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盐芥Th TRXh功能分析和盐芥不同生态型的比较蛋白质组学初步研究

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一部分 文献综述第12-38页
 第一章 盐芥 ThTRXh 功能分析文献综述第12-22页
  1 硫氧还蛋白及硫氧还蛋白系统的组成及结构第12-14页
  2 硫氧还蛋白的功能第14-20页
   ·硫氧还蛋白对细胞的氧化还原调控作用第15页
   ·硫氧还蛋白对蛋白质/酶类的氧化还原调节作用第15-17页
   ·硫氧还蛋白的抗氧化作用第17页
   ·硫氧还蛋白对细胞凋亡的抑制和对生长的促进作用第17-18页
   ·硫氧还蛋白对反式作用元件的调节作用第18页
   ·细胞信号传导因子氧化还原调节和TRX对细胞信号传导的调节作用第18-20页
   ·硫氧还蛋白的其它调节作用第20页
  3 硫氧还蛋白系统的研究结论和展望第20-21页
  4 基因沉默在植物基因功能研究中的应用第21-22页
 第二章 盐芥不同生态型的比较蛋白质组学初步研究第22-38页
  1 蛋白质组学研究的必要性第22页
  2 蛋白质组学研究进展第22-33页
   ·广义蛋白质组学第23-24页
   ·狭义蛋白质组学第24-29页
     ·不基于凝胶分离的蛋白质组学分析方法第24-27页
     ·染色第27页
     ·图像采集第27-28页
     ·质谱分析第28-29页
   ·蛋白质组学在植物科学研究中的应用第29-33页
     ·植物群体遗传蛋白质组学第29-30页
     ·植物环境信号应答和适应机制蛋白质组学第30-32页
     ·植物组织器官蛋白质组学第32页
     ·植物亚细胞蛋白质组学第32页
     ·鉴定蛋白的不同形式第32-33页
  3 蛋白质组学研究前景和展望第33页
  4 盐芥研究进展第33-37页
   ·盐芥的生长分布第34-35页
   ·胁迫耐受性第35页
   ·离子运输第35-36页
   ·生物化学方面研究第36页
   ·基因表达第36-37页
   ·基因组工具第37页
   ·国际及国内的主要研究小组的研究第37页
   ·盐芥的不同生态型第37页
  5 用蛋白质组学研究研究不同生态型差异的可行性第37-38页
第二部分 实验论文第38-84页
 第一章 盐芥 ThTRXh 功能分析第38-62页
  1 实验材料第38-39页
   ·植物材料第38页
   ·菌种第38页
   ·酶及化学试剂第38页
   ·主要设备第38-39页
   ·软件第39页
  2 实验方法第39-48页
   ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备和转化第39页
   ·碱裂解法质粒的提取第39-40页
   ·GeneClean 方法从琼脂糖凝胶上回收再扩增cDNA 片段第40页
   ·农杆菌感受态的制备及转化第40页
   ·盐芥硫氧还蛋白h(ThTRX h)cDNA 克隆的分离与测序第40-41页
   ·ThTRXh -GST 融合蛋白原核表达载体的构建第41页
   ·ThTRX h -GST 融合蛋白的表达以及纯化第41-42页
   ·硫氧还蛋白h 活性测定第42页
   ·植物表达载体pROKII-ThTRX h 的构建第42页
   ·植物表达载体的农杆菌转化第42页
   ·农杆菌质粒的提取与鉴定第42页
   ·渗透法转化拟南芥第42-43页
   ·转化子的筛选及遗传分析第43-44页
   ·CTAB 法微量提取植物基因组DNA 用于pcr 检测第44页
   ·异硫氰酸胍法大量提取盐芥叶片总 RNA 用于 Northern 杂交第44-45页
   ·Northern 杂交分析第45-46页
   ·过量表达盐芥 ThTRX h 基因拟南芥的生理检测第46页
   ·基因沉默表达载体的构建第46-47页
   ·农杆菌转化及渗透法转化盐芥第47页
   ·盐芥转化子的筛选第47-48页
  3 实验结果及分析第48-59页
   ·盐芥硫氧还蛋白h(ThTRX h)cDNA 序列及分析第48-50页
   ·不同胁迫处理对盐芥硫氧还蛋白h(ThTRX h)基因表达的影响第50-51页
   ·ThTRX h-GST 融合蛋白原核表达载体的构建第51页
   ·融合蛋白的表达、纯化及活性测定第51-53页
   ·转基因拟南芥表型分析第53-59页
  4 讨论第59-62页
 第二章 盐芥不同生态型的比较蛋白质组学初步研究第62-84页
  1 实验材料第62-63页
   ·植物材料第62页
   ·化学试剂第62页
   ·主要设备第62-63页
  2 实验方法第63-67页
   ·材料的培养第63页
   ·样品的提取第63-64页
     ·植物蛋白质的提取第63页
     ·植物蛋白质的裂解第63-64页
   ·蛋白质浓度的定量第64页
   ·样品水化等电聚焦第64-65页
   ·IPG 胶条的平衡第65-66页
   ·第二向垂直SDS-PAGE电泳第66-67页
   ·染色第67页
   ·图像采集第67页
   ·图像分析第67页
   ·差异蛋白点的胶内酶解回收第67页
   ·差异蛋白点的质谱鉴定第67页
   ·质谱鉴定结果分析第67页
  3 实验结果第67-81页
   ·实验材料生长情况第67-68页
   ·一维 SDS-PAGE 蛋白电泳结果第68页
   ·PH4-7,7cm 2-D 凝胶图(IEF/SDS-PAGE)第68-69页
   ·PH3-10,24cm 2-D 凝胶图(IEF/SDS-PAGE)第69-70页
   ·PH4-7,24cm 2-D凝胶图(IEF/SDS-PAGE)第70页
   ·差异点质谱鉴定结果第70-77页
   ·BSA的质谱鉴定情况第77-81页
  4 讨论第81-84页
附录第84-86页
参考文献第86-99页
 盐芥ThTRXh功能分析参考文献第86-91页
 盐芥不同生态型的比较蛋白质组学初步研究参考文献第91-99页
致谢第99页

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