中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1 足螨病研究进展 | 第10-14页 |
·病原形态与分类 | 第10-12页 |
·形态特征 | 第10页 |
·形态与生物学分类 | 第10-11页 |
·分子生物学分类 | 第11-12页 |
·生物学与流行病学 | 第12-13页 |
·生活史 | 第12页 |
·寄生部位 | 第12页 |
·分布 | 第12-13页 |
·诊断与防治 | 第13-14页 |
·结语 | 第14页 |
2 寄生虫副肌球蛋白研究进展 | 第14-18页 |
·副肌球蛋白的分布与特征 | 第14页 |
·副肌球蛋白的分子生物学特征 | 第14-16页 |
·副肌球蛋白疫苗研究 | 第16-18页 |
·天然蛋白疫苗 | 第16-17页 |
·重组蛋白疫苗 | 第17页 |
·核酸疫苗 | 第17-18页 |
·展望 | 第18页 |
3 本实验的目的意义 | 第18-19页 |
第二章 熊猫足螨副肌球蛋白的克隆与原核表达 | 第19-58页 |
1 材料与方法 | 第19-32页 |
·试验材料 | 第19-21页 |
·试验样品来源 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·菌株和克隆载体 | 第19页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
·常用缓冲液和培养基的配制 | 第19-21页 |
·主要生物学数据库和计算机软件 | 第21页 |
·试验方法 | 第21-32页 |
·大熊猫足螨的采集与纯化 | 第21页 |
·形态学观察鉴定 | 第21页 |
·足螨副肌球蛋白基因的克隆 | 第21-25页 |
·足螨副肌球蛋白基因的原核表达载体构建 | 第25-28页 |
·重组pET32a(+)-Pmy质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第28-30页 |
·重组pET32a(+)-Pmy质粒表达产物免疫印迹 | 第30-32页 |
2 实验结果 | 第32-48页 |
·足螨副肌球蛋白基因的克隆 | 第32-43页 |
·副肌球蛋白基因的PCR扩增 | 第32页 |
·重组克隆副肌球蛋白基因质粒的PCR鉴定 | 第32-33页 |
·重组克隆副肌球蛋白基因质粒的测序鉴定 | 第33-34页 |
·重组克隆质粒的序列分析 | 第34-38页 |
·该基因片段的蛋白质生物信息学分析 | 第38-43页 |
·足螨副肌球蛋白的亚克隆 | 第43-44页 |
·加酶切位点引物的PCR扩增 | 第43页 |
·重组质粒的PCR鉴定与酶切鉴定 | 第43-44页 |
·足螨副肌球蛋白基因重组表达质粒的构建与鉴定 | 第44-45页 |
·重组表达质粒的酶切鉴定 | 第44-45页 |
·重组表达质粒的测序鉴定 | 第45页 |
·重组表达蛋白质同源性分析 | 第45页 |
·足螨副肌球蛋白基因重组表达质粒的表达产物SDS-PAGE电泳 | 第45-46页 |
·诱导鉴定 | 第45页 |
·IPTG浓度梯度及时间梯度 | 第45-46页 |
·足螨副肌球蛋白基因重组表达质粒的表达产物免疫印迹 | 第46-48页 |
3 讨论 | 第48-52页 |
4 结论 | 第52-53页 |
5 参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读硕士学位期间论文发表 | 第59页 |