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实时荧光定量RT-PCR检测1型鸭病毒性肝炎方法的建立和应用

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
1 文献综述第12-17页
   ·引言第12页
   ·DHV-1的研究进展第12-14页
     ·DHV-1基因组特征第12-14页
     ·DHV-1的培养特性第14页
   ·1型鸭病毒性肝炎诊断方法的研究进展第14-15页
   ·实时荧光定量RT-PCR方法概述第15-16页
   ·DHV-1在鸭体内分布规律的研究进展第16-17页
   ·1型鸭病毒性肝炎的流行病学概述第17页
   ·选题目的和意义第17页
2 材料与方法第17-25页
   ·试验材料第18-19页
     ·毒株与菌株第18页
     ·试验动物第18页
     ·主要试验仪器第18页
     ·主要购买试剂及其它配制试剂第18-19页
   ·特异性检测DHV-1的荧光定量RT-PCR方法的建立第19-23页
     ·引物与探针的制备第19-20页
     ·病毒和细菌的增殖第20页
     ·核酸提取第20-21页
     ·rRT-PCR标准品的制备第21页
     ·rRT-PCR的建立及反应条件的优化第21-22页
     ·rRT-PCR标准曲线的制作第22页
     ·rRT-PCR检测标准品模板的敏感性第22页
     ·rRT-PCR的重复性试验第22页
     ·rRT-PCR的特异性试验第22-23页
     ·检测DHV-1强毒在鸭胚中的分布和弱毒在鸡胚中的分布第23页
     ·对人工感染病例的检测及其与病毒分离和中和试验的比较第23页
     ·对临床送检病料的检测及其与病毒分离和中和试验的比较第23页
   ·人工疾病模型中病原动态分布规律的定量研究第23-24页
     ·动物接种方案第23页
     ·采样方案第23-24页
     ·样品的处理第24页
     ·样品的定量检测第24页
   ·感染DHV-1强毒耐过鸭排毒规律的研究第24-25页
     ·动物感染方案第24页
     ·采样方案第24-25页
   ·四川地区健康鸭群及养鸭环境中DHV-1的流行病学调查第25页
     ·采样方案第25页
     ·样品的处理第25页
3 实验结果第25-45页
   ·荧光定量RT-PCR方法的建立第25-29页
     ·反应条件的优化第25页
     ·rRT-PCR标准曲线的制作第25页
     ·rRT-PCR检测标准品模板的敏感性第25-28页
     ·rRT-PCR特异性试验第28页
     ·重复性试验第28-29页
   ·DHV-1强毒在鸭胚中的分布和弱毒在鸡胚中的分布第29-30页
   ·两种方法对人工感染病例和临床送检病料的检测第30-31页
   ·人工疾病模型中病原动态分布规律的定量研究第31-42页
     ·临床表现第31页
     ·不同接种途径rRT-PCR检测结果及DHV-1在鸭体内分布规律第31-42页
   ·感染DHV-1强毒耐过鸭排毒规律的研究第42-44页
     ·耐过鸭群的粪便检测结果第42-44页
     ·同居鸭检测结果第44页
   ·四川地区健康鸭群及养鸭环境携带DHV-1的流行病学调查第44-45页
4 讨论第45-54页
   ·检测DHV-1荧光定量RT-PCR方法的建立第45-46页
   ·DHV-1强毒在鸭胚中的分布规律及弱毒在鸡胚中的分布规律第46-47页
   ·两种方法对人工感染病例和临床送检病料的检测第47-48页
   ·人工疾病模型中病原动态分布规律的定量研究第48-52页
     ·DHV-1在雏鸭体内出现的时间规律第48-49页
     ·DHV-1在雏鸭体内含量达到最高峰的时间规律第49页
     ·雏鸭各组织器官感染DHV-1的含量特征第49-50页
     ·与组织病理学和免疫组化法检测DHV-1分布规律的比较第50-52页
   ·感染DHV-1强毒耐过鸭排毒规律的研究第52页
   ·四川地区健康鸭群及养鸭环境携带DHV-1的流行病学调查第52-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-61页
致谢第61-62页
攻读硕士学位期间发表论文情况第62页

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