苏云金杆菌cry9Ea7基因的克隆与表达
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 引言 | 第8-17页 |
| ·苏云金芽胞杆菌概述 | 第8-9页 |
| ·杀虫毒素 | 第9-14页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫毒素种类 | 第9-10页 |
| ·苏云金芽胞杆菌δ-内毒素的分类 | 第10-11页 |
| ·苏云金芽胞杆菌cry 基因的鉴定 | 第11-12页 |
| ·苏云金芽胞杆菌cry 基因的克隆 | 第12-13页 |
| ·苏云金芽胞杆菌δ-内毒素的分子结构及其功能 | 第13-14页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的作用机理 | 第14页 |
| ·杀虫晶体蛋白的应用 | 第14-15页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-30页 |
| ·材料 | 第17-20页 |
| ·菌株与质粒 | 第17页 |
| ·供试昆虫 | 第17页 |
| ·培养基与抗生素 | 第17-18页 |
| ·试剂 | 第18-20页 |
| ·仪器设备 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-30页 |
| ·苏云金杆菌质粒DNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·PCR-RFLP 鉴定 | 第21页 |
| ·cry9Ea 基因的克隆 | 第21-25页 |
| ·cry9Ea 序列测定与分析 | 第25页 |
| ·Cry9Ea7 蛋白序列分析 | 第25页 |
| ·cry9Ea7 基因的诱导表达 | 第25-26页 |
| ·Bt 工程菌的构建 | 第26-28页 |
| ·工程菌晶体观察及晶体蛋白提取 | 第28页 |
| ·晶体蛋白生物活性测定 | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-41页 |
| ·Bt4 质粒DNA 的提取及cry 基因的鉴定 | 第30-31页 |
| ·cry9Ea 全长基因的扩增与克隆 | 第31-32页 |
| ·cry9Ea 基因的序列测定与分析 | 第32页 |
| ·Cry9Ea7 氨基酸序列特性分析 | 第32-37页 |
| ·cry9Ea7 基因的诱导表达 | 第37-38页 |
| ·Bt 工程菌的分子检测 | 第38页 |
| ·Bt 工程菌的晶体观察 | 第38-39页 |
| ·cry9Ea7 基因在 HD73-中的表达 | 第39页 |
| ·工程菌BioHD9Ea7 的生长特征 | 第39-40页 |
| ·Cry9Ea7 蛋白生物活性测定 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| ·Bt 质粒的提取 | 第41页 |
| ·cry 基因的鉴定 | 第41页 |
| ·cry 基因的克隆策略 | 第41-42页 |
| ·cry 基因在大肠杆菌中的表达 | 第42页 |
| ·Cry9Ea7 蛋白的活性 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录1 缩略词 | 第49-51页 |
| 附录2 Gen Bank 登记资料 | 第51-54页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
| 个人简历 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
