| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 第一部分 CD95、CD95L在类风湿关节炎患者中的表达 | 第10-24页 |
| 1. 材料 | 第10-12页 |
| ·主要试剂 | 第10页 |
| ·主要溶液配制 | 第10-11页 |
| ·主要仪器设备 | 第11页 |
| ·实验标本 | 第11-12页 |
| 2. 方法 | 第12-17页 |
| ·CD95单克隆抗体免疫组化 | 第12-13页 |
| ·脱氧核糖核酸末端转移酶介导的脱氧核糖核酸缺口标记法(TUNEL) | 第13页 |
| ·细胞的培养 | 第13-15页 |
| ·RT-PCR检测RASFs和OASFs中CD95 mRNA表达水平 | 第15-17页 |
| ·流式细胞术检测(FCM) | 第17页 |
| ·Annexin Ⅴ/PI检测 | 第17页 |
| ·统计学处理 | 第17页 |
| 3. 实验结果 | 第17-22页 |
| ·RA和OA滑膜组织中CD95免疫组化染色结果 | 第17-18页 |
| ·RASFs和OASFs细胞的培养与鉴定 | 第18-19页 |
| ·RASFs细胞内CD95 mRNA表达水平 | 第19-20页 |
| ·细胞CD95表达水平的FCM分析结果 | 第20-21页 |
| ·凋亡细胞的FCM分析结果 | 第21页 |
| ·TUNEL法显示滑膜组织中细胞凋亡水平 | 第21-22页 |
| 4. 讨论 | 第22-24页 |
| 第二部分 CD95活化性抗体对RASFS增殖和促炎反应的作用 | 第24-35页 |
| 1. 材料 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要溶液配制 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| 2. 方法 | 第25-28页 |
| ·RNAi试验 | 第25-26页 |
| ·CD95活化性抗体和CD95 siRNA对RASFs增殖作用观察 | 第26-27页 |
| ·CD95活化性抗体和CD95 siRNA对RASFs炎症反应的作用观察一RT-PCR检测炎症因子IL-6 mRNA表达水平 | 第27-28页 |
| ·统计学处理 | 第28页 |
| 3. 结果 | 第28-33页 |
| ·转染效率 | 第28-29页 |
| ·筛选最佳siRNA片段 | 第29-30页 |
| ·CD95活化性抗体刺激RASFs生长增殖 | 第30-31页 |
| ·沉默CD95后抑制活化性抗体对RASFs的生长增殖的促进作用 | 第31页 |
| ·CD95活化性抗体刺激RASFs的炎症反应 | 第31-32页 |
| ·沉默CD95后抑制活化性抗体对RASFs的炎症反应的促进作用 | 第32-33页 |
| 4. 讨论 | 第33-35页 |
| 第三部分 PI3K/AKT信号通路介导CD95/CD95L非凋亡机制的探讨 | 第35-42页 |
| 1. 材料 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要溶液配制 | 第35-36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| 2. 方法 | 第36-38页 |
| ·PI3K抑制剂对细胞增殖的影响 | 第36页 |
| ·检测细胞内Akt蛋白水平—Western blotting | 第36-38页 |
| 3. 实验结果 | 第38-40页 |
| ·CD95活化性抗体的刺激导致RASFs细胞中Akt蛋白的磷酸化 | 第38-39页 |
| ·采用PI3K抑制剂LY294002可阻断CD95活化性抗体促进RASFs细胞瞬时表达pAkt的作用 | 第39页 |
| ·采用PI3K抑制剂LY294002可抑制CD95活化性抗体对RASFs细胞增殖的促进作用 | 第39-40页 |
| 4. 讨论 | 第40-42页 |
| 结语 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 附录 | 第46-53页 |
| 附录1:英文缩略词 | 第46-47页 |
| 附录2:综述 | 第47-53页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
