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甘菊BADH基因启动子的克隆及瞬时表达分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
缩略词表第10-12页
1 引言第12-15页
2 植物BADH 基因研究进展第15-26页
   ·BADH 基因的研究简况第15-16页
   ·BADH 基因结构的分析第16-21页
     ·编码区结构的研究第16-19页
     ·非编码区序列研究第19-21页
   ·BADH 基因的表达特性第21-23页
     ·DNA 水平的差异第22页
     ·转录或转录后水平的表达第22-23页
   ·BADH 基因的进化及与植物系统进化的关系第23-24页
   ·讨论第24-26页
3 菊科野生植物资源调查采集与分析第26-36页
   ·调查采集的方法、地点和种类第26-27页
     ·调查采集的方法第26页
     ·调查采集的地点第26-27页
     ·调查采集的菊科植物种类第27页
   ·植物的形态、生境、分布与调查采集地第27-32页
   ·耐盐耐旱性分析第32页
   ·观赏特性分析第32-33页
   ·应用前景第33-36页
4 菊科植物BADH 基因的检测及其片段的克隆与分析第36-52页
   ·材料与方法第36-42页
     ·试验材料第36页
     ·试验方法第36-42页
       ·DNA 提取第36-37页
       ·PCR 扩增第37-39页
       ·Southern 杂交第39-42页
       ·扩增片段的测序第42页
   ·结果与分析第42-51页
     ·DNA 提取第42页
     ·阳性对照目的片段的测序验证第42-45页
       ·PCR 扩增和重组质粒的酶切鉴定第42页
       ·序列测定与分析第42-45页
     ·探针的测序验证与标记结果第45页
     ·PCR 扩增与Southern 杂交结果分析第45-47页
     ·被克隆BADH 基因片段的序列分析第47-51页
   ·讨论第51-52页
5 甘菊BADH 基因cDNA 的克隆与表达分析第52-65页
   ·材料与方法第52-59页
     ·试验材料第52页
     ·试验方法第52-59页
       ·甘菊总RNA 的提取第52-54页
       ·第一cDNA 近3′端的RT-PCR 扩增第54页
       ·第一cDNA 的3′RACE 扩增第54-55页
       ·cDNA 的5′RACE 扩增第55-57页
       ·第一cDNA 完整开放阅读框的扩增第57页
       ·第二cDNA 5′端延长序列的扩增第57页
       ·第二cDNA 的3′RACE 扩增第57-58页
       ·第二cDNA 完整开放阅读框的扩增第58页
       ·DNA 的回收、连接、转化与测序第58页
       ·序列分析第58页
       ·半定量分析用甘菊材料的盐处理第58页
       ·半定量RT-PCR-Southern第58-59页
   ·结果与分析第59-64页
     ·总RNA 提取方法的比较第59-60页
     ·甘菊BADH 基因的克隆结果与序列分析第60-64页
       ·第一cDNA 的克隆第60页
       ·第二cDNA 的克隆第60-61页
       ·甘菊BADH 基因cDNA 全序列的拼接与分析第61-64页
     ·甘菊BADH 基因半定量表达分析第64页
   ·讨论第64-65页
6 甘菊BADH 基因启动子的克隆与序列分析第65-77页
   ·材料与方法第65-70页
     ·试验材料第65-66页
     ·试验方法第66-70页
       ·甘菊总DNA 的提取第67页
       ·甘菊BADH 基因第一内含子的扩增第67页
       ·启动子克隆的第一次步移第67-68页
       ·第一次步移后的PCR 扩增第68页
       ·第二次步移第68-69页
       ·第三次步移第69页
       ·全长启动子的扩增第69页
       ·PCR 产物的回收、连接、转化与鉴定第69-70页
       ·DNA 序列测定与分析第70页
   ·结果与分析第70-77页
     ·第一内含子序列扩增结果第70页
     ·第一次步移结果第70-71页
     ·第一次步移后的PCR 扩增结果第71页
     ·第二和第三次步移的结果第71-72页
     ·全长启动子的扩增结果第72页
     ·启动子序列分析第72-77页
       ·启动子序列差异分析第72-73页
       ·转录起始位点的预测第73-75页
       ·顺式作用元件的分析第75-77页
7 甘菊BADH 基因启动子表达载体的构建及瞬时表达分析第77-86页
   ·材料与方法第77-82页
     ·试验材料第77页
       ·植物材料第77页
       ·菌种与载体第77页
       ·生化试剂第77页
     ·试验方法第77-82页
       ·表达载体的构建第77-81页
       ·甘菊和菊花无菌苗的培育第81页
       ·农杆菌叶盘侵染第81页
       ·组织化学染色法检测Gus 活性第81-82页
   ·试验结果第82-84页
     ·植物表达载体的构建第82-84页
       ·中间载体的构建第82页
       ·植物表达载体的构建第82页
       ·植物表达载体的鉴定第82页
       ·植物表达载体转入农杆菌第82-84页
     ·瞬时表达结果与分析第84页
   ·讨论第84-86页
8 结论第86-88页
参考文献第88-95页
个人简介第95-96页
导师简介第96-98页
致谢第98-99页
博硕士学位论文同意发表声明第99页

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