节杆菌β-呋喃果糖苷酶基因克隆、表达及性质研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-25页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶概述 | 第12-14页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶的来源与特性 | 第12-13页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶的应用现状 | 第13-14页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶的制备方法 | 第14-16页 |
| ·微生物来源的β-呋喃果糖苷酶的生产 | 第14-16页 |
| ·其他制备方式 | 第16页 |
| ·克隆基因在大肠杆菌中的表达 | 第16-23页 |
| ·表达载体 | 第16-19页 |
| ·表达宿主 | 第19-20页 |
| ·工程菌的培养 | 第20-23页 |
| ·研究的目的与意义 | 第23-25页 |
| 第二章 β-呋喃果糖苷酶的基因克隆 | 第25-39页 |
| ·前言 | 第25页 |
| ·实验仪器与材料 | 第25-28页 |
| ·菌株与质粒 | 第25页 |
| ·表达载体与引物 | 第25-26页 |
| ·试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·常用溶液 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-33页 |
| ·节杆菌10137 产酶能力的验证 | 第28-29页 |
| ·pMD19-T-bff 的构建 | 第29-30页 |
| ·重组大肠杆菌 pFL-B13cl-bff 构建 | 第30-32页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-38页 |
| ·菌株产β-呋喃果糖苷酶能力的验证 | 第33-34页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶的基因克隆与序列分析 | 第34-37页 |
| ·重组蛋白鉴定 | 第37-38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 β-呋喃果糖苷酶在重组大肠杆菌中的表达 | 第39-56页 |
| ·前言 | 第39页 |
| ·实验仪器与材料 | 第39-40页 |
| ·菌种 | 第39页 |
| ·主要试剂与溶液 | 第39页 |
| ·主要仪器及设备 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-42页 |
| ·菌种活化 | 第40页 |
| ·摇瓶培养优化 | 第40-41页 |
| ·发酵培养 | 第41-42页 |
| ·菌体收集 | 第42页 |
| ·菌体破碎 | 第42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-54页 |
| ·重组大肠杆菌的生长曲线 | 第42-43页 |
| ·培养条件的研究 | 第43-50页 |
| ·5 L 发酵罐培养 | 第50-54页 |
| ·本章小结 | 第54-56页 |
| 第四章 β-呋喃果糖苷酶的酶学特性研究 | 第56-66页 |
| ·前言 | 第56页 |
| ·实验仪器与材料 | 第56-57页 |
| ·主要仪器与设备 | 第56页 |
| ·溶液 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-58页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶的纯化 | 第57-58页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶的酶学特性研究方法 | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-64页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶的纯化 | 第58-60页 |
| ·β-呋喃果糖苷酶热稳定性的研究 | 第60-62页 |
| ·pH 值 β-呋喃果糖苷酶活力的影响 | 第62-63页 |
| ·金属离子对β-呋喃果糖苷酶活力的影响 | 第63-64页 |
| ·本章小结 | 第64-66页 |
| 结论与展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
