| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 绪论 | 第20-32页 |
| 1.1 乳腺癌简介 | 第20-22页 |
| 1.1.1 乳腺癌的分布及分型 | 第20页 |
| 1.1.2 乳腺癌的病因及诊断 | 第20-21页 |
| 1.1.3 乳腺癌的临床治疗 | 第21-22页 |
| 1.2 非编码RNA简介 | 第22-25页 |
| 1.2.1 非编码RNA的分类 | 第22-23页 |
| 1.2.2 长非编码RNA的调控机制 | 第23页 |
| 1.2.3 长非编码RNA在肿瘤的发生发展过程中的作用 | 第23-24页 |
| 1.2.4 抑癌基因BTG3和长非编码RNAASBEL | 第24-25页 |
| 1.3 反义核酸简介 | 第25-27页 |
| 1.3.1 反义核酸的研究历史与现状 | 第25-26页 |
| 1.3.2 新型反义核酸antagoNAT的研究 | 第26-27页 |
| 1.4 小核酸转运系统简介 | 第27-30页 |
| 1.4.1 小核酸纳米递送系统 | 第27-28页 |
| 1.4.2 药物/基因共递送协同治疗 | 第28-29页 |
| 1.4.3 透明质酸-壳聚糖纳米颗粒 | 第29-30页 |
| 1.5 本文的研究内容及意义 | 第30-32页 |
| 第2章 AntagoNAT的设计和筛选 | 第32-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-34页 |
| 2.2 实验仪器 | 第34页 |
| 2.3 实验方法 | 第34-39页 |
| 2.3.1 AntagoNATs的设计与合成 | 第34-35页 |
| 2.3.2 MDA-MB-231细胞的传代培养与转染 | 第35页 |
| 2.3.3 Real-timePCR检测antagoNATs对ASBEL的降解能力 | 第35-38页 |
| 2.3.4 CCK-8检测antagoNATs对MDA-MB-231细胞增殖的影响 | 第38页 |
| 2.3.5 靶向ASBEL的antagoNATs与siRNA亚细胞定位 | 第38-39页 |
| 2.3.6 数据统计学分析 | 第39页 |
| 2.4 实验结果 | 第39-45页 |
| 2.4.1 AntagoNATs的设计 | 第39-40页 |
| 2.4.2 不同antagoNATs对ASBEL的降解能力检测 | 第40-41页 |
| 2.4.3 转染不同antagoNATs对MDA-MB-231细胞增殖能力的影响 | 第41-43页 |
| 2.4.4 不同修饰方式验证antago3抑制MDA-MB-231细胞增殖的效果 | 第43-45页 |
| 2.4.5 亚细胞定位分析 | 第45页 |
| 2.5 讨论 | 第45-47页 |
| 2.6 本章小结 | 第47-48页 |
| 第3章 Antago3抑癌活性评价 | 第48-72页 |
| 3.1 实验材料及溶液配制 | 第49-50页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 3.1.2 溶液配制 | 第50页 |
| 3.2 实验仪器 | 第50-51页 |
| 3.3 实验方法 | 第51-60页 |
| 3.3.1 MDA-MB-231细胞的传代培养 | 第51页 |
| 3.3.2 MDA-MB-231细胞生长曲线的测定 | 第51-52页 |
| 3.3.3 Real-timePCR检测细胞内ASBEL和BTG3表达水平 | 第52-55页 |
| 3.3.4 Westernblot实验检测antago3对BTG3蛋白表达量的影响 | 第55-57页 |
| 3.3.5 Transwell实验检测antago3对细胞迁移能力的影响 | 第57-58页 |
| 3.3.6 流式细胞仪检测antago3对细胞凋亡的影响 | 第58页 |
| 3.3.7 裸鼠体内实验 | 第58-59页 |
| 3.3.8 肿瘤组织分析 | 第59-60页 |
| 3.3.9 数据统计学分析 | 第60页 |
| 3.4 实验结果 | 第60-69页 |
| 3.4.1 Antago3对MDA-MB-231细胞生长曲线的影响 | 第60-61页 |
| 3.4.2 Real-timePCR检测细胞核和细胞质内ASBEL和BTG3表达水平 | 第61-63页 |
| 3.4.3 Antago3对BTG3蛋白表达量的影响 | 第63页 |
| 3.4.4 Antago3对MDA-MB-231细胞迁移能力的影响 | 第63-64页 |
| 3.4.5 Antago3对MDA-MB-231细胞凋亡的影响 | 第64-65页 |
| 3.4.6 Antago3体内抑癌活性评价 | 第65-67页 |
| 3.4.7 肿瘤组织中检测BTG3基因表达水平变化 | 第67页 |
| 3.4.8 肿瘤组织及各器官组织的H&E染色分析 | 第67-69页 |
| 3.4.9 裸鼠体重记录分析 | 第69页 |
| 3.5 讨论 | 第69-71页 |
| 3.6 本章小结 | 第71-72页 |
| 第4章 透明质酸-壳聚糖纳米颗粒的构建 | 第72-82页 |
| 4.1 实验材料 | 第72-73页 |
| 4.1.1 纳米体系 | 第72页 |
| 4.1.2 检测试剂 | 第72-73页 |
| 4.1.3 化学试剂及耗材 | 第73页 |
| 4.2 实验仪器 | 第73页 |
| 4.3 实验方法 | 第73-76页 |
| 4.3.1 HA-CS纳米颗粒的制备 | 第73-74页 |
| 4.3.2 CNP、ANP和CANP纳米颗粒的制备 | 第74页 |
| 4.3.3 HA-CS和CANP纳米颗粒的粒径、表面电位表征 | 第74页 |
| 4.3.4 HA-CS和CANP纳米颗粒的透射电镜观察 | 第74-75页 |
| 4.3.5 CANP包载antago3能力的检测 | 第75页 |
| 4.3.6 CANP包载antago3后的血清稳定性检测 | 第75-76页 |
| 4.4 实验结果 | 第76-79页 |
| 4.4.1 HA-CS和CANP纳米颗粒的制备及表征 | 第76-78页 |
| 4.4.2 CANP包装antago3的能力检测 | 第78页 |
| 4.4.3 CANP的血清稳定性 | 第78-79页 |
| 4.5 讨论 | 第79-80页 |
| 4.6 本章小结 | 第80-82页 |
| 第5章 透明质酸-壳聚糖纳米颗粒共递送antago3和姜黄素在三阴性乳腺癌治疗中的应用 | 第82-116页 |
| 5.1 实验材料及溶液配制 | 第83-85页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第83-84页 |
| 5.1.2 溶液配制 | 第84-85页 |
| 5.2 实验仪器 | 第85-86页 |
| 5.3 实验方法 | 第86-97页 |
| 5.3.1 MDA-MB-231细胞的传代培养 | 第86页 |
| 5.3.2 MDA-MB-231细胞摄取纳米颗粒的能力检测 | 第86-87页 |
| 5.3.3 纳米颗粒转运效率检测 | 第87页 |
| 5.3.4 纳米药物对MDA-MB-231细胞生长曲线的影响 | 第87-88页 |
| 5.3.5 纳米颗粒对MDA-MB-231细胞内ASBEL和BTG3表达的影响 | 第88-90页 |
| 5.3.6 Westernblot实验检测纳米药物对BTG3蛋白表达量的影响 | 第90-93页 |
| 5.3.7 纳米药物对MDA-MB-231细胞侵袭和迁移能力的影响 | 第93-94页 |
| 5.3.8 纳米药物对MDA-MB-231细胞凋亡的影响 | 第94页 |
| 5.3.9 裸鼠体内实验 | 第94-95页 |
| 5.3.10 肿瘤组织的分析 | 第95-97页 |
| 5.3.11 数据统计学分析 | 第97页 |
| 5.4 实验结果 | 第97-111页 |
| 5.4.1 MDA-MB-231细胞摄取纳米颗粒的能力检测 | 第97-98页 |
| 5.4.2 纳米颗粒转运效率检测 | 第98-100页 |
| 5.4.3 纳米颗粒对MDA-MB-231细胞增殖能力的影响 | 第100-101页 |
| 5.4.4 纳米颗粒对MDA-MB-231细胞ASBEL和BTG3表达水平的影响 | 第101-102页 |
| 5.4.5 纳米颗粒对MDA-MB-231细胞中多个蛋白表达量的影响 | 第102页 |
| 5.4.6 纳米颗粒对MDA-MB-231细胞侵袭和迁移能力的影响 | 第102-105页 |
| 5.4.7 纳米颗粒对MDA-MB-231细胞发生凋亡的影响 | 第105页 |
| 5.4.8 纳米颗粒抑制体内环境的肿瘤生长 | 第105-107页 |
| 5.4.9 肿瘤组织中ASBEL和BTG3基因表达水平检测 | 第107-108页 |
| 5.4.10 裸鼠体内实验的肿瘤组织 H&E 染色分析和安全性评价 | 第108-110页 |
| 5.4.11 裸鼠体内实验的肿瘤组织TUNEL染色分析 | 第110-111页 |
| 5.5 讨论 | 第111-113页 |
| 5.6 本章小结 | 第113-116页 |
| 结论 | 第116-120页 |
| 参考文献 | 第120-128页 |
| 攻读博士学位期间所发表的学术论文 | 第128-130页 |
| 致谢 | 第130页 |
