| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-30页 |
| ·雨生红球藻概述 | 第13-15页 |
| ·雨生红球藻的生物学特性 | 第13-14页 |
| ·利用雨生红球藻生产虾青素的现状及其局限性 | 第14-15页 |
| ·雨生红球藻遗传转化研究进展 | 第15-19页 |
| ·雨生红球藻中虾青素合成相关酶基因的克隆和调控研究 | 第15-18页 |
| ·雨生红球藻遗传转化研究进展 | 第18-19页 |
| ·真核微藻的遗传转化研究进展 | 第19-28页 |
| ·选择标记 | 第20-22页 |
| ·启动子 | 第22-26页 |
| ·真核微藻的遗传转化方法 | 第26-28页 |
| ·本课题的研究意义和研究内容 | 第28-30页 |
| 第二章 雨生红球藻α-tubulin 5’-侧翼区域的分离 | 第30-51页 |
| ·实验材料 | 第30-32页 |
| ·雨生红球藻藻株 | 第30页 |
| ·引物合成与序列测序 | 第30-31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31-32页 |
| ·研究方法 | 第32-40页 |
| ·雨生红球藻培养方法 | 第32-33页 |
| ·分离雨生红球藻α-tubulin基因5’-侧翼区域的实验流程 | 第33页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第33-34页 |
| ·α-tubulin基因组DNA片段的扩增 | 第34-35页 |
| ·基因组步移法分离α-tubulin基因5’-侧翼区域 | 第35-40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-50页 |
| ·雨生红球藻α-tubulin基因组序列的扩增 | 第40-44页 |
| ·α-tubulin基因5’-侧翼区域的分离 | 第44-47页 |
| ·α-tubulin基因5’-侧翼序列分析 | 第47-50页 |
| ·本章小结 | 第50-51页 |
| 第三章 雨生红球藻表达载体的构建 | 第51-63页 |
| ·实验材料 | 第51-52页 |
| ·大肠杆菌菌株和质粒 | 第51页 |
| ·引物合成与序列测序 | 第51-52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52页 |
| ·研究方法 | 第52-58页 |
| ·构建雨生红球藻表达载体的实验流程图 | 第52-53页 |
| ·PCR扩增α-tubulin基因5’-侧翼区域（加酶切位点） | 第53-54页 |
| ·SOE PCR扩增Sh ble-莱茵衣藻rbcS2 终止子片段 | 第54-55页 |
| ·载体pSP124S的酶切和去磷酸化 | 第55-56页 |
| ·目的片段和载体的连接 | 第56-57页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第57页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第57-58页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-62页 |
| ·雨生红球藻α-tubulin基因5’-侧翼区域的扩增（加酶切位点） | 第58-59页 |
| ·Sh ble-莱茵衣藻rbcS2 终止子片段的扩增 | 第59页 |
| ·载体pSP124S的酶切 | 第59-60页 |
| ·目的片段和载体的连接 | 第60页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第60-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第四章 雨生红球藻电转化方法的建立 | 第63-79页 |
| ·实验材料 | 第63-64页 |
| ·主要试剂 | 第63页 |
| ·主要仪器设备 | 第63-64页 |
| ·引物 | 第64页 |
| ·研究方法 | 第64-69页 |
| ·细胞生长曲线测定 | 第64页 |
| ·载体DNA制备 | 第64页 |
| ·雨生红球藻在固体KM1 培养基中对zeocin的敏感性检测 | 第64-65页 |
| ·电转化程序 | 第65-66页 |
| ·RT-PCR检测ble基因的瞬时表达 | 第66-69页 |
| ·结果与讨论 | 第69-77页 |
| ·雨生红球藻生长曲线 | 第69页 |
| ·雨生红球藻在固体KM1 培养基中对zeocin的敏感性 | 第69-70页 |
| ·电击缓冲液、DNA和温度 | 第70-71页 |
| ·电击条件对雨生红球藻细胞存活率的影响 | 第71-75页 |
| ·RT-PCR检测ble基因在雨生红球藻中的瞬时表达 | 第75-77页 |
| ·ble稳定转化子筛选 | 第77页 |
| ·本章小结 | 第77-79页 |
| 结论与展望 | 第79-81页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 创新点 | 第80页 |
| 展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-94页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
