中文摘要 | 第1-13页 |
ABSTRACT | 第13-21页 |
符号说明 | 第21-24页 |
第一章 前言 | 第24-44页 |
·淀粉的基本特性和用途 | 第24-26页 |
·淀粉合成机制 | 第26-33页 |
·淀粉合成相关酶类 | 第26页 |
·腺苷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGP) | 第26-29页 |
·AGPase的定位及特点 | 第26-27页 |
·AGPase的大小亚基的功能与特点 | 第27-28页 |
·AGPase酶活性的改变及对作物淀粉含量的影响 | 第28-29页 |
·淀粉合成酶(SS) | 第29-30页 |
·淀粉分支酶(SBE) | 第30-33页 |
·SBE的分类及特点 | 第30-31页 |
·SBE编码基因的表达及特点 | 第31-32页 |
·SBE基因的功能研究 | 第32-33页 |
·淀粉去分支酶(SDBE) | 第33页 |
·改良玉米淀粉含量和性质的可行途径 | 第33-41页 |
·利用突变基因改变淀粉含量及理化性质 | 第33-35页 |
·RNAi技术在淀粉改良中的应用 | 第35-41页 |
·RNAi机制的原理 | 第35-36页 |
·RNAi在植物改良中的应用 | 第36-37页 |
·双链RNA结构的合成和RNAi载体的设计原则 | 第37-38页 |
·RNAi表达结构的构建 | 第38-40页 |
·通过抑制SBE活性提高直链淀粉的研究 | 第40-41页 |
·玉米基因工程改良研究的现状 | 第41-42页 |
·本研究的目的与意义 | 第42-44页 |
第二章 过表达AGPASE提高玉米淀粉含量和籽粒产量 | 第44-68页 |
·材料与方法 | 第44-55页 |
·植物材料和菌种及质粒载体 | 第44页 |
·基因克隆和植物表达载体的构建 | 第44-47页 |
·玉米cNDA的合成 | 第44-45页 |
·AGPase大、小亚基基因的克隆 | 第45-46页 |
·植物表达载体的构建 | 第46-47页 |
·转基因玉米的产生 | 第47-48页 |
·转化受体的获得 | 第47页 |
·农杆菌培养 | 第47-48页 |
·农杆菌介导的玉米芽尖转化 | 第48页 |
·转基因株系的产生 | 第48页 |
·转基因玉米的分子检测 | 第48-53页 |
·PCR检测 | 第48-49页 |
·转基因玉米的Southern杂交检测 | 第49-51页 |
·定量RT-PCR检测 | 第51-53页 |
·转基因玉米的性状分析 | 第53-55页 |
·酶活性检测 | 第53-54页 |
·淀粉含量检测 | 第54-55页 |
·植株产量的测定 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-65页 |
·目的基因的克隆 | 第55-58页 |
·mRNA的分离和cDNA的合成 | 第55-56页 |
·玉米AGPase小亚基基因Bt2的克隆及鉴定 | 第56-57页 |
·玉米AGPase大亚基基因Sh2的克隆及鉴定 | 第57-58页 |
·植物表达载体的构建 | 第58页 |
·转基因植株的获得 | 第58-59页 |
·转基因玉米的分子检测 | 第59-61页 |
·转基因植株的AGPase活性测定 | 第61-62页 |
·籽粒淀粉含量分析 | 第62页 |
·转基因玉米籽粒性状的分析 | 第62-65页 |
·百粒重分析 | 第62-63页 |
·不同转基因株系的籽粒表型的差异 | 第63-64页 |
·田间测产结果 | 第64-65页 |
·讨论 | 第65-68页 |
第三章 利用RNAI机制创制高直链淀粉玉米新材料 | 第68-86页 |
·材料与方法 | 第68-73页 |
·植物材料和菌种及质粒载体 | 第68页 |
·目的基因的获得 | 第68-69页 |
·玉米cDNA的合成 | 第68页 |
·靶基因片段的克隆 | 第68-69页 |
·PCR产物的回收、克隆及测序 | 第69页 |
·干扰载体的构建 | 第69-70页 |
·转基因玉米的产生 | 第70-71页 |
·转基因玉米的分子检测 | 第71页 |
·转基因植物的生理学测定和性状分析 | 第71-73页 |
·酶活性检测 | 第71-72页 |
·淀粉含量检测 | 第72-73页 |
·株系选择和产量测定 | 第73页 |
·转基因植株农艺性状的大田观察 | 第73页 |
·结果与分析 | 第73-82页 |
·玉米淀粉分支酶基因SBEⅡa、SBEⅡb干扰片段的克隆和序列分析 | 第73-74页 |
·RNAi表达载体的构建和鉴定 | 第74-75页 |
·转基因玉米的分子检测 | 第75-77页 |
·PCR检测 | 第75-76页 |
·Southern检测 | 第76页 |
·靶基因表达强度的分析 | 第76-77页 |
·SBE酶活性检测 | 第77-78页 |
·转基因植株籽粒淀粉含量和直链淀粉含量的影响 | 第78-79页 |
·转SBEⅡ RNAi结构对玉米百粒重及产量的影响 | 第79-82页 |
·讨论 | 第82-86页 |
第四章 通过转基因植株的杂交培育高淀粉高直链淀粉玉米材料 | 第86-93页 |
·材料与方法 | 第86-87页 |
·材料 | 第86页 |
·方法 | 第86-87页 |
·材料的准备 | 第86页 |
·检测方法 | 第86-87页 |
·果穗性状和产量测定 | 第87页 |
·结果与分析 | 第87-90页 |
·转基因植株的分子生物学鉴定 | 第87页 |
·转基因表达分析 | 第87-88页 |
·AGPase和SBE的酶活性检测 | 第88-89页 |
·转基因聚合植株籽粒淀粉和直链淀粉含量的变化 | 第89-90页 |
·植株性状分析 | 第90页 |
·讨论 | 第90-93页 |
第五章 总结与展望 | 第93-97页 |
参考文献 | 第97-107页 |
致谢 | 第107-108页 |
攻读学位期间发表的学术论文及专利 | 第108-109页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第109页 |