| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·γ-氨基丁酸（GABA）概述 | 第8-9页 |
| ·抗衰老 | 第8页 |
| ·心脑管调节及降低血氨 | 第8页 |
| ·治疗神经疾病 | 第8-9页 |
| ·植物防御及生长发育调节 | 第9页 |
| ·氮储备 | 第9页 |
| ·谷氨酸脱羧酶（GAD）概述 | 第9-13页 |
| ·动物GAD | 第9-10页 |
| ·植物GAD | 第10页 |
| ·微生物GAD | 第10-11页 |
| ·GAD 的分子生物学研究 | 第11页 |
| ·GAD 脱羧反应研究 | 第11-13页 |
| ·γ-氨基丁酸的制备研究 | 第13-14页 |
| ·化学法 | 第13页 |
| ·生物法 | 第13-14页 |
| ·γ-氨基丁酸的测定方法 | 第14-15页 |
| ·本课题的立题背景 | 第15页 |
| ·本课题的研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 谷氨酸脱羧酶的克隆表达及分离纯化 | 第17-27页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·材料与方法 | 第17-21页 |
| ·菌株与载体 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要实验仪器 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·蛋白电泳试剂 | 第18-19页 |
| ·大肠杆菌E. coli 感受态的制备及转化方法 | 第19页 |
| ·Lactococcus lactis subsp. lactis Ⅲ403 GAD 基因的PCR 扩增 | 第19页 |
| ·PCR 产物的亚克隆、鉴定 | 第19-20页 |
| ·重组工程菌的构建 | 第20页 |
| ·工程菌的诱导表达 | 第20-21页 |
| ·重组GAD 的分离纯化 | 第21页 |
| ·重组GAD 生物活性测定 | 第21页 |
| ·GABA 检测 | 第21页 |
| ·结果与讨论 | 第21-26页 |
| ·Lactococcus lactis subsp. lactis Ⅲ403 GAD 基因的PCR 扩增和亚克隆 | 第21-23页 |
| ·重组工程菌的构建 | 第23-24页 |
| ·工程菌的诱导表达 | 第24页 |
| ·重组GAD 的分离纯化 | 第24-25页 |
| ·工程菌的GAD 活性研究 | 第25-26页 |
| ·本章小结 | 第26-27页 |
| 第三章 GAD 的酶学性质研究 | 第27-34页 |
| ·前言 | 第27页 |
| ·材料与方法 | 第27-29页 |
| ·实验主要试剂 | 第27页 |
| ·Lowry 试剂 | 第27页 |
| ·pH 对酶活的影响 | 第27-28页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第28页 |
| ·不同金属离子对酶活的影响 | 第28页 |
| ·酶液蛋白浓度测定 | 第28页 |
| ·酶反应动力学常数的测定 | 第28-29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-33页 |
| ·pH 对GAD 酶活的影响 | 第29页 |
| ·温度对GAD 酶活的影响 | 第29-31页 |
| ·金属离子对GAD 酶活的影响 | 第31页 |
| ·酶液的蛋白浓度 | 第31-32页 |
| ·酶反应动力学常数 | 第32-33页 |
| ·本章小结 | 第33-34页 |
| 第四章 工程菌细胞转化法生产GABA 的研究 | 第34-42页 |
| ·引言 | 第34页 |
| ·材料与方法 | 第34-35页 |
| ·实验主要试剂 | 第34-35页 |
| ·实验主要仪器 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·培养及诱导方法 | 第35页 |
| ·细胞转化法测定酶活及制备GABA | 第35页 |
| ·细胞转化反应中H+消耗数与GABA 量的相关性分析研究 | 第35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-41页 |
| ·碳源对GABA 生成量的影响 | 第35-36页 |
| ·氮源浓度对GABA 生成量的影响 | 第36页 |
| ·发酵培养基的正交优化 | 第36-37页 |
| ·诱导剂对GABA 生成量的影响 | 第37-38页 |
| ·诱导因素的正交优化 | 第38-39页 |
| ·底物添加方式对GABA 生成量的影响 | 第39-40页 |
| ·细胞转化反应中H+消耗数与GABA 量的相关性分析 | 第40-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 主要结论 | 第42-43页 |
| 问题与展望 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |
