摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
缩略词表 | 第10-12页 |
1 引言 | 第12-15页 |
2 植物BADH 基因研究进展 | 第15-26页 |
·BADH 基因的研究简况 | 第15-16页 |
·BADH 基因结构的分析 | 第16-21页 |
·编码区结构的研究 | 第16-19页 |
·非编码区序列研究 | 第19-21页 |
·BADH 基因的表达特性 | 第21-23页 |
·DNA 水平的差异 | 第22页 |
·转录或转录后水平的表达 | 第22-23页 |
·BADH 基因的进化及与植物系统进化的关系 | 第23-24页 |
·讨论 | 第24-26页 |
3 菊科野生植物资源调查采集与分析 | 第26-36页 |
·调查采集的方法、地点和种类 | 第26-27页 |
·调查采集的方法 | 第26页 |
·调查采集的地点 | 第26-27页 |
·调查采集的菊科植物种类 | 第27页 |
·植物的形态、生境、分布与调查采集地 | 第27-32页 |
·耐盐耐旱性分析 | 第32页 |
·观赏特性分析 | 第32-33页 |
·应用前景 | 第33-36页 |
4 菊科植物BADH 基因的检测及其片段的克隆与分析 | 第36-52页 |
·材料与方法 | 第36-42页 |
·试验材料 | 第36页 |
·试验方法 | 第36-42页 |
·DNA 提取 | 第36-37页 |
·PCR 扩增 | 第37-39页 |
·Southern 杂交 | 第39-42页 |
·扩增片段的测序 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-51页 |
·DNA 提取 | 第42页 |
·阳性对照目的片段的测序验证 | 第42-45页 |
·PCR 扩增和重组质粒的酶切鉴定 | 第42页 |
·序列测定与分析 | 第42-45页 |
·探针的测序验证与标记结果 | 第45页 |
·PCR 扩增与Southern 杂交结果分析 | 第45-47页 |
·被克隆BADH 基因片段的序列分析 | 第47-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
5 甘菊BADH 基因cDNA 的克隆与表达分析 | 第52-65页 |
·材料与方法 | 第52-59页 |
·试验材料 | 第52页 |
·试验方法 | 第52-59页 |
·甘菊总RNA 的提取 | 第52-54页 |
·第一cDNA 近3′端的RT-PCR 扩增 | 第54页 |
·第一cDNA 的3′RACE 扩增 | 第54-55页 |
·cDNA 的5′RACE 扩增 | 第55-57页 |
·第一cDNA 完整开放阅读框的扩增 | 第57页 |
·第二cDNA 5′端延长序列的扩增 | 第57页 |
·第二cDNA 的3′RACE 扩增 | 第57-58页 |
·第二cDNA 完整开放阅读框的扩增 | 第58页 |
·DNA 的回收、连接、转化与测序 | 第58页 |
·序列分析 | 第58页 |
·半定量分析用甘菊材料的盐处理 | 第58页 |
·半定量RT-PCR-Southern | 第58-59页 |
·结果与分析 | 第59-64页 |
·总RNA 提取方法的比较 | 第59-60页 |
·甘菊BADH 基因的克隆结果与序列分析 | 第60-64页 |
·第一cDNA 的克隆 | 第60页 |
·第二cDNA 的克隆 | 第60-61页 |
·甘菊BADH 基因cDNA 全序列的拼接与分析 | 第61-64页 |
·甘菊BADH 基因半定量表达分析 | 第64页 |
·讨论 | 第64-65页 |
6 甘菊BADH 基因启动子的克隆与序列分析 | 第65-77页 |
·材料与方法 | 第65-70页 |
·试验材料 | 第65-66页 |
·试验方法 | 第66-70页 |
·甘菊总DNA 的提取 | 第67页 |
·甘菊BADH 基因第一内含子的扩增 | 第67页 |
·启动子克隆的第一次步移 | 第67-68页 |
·第一次步移后的PCR 扩增 | 第68页 |
·第二次步移 | 第68-69页 |
·第三次步移 | 第69页 |
·全长启动子的扩增 | 第69页 |
·PCR 产物的回收、连接、转化与鉴定 | 第69-70页 |
·DNA 序列测定与分析 | 第70页 |
·结果与分析 | 第70-77页 |
·第一内含子序列扩增结果 | 第70页 |
·第一次步移结果 | 第70-71页 |
·第一次步移后的PCR 扩增结果 | 第71页 |
·第二和第三次步移的结果 | 第71-72页 |
·全长启动子的扩增结果 | 第72页 |
·启动子序列分析 | 第72-77页 |
·启动子序列差异分析 | 第72-73页 |
·转录起始位点的预测 | 第73-75页 |
·顺式作用元件的分析 | 第75-77页 |
7 甘菊BADH 基因启动子表达载体的构建及瞬时表达分析 | 第77-86页 |
·材料与方法 | 第77-82页 |
·试验材料 | 第77页 |
·植物材料 | 第77页 |
·菌种与载体 | 第77页 |
·生化试剂 | 第77页 |
·试验方法 | 第77-82页 |
·表达载体的构建 | 第77-81页 |
·甘菊和菊花无菌苗的培育 | 第81页 |
·农杆菌叶盘侵染 | 第81页 |
·组织化学染色法检测Gus 活性 | 第81-82页 |
·试验结果 | 第82-84页 |
·植物表达载体的构建 | 第82-84页 |
·中间载体的构建 | 第82页 |
·植物表达载体的构建 | 第82页 |
·植物表达载体的鉴定 | 第82页 |
·植物表达载体转入农杆菌 | 第82-84页 |
·瞬时表达结果与分析 | 第84页 |
·讨论 | 第84-86页 |
8 结论 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-95页 |
个人简介 | 第95-96页 |
导师简介 | 第96-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
博硕士学位论文同意发表声明 | 第99页 |