
| ·PCR产物克隆质粒的鉴定 | 第38页 |
| ·哈维氏弧菌SF-1 trxR基因的表达 | 第38-41页 |
| ·表达引物的设计与合成 | 第38-39页 |
| ·哈维氏弧菌trxR基因的PCR扩增 | 第39页 |
| ·pET-28a(+)/trxR表达质粒的构建及鉴定 | 第39-40页 |
| ·trxR在大肠杆菌BL21中的表达 | 第40页 |
| ·trxR表达条件的优化 | 第40页 |
| ·trxR的SDS-PAGE电泳检测 | 第40-41页 |
| ·重组硫氧还蛋白还原酶TrxR的纯化 | 第41-42页 |
| ·重组菌BL21(DE3)/pET28a(+)/trxR的诱导及培养 | 第41页 |
| ·从菌体中纯化重组TrxR蛋白 | 第41页 |
| ·Ni琼脂糖亲和柱亲和层析 | 第41页 |
| ·Ni琼脂糖亲和柱的处理与再生 | 第41-42页 |
| ·重组TrxR蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第42页 |
| ·重组TrxR蛋白对大菱鲆免疫效果的研究 | 第42-44页 |
| ·重组TrxR蛋白大量表达和纯化 | 第42页 |
| ·重组TrxR蛋白的浓度检测 | 第42页 |
| ·实验动物处理及免疫 | 第42-43页 |
| ·免疫牙鲆血清中抗体水平测定 | 第43页 |
| ·重组TrxR蛋白对牙鲆的免疫保护效果 | 第43-44页 |
| ·实验结果 | 第44-49页 |
| ·哈维氏弧菌trxR基因的克隆 | 第44-47页 |
| ·哈维氏弧菌trxR基因在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第47-48页 |
| ·重组蛋白TrxR对大菱鲆的免疫保护效果 | 第48-49页 |
| ·TrxR免疫对大菱鲆的特异性抗体变化规律 | 第49页 |
| 讨论 | 第49-52页 |
| 小结 | 第52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
