| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-31页 |
| 1 稻瘟病与稻瘟病菌 | 第9-17页 |
| ·稻瘟病的研究历史 | 第9页 |
| ·稻瘟病的症状 | 第9页 |
| ·稻瘟病的危害 | 第9-10页 |
| ·稻瘟病菌的命名 | 第10页 |
| ·稻瘟病菌的生理特性 | 第10-11页 |
| ·稻瘟病的发病规律及侵染周期 | 第11-14页 |
| ·分生孢子的萌发 | 第11-12页 |
| ·附着胞的形成 | 第12-13页 |
| ·病菌的穿透作用 | 第13页 |
| ·病菌入侵后的扩展及新分生孢子的产生 | 第13-14页 |
| ·稻瘟病菌的生理小种 | 第14-16页 |
| ·生理小种与致病性变化 | 第14-15页 |
| ·生理小种与无毒基因学说 | 第15-16页 |
| ·稻瘟病菌有性世代的研究进展 | 第16-17页 |
| ·寻找新的有性世代形成能高的菌株 | 第16-17页 |
| ·稻瘟病菌致病性遗传 | 第17页 |
| 2 稻瘟病菌的分子遗传学研究进展 | 第17-24页 |
| ·稻瘟病菌基因组学研究进展 | 第17-18页 |
| ·EST测序 | 第17-18页 |
| ·基因组测序 | 第18页 |
| ·稻瘟病菌无毒基因的克隆 | 第18-19页 |
| ·水稻抗稻瘟病基因的研究 | 第19-20页 |
| ·稻瘟病菌致病相关基因研究进展 | 第20-24页 |
| ·稻瘟病菌穿透寄主表皮以前的致病相关基因研究进展 | 第20-22页 |
| ·侵入所需机械压力的形成 | 第22页 |
| ·侵入和扩展的分子特点 | 第22-24页 |
| 3 真菌的遗传转化体系 | 第24-28页 |
| ·真菌的遗传选择标记 | 第24-26页 |
| ·营养缺陷型互补筛选 | 第24-25页 |
| ·抗药性显性标记筛选 | 第25-26页 |
| ·真菌转化中的整合质粒与非整合质粒 | 第26-28页 |
| ·基于原核生物质粒的穿梭载体 | 第26页 |
| ·真菌中的自主复制质粒 | 第26-28页 |
| ·真菌的转化方法 | 第28页 |
| 4 稻瘟病菌转化体系的建立 | 第28-30页 |
| 5 本研究的范围、项目来源、目的、意义 | 第30-31页 |
| 第二章 材料和方法 | 第31-43页 |
| 1 菌种 | 第31页 |
| ·细菌菌种 | 第31页 |
| ·真菌菌种 | 第31页 |
| 2 培养基及培养条件 | 第31-33页 |
| ·大肠杆菌培养基 | 第31页 |
| ·LB培养基 | 第31页 |
| ·LA培养基 | 第31页 |
| ·稻瘟病菌培养基 | 第31-32页 |
| ·PDA培养基 | 第31页 |
| ·EP完全培养基 | 第31-32页 |
| ·菌株培养条件 | 第32-33页 |
| 3 抗生素及其使用浓度 | 第33页 |
| 4 质粒DNA的小规模提取 | 第33-34页 |
| 5 DNA的酶切 | 第34页 |
| 6 DNA片段的回收 | 第34-36页 |
| ·用低熔点琼脂糖凝胶回收DNA片段 | 第34-35页 |
| ·电透析法回收DNA片段 | 第35页 |
| ·采用DNA回收试剂盒 | 第35-36页 |
| 7 DNA的连接反应 | 第36页 |
| 8 PCR | 第36页 |
| 9 质粒DNA的转化 | 第36-38页 |
| ·甘油法制备E.coli的感受态细胞 | 第36-37页 |
| ·氯化铷法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第37页 |
| ·质粒DNA的电脉冲转化 | 第37页 |
| ·质粒DNA的热击转化 | 第37-38页 |
| 10 稻瘟病菌总DNA的提取 | 第38页 |
| 11 稻瘟病菌原生质体的制备 | 第38-40页 |
| 12 原生质体的再生 | 第40页 |
| 13 Southern杂交 | 第40-43页 |
| ·向下毛细管转移法进行Southern印迹 | 第40-41页 |
| ·DNA印迹的杂交分析 | 第41-43页 |
| ·预杂交 | 第41页 |
| ·探针标记 | 第41-42页 |
| ·洗膜 | 第42-43页 |
| 第三章 结果与分析 | 第43-57页 |
| 1 稻瘟病菌gpd基因启动子和终止子的克隆 | 第43-48页 |
| 2 3zf(+)-gpd质粒的构建及两株抗苯菌灵的稻瘟病菌突变体的获得 | 第48-49页 |
| ·将PCR扩增得到的Pgpd、Tgpd和Bn~(?)片段与pGEM-3zf(+)vecotr连接 | 第48-49页 |
| ·将3zf(+)-gpd质粒转入稻瘟病菌0742原生质体 | 第49页 |
| 3 两株抗苯菌灵的稻瘟病菌突变体的特性研究 | 第49-57页 |
| ·生理特性 | 第49-50页 |
| ·杂交分析 | 第50-51页 |
| ·稻瘟病菌0742与突变体M1、M2 β-tubulin基因的克隆 | 第51-52页 |
| ·β-tubulin基因的核苷酸序列分析 | 第52-55页 |
| ·稻瘟病β-tubulin基因编码的蛋白产物特性 | 第55-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-71页 |
| 附录1 实验中用到的主要仪器 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
