| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-38页 |
| ·甲酸脱氢酶 | 第13-20页 |
| ·NAD~+依赖型甲酸脱氢酶的结构 | 第14-15页 |
| ·NAD~+依赖型甲酸脱氢酶的催化性质 | 第15-20页 |
| ·甲酸脱氢酶催化的辅酶再生体系 | 第20-24页 |
| ·生物催化制备手性化合物 | 第20页 |
| ·辅酶再生 | 第20-24页 |
| ·高密度培养 | 第24-32页 |
| ·高密度培养的限制性因素 | 第24-26页 |
| ·流加补料策略 | 第26-28页 |
| ·减少乙酸积累的调控 | 第28-32页 |
| ·甲酸脱氢酶高密度培养生产现状 | 第32页 |
| ·4-氯乙酰乙酸乙酯的不对称还原 | 第32-36页 |
| ·本课题拟研究的内容 | 第36-38页 |
| ·研究目的 | 第36页 |
| ·研究内容 | 第36-38页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第38-48页 |
| ·菌株与质粒 | 第38页 |
| ·工具酶与主要试剂 | 第38-39页 |
| ·实验仪器 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39-40页 |
| ·实验操作及分析检测方法 | 第40-48页 |
| ·分子克隆相关实验操作 | 第40页 |
| ·pH和溶解氧检测 | 第40页 |
| ·大肠杆菌菌体密度检测方法 | 第40页 |
| ·大肠杆菌生物量检测方法 | 第40页 |
| ·葡萄糖浓度检测 | 第40-41页 |
| ·高效液相色谱法分析检测乙酸 | 第41-42页 |
| ·蛋白浓度检测 | 第42-43页 |
| ·甲酸脱氢酶酶活力检测 | 第43-44页 |
| ·红串红球菌醇脱氢酶活力检测 | 第44-45页 |
| ·COBE不对称还原的产物得率和对映体过量率分析 | 第45-48页 |
| 第三章 模拟指数流加方法的建立 | 第48-53页 |
| ·引言 | 第48-49页 |
| ·材料与方法 | 第49页 |
| ·实验菌株 | 第49页 |
| ·培养基与培养条件 | 第49页 |
| ·分析检测方法 | 第49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-52页 |
| ·模拟指数流加方法的建立 | 第49-51页 |
| ·表观得率系数Y_(X/S)的测定 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第四章 拟指数流加高密度培养工艺研究 | 第53-68页 |
| ·引言 | 第53-54页 |
| ·材料与方法 | 第54页 |
| ·实验菌株 | 第54页 |
| ·培养基与培养条件 | 第54页 |
| ·分析检测方法 | 第54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-66页 |
| ·诱导时机的选择 | 第55-57页 |
| ·诱导前补料策略的优化 | 第57-61页 |
| ·诱导后不同比生长速率对乙酸积累和FDH产量的影响 | 第61-66页 |
| ·小结 | 第66-68页 |
| 第五章 NADH再生型双酶耦联体系的初步研究 | 第68-85页 |
| ·引言 | 第68-69页 |
| ·材料与方法 | 第69-75页 |
| ·菌株与质粒 | 第69-71页 |
| ·培养基与培养条件 | 第71页 |
| ·工具酶与主要试剂 | 第71页 |
| ·红串红球菌基因组的提取 | 第71-72页 |
| ·质粒的提取及转化 | 第72页 |
| ·红串红球菌ADH基因重组质粒的构建 | 第72-73页 |
| ·菌体培养与ADH的诱导表达 | 第73页 |
| ·SDS-PAGE检测重组蛋白ADH | 第73页 |
| ·大肠杆菌菌体密度与ADH酶活力的检测 | 第73-74页 |
| ·ADH的分离纯化 | 第74-75页 |
| ·耦联体系的构建及COBE不对称还原 | 第75页 |
| ·结果与讨论 | 第75-84页 |
| ·红串红球菌ADH基因重组质粒的构建 | 第75-77页 |
| ·ADH的诱导表达及鉴定 | 第77页 |
| ·ADH诱导表达条件优化 | 第77-80页 |
| ·重组蛋白ADH的分离纯化 | 第80-82页 |
| ·耦联体系的构建及COBE不对称还原 | 第82-84页 |
| ·小结 | 第84-85页 |
| 第六章 结论与展望 | 第85-88页 |
| ·结论 | 第85-87页 |
| ·展望 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 作者简历 | 第98页 |