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牙鲆变态中TRβ基因的表达及其靶向miRNA鉴定分析

摘要第4-8页
ABSTRACT第8-12页
引言第15-26页
    1 牙鲆研究概述第15页
    2 TRs研究简介第15-19页
        2.1 TR的基因分类第15-17页
        2.2 TR的功能区域第17-18页
        2.3 TR的分布和作用第18页
        2.4 TR相互作用的共抑制子/转录抑制第18-19页
        2.5 TR的负调控作用、负向TRE的调节第19页
    3 MicroRNA研究简介第19-24页
        3.1 miR-125a第21-22页
        3.2 miR-138第22页
        3.3 miR-214第22-23页
        3.4 miR-460-5p、miR-125a*第23-24页
    4 研究目的与意义第24-26页
第一章 牙鲆TRβ基因序列分析及时空表达模式第26-38页
    1.1 实验材料与试剂第26-27页
        1.1.1 样品来源及采集第26页
        1.1.2 试验试剂第26-27页
        1.1.3 本章相关试剂的配置第27页
        1.1.4 主要仪器设备第27页
    1.2 试验方法第27-29页
        1.2.1 总RNA的提取与鉴定第27页
        1.2.2 牙鲆总RNA的逆转录第27-28页
        1.2.3 引物设计第28页
        1.2.4 3'-RACE反应第28页
        1.2.5 牙鲆TRβ基因cDNA获得和氨基酸序列分析第28-29页
        1.2.6 荧光定量PCR第29页
    1.3 实验结果第29-36页
        1.3.1 TRβ基因的克隆及序列分析第29-34页
        1.3.2 TRβ在牙鲆变态发育中的时空表达谱及TH、TU调控分析第34-36页
    1.4 讨论第36-38页
第二章 牙鲆甲状腺激素受体相互作用miRNAs预测及验证第38-52页
    2.1 实验材料与试剂第38-39页
        2.1.1 实验材料第38页
        2.1.2 实验试剂第38-39页
        2.1.3 实验仪器第39页
    2.2 实验方法第39-42页
        2.2.1 TRβ-microRNAs预测第39页
        2.2.2 候选靶基因3'-UTR引物的设计第39-40页
        2.2.3 双荧光报告重组载体的构建第40页
        2.2.4 靶基因验证第40页
        2.2.5 miRNA的定量PCR检测第40-42页
    2.3 实验结果第42-50页
        2.3.1 靶向TRβ基因的miRNAs预测结果第42-43页
        2.3.2 TRβ基因3'UTR荧光报告载体构建第43-44页
        2.3.3 TRβ与预测miRNAs的靶向验证第44-47页
        2.3.4 miRNAs在牙鲆变态中的表达调控第47-50页
    2.4 讨论第50-52页
小结第52-53页
参考文献第53-56页
发表文章第56-57页
致谢第57页

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