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水稻籽粒相关性状QTL鉴定与基因克隆研究

摘要第3-5页
abstract第5-7页
英文缩略词第8-13页
第一章 文献综述第13-35页
    1.1 水稻遗传图谱构建与QTL作图研究进展第13-18页
        1.1.1 水稻遗传图谱构建进展第13-14页
        1.1.2 高通量测序技术在图谱构建的利用第14-16页
        1.1.3 水稻数量遗传性状与QTL定位第16-18页
    1.2 水稻籽粒性相关性状研究现状第18-29页
        1.2.1 籽粒灌浆动态生物学基础第18页
        1.2.2 籽粒发育与胚乳淀粉合成积累第18-21页
        1.2.3 籽粒性状与稻米理化品质第21-22页
        1.2.4 水稻籽粒性状的遗传分析与QTL定位第22-25页
        1.2.5 水稻籽粒性状基因克隆研究第25-29页
    1.3 基于分子标记选择的水稻生物育种第29-33页
        1.3.1 分子标记第29-30页
        1.3.2 高通量DNA制备技术第30-31页
        1.3.3 基因型检测(基因分型)技术第31-32页
        1.3.4 水稻生物育种展望第32-33页
    1.4 本研究的目的与意义第33-35页
第二章 籽粒理化特性、灌浆动态与组织细胞学观察第35-53页
    2.1 引言第35页
    2.2 材料与方法第35-40页
        2.2.1 供试材料与种植第35-36页
        2.2.2 籽粒外观性状与理化特性调查第36-37页
        2.2.3 淀粉RVA检测第37页
        2.2.4 籽粒灌浆动态调查第37-38页
        2.2.5 淀粉酶活性测定第38-39页
        2.2.6 组织细胞学观察第39-40页
    2.3 结果与分析第40-52页
        2.3.1 籽粒外观形态性状与理化特性第40-42页
        2.3.2 籽粒淀粉RVA谱分析第42-45页
        2.3.3 籽粒灌浆特性调查第45-47页
        2.3.4 淀粉合成酶调查分析第47-48页
        2.3.5 组织细胞学观察第48-52页
    2.4 小结与讨论第52-53页
第三章 高密度遗传图谱构建与籽粒性状QTL定位第53-76页
    3.1 引言第53页
    3.2 材料与方法第53-55页
        3.2.1 试验材料第53-54页
        3.2.2 水稻基因组DNA制备和检测第54页
        3.2.3 高通量测序和数据评估第54页
        3.2.4 遗传重组鉴定和连锁图谱构建第54-55页
        3.2.5 作图群体及其表型性状调查分析第55页
        3.2.6 QTL作图和分析第55页
    3.3 结果与分析第55-73页
        3.3.1 基因组测序与基于GBS的作图群体SNP分析第55-58页
        3.3.2 重组位点标记与遗传图谱构建第58-60页
        3.3.3 群体表型变异分析第60-65页
        3.3.4 籽粒相关性状QTL作图第65-70页
        3.3.5 多环境稳定QTL和QTL簇分析第70-73页
    3.4 小结与讨论第73-76页
第四章 水稻籽粒基因表达谱分析第76-97页
    4.1 引言第76-77页
    4.2 材料与方法第77-78页
        4.2.1 水稻材料第77页
        4.2.2 RNA提取、测序文库构建及大规模测序第77页
        4.2.3 生物信息学分析第77-78页
        4.2.4 基因定量qRT-PCR第78页
    4.3 结果与分析第78-95页
        4.3.1 籽粒转录测组序与表达谱检测第78-81页
        4.3.2 差异表达基因的筛选和功能注释第81-89页
        4.3.3 籽粒发育相关功能基因的表达分析第89-91页
        4.3.4 基于高通量测序的BSR(Bulk segregant RNA-seq)分析第91-95页
    4.4 小结与讨论第95-97页
第五章 QTL的共定位与候选基因筛选鉴定第97-124页
    5.1 引言第97页
    5.2 材料与方法第97-104页
        5.2.1 材料与试剂第97-98页
        5.2.2 DNA、RNA提取、PCR扩增及克隆第98页
        5.2.3 候选基因qRT-PCR第98-99页
        5.2.4 表达载体构建第99-101页
        5.2.5 水稻原生质体的游离、转化及亚细胞定位观察第101-102页
        5.2.6 遗传转化第102-103页
        5.2.7 转基因后代PCR鉴定第103-104页
        5.2.8 转化植株籽粒表型鉴定第104页
    5.3 结果与分析第104-122页
        5.3.1 籽粒相关QTL共定位第104-109页
        5.3.2 候选基因筛选克隆和序列变异分析第109-111页
        5.3.3 基因表达模式分析第111-113页
        5.3.4 表达载体构建和检测第113-120页
            5.3.4.1 CRISPR/Cas9突变载体构建第113-115页
            5.3.4.2 过量表达(Over expression)载体构建第115-117页
            5.3.4.3 融合GFP蛋白表达载体构建和亚细胞定位第117-120页
        5.3.5 遗传转化与转基因植株的初步鉴定第120-122页
    5.4 小结与讨论第122-124页
第六章 籽粒性状分子标记与基因分型体系开发应用第124-138页
    6.1 引言第124页
    6.2 材料与方法第124-126页
        6.2.1 水稻材料第124页
        6.2.2 水稻高通量磁珠法DNA提取第124-125页
        6.2.3 DNA产量和质量检测评估第125页
        6.2.4 分子标记来源与设计第125页
        6.2.5 PCR扩增和产物检测第125-126页
        6.2.6 统计分析及标记-性状关联检测第126页
    6.3 结果与分析第126-137页
        6.3.1 高通量DNA提取和基因分型技术的创新和集成第126-131页
        6.3.2 分子标记的选择设计、检测分析与验证第131-134页
        6.3.3 标记-性状关联和种质资源有利等位挖掘第134-137页
    6.4 小结与讨论第137-138页
第七章 全文结论与讨论第138-149页
    7.1 主要结论第138-140页
    7.2 综合讨论第140-147页
        7.2.1 水稻籽粒性状QTL效应及育种利用第140-142页
        7.2.2 籽粒大小信号调控网络与粒型分子调控机制探讨第142-145页
        7.2.3 垩白形成分子调控机制探讨第145-146页
        7.2.4 高通量测序技术在水稻遗传育种中的应用第146-147页
    7.3 本研究的创新之处第147-148页
    7.4 进一步研究设想第148-149页
致谢第149-150页
参考文献第150-161页
附录A 集群子代分离池之间差异表达基因富集分析表第161-162页
附录B 研究生在读期间论文发表第162页

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