摘要 | 第4-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
引言 | 第15-26页 |
1 牙鲆研究概述 | 第15页 |
2 TRs研究简介 | 第15-19页 |
2.1 TR的基因分类 | 第15-17页 |
2.2 TR的功能区域 | 第17-18页 |
2.3 TR的分布和作用 | 第18页 |
2.4 TR相互作用的共抑制子/转录抑制 | 第18-19页 |
2.5 TR的负调控作用、负向TRE的调节 | 第19页 |
3 MicroRNA研究简介 | 第19-24页 |
3.1 miR-125a | 第21-22页 |
3.2 miR-138 | 第22页 |
3.3 miR-214 | 第22-23页 |
3.4 miR-460-5p、miR-125a* | 第23-24页 |
4 研究目的与意义 | 第24-26页 |
第一章 牙鲆TRβ基因序列分析及时空表达模式 | 第26-38页 |
1.1 实验材料与试剂 | 第26-27页 |
1.1.1 样品来源及采集 | 第26页 |
1.1.2 试验试剂 | 第26-27页 |
1.1.3 本章相关试剂的配置 | 第27页 |
1.1.4 主要仪器设备 | 第27页 |
1.2 试验方法 | 第27-29页 |
1.2.1 总RNA的提取与鉴定 | 第27页 |
1.2.2 牙鲆总RNA的逆转录 | 第27-28页 |
1.2.3 引物设计 | 第28页 |
1.2.4 3'-RACE反应 | 第28页 |
1.2.5 牙鲆TRβ基因cDNA获得和氨基酸序列分析 | 第28-29页 |
1.2.6 荧光定量PCR | 第29页 |
1.3 实验结果 | 第29-36页 |
1.3.1 TRβ基因的克隆及序列分析 | 第29-34页 |
1.3.2 TRβ在牙鲆变态发育中的时空表达谱及TH、TU调控分析 | 第34-36页 |
1.4 讨论 | 第36-38页 |
第二章 牙鲆甲状腺激素受体相互作用miRNAs预测及验证 | 第38-52页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第38-39页 |
2.1.1 实验材料 | 第38页 |
2.1.2 实验试剂 | 第38-39页 |
2.1.3 实验仪器 | 第39页 |
2.2 实验方法 | 第39-42页 |
2.2.1 TRβ-microRNAs预测 | 第39页 |
2.2.2 候选靶基因3'-UTR引物的设计 | 第39-40页 |
2.2.3 双荧光报告重组载体的构建 | 第40页 |
2.2.4 靶基因验证 | 第40页 |
2.2.5 miRNA的定量PCR检测 | 第40-42页 |
2.3 实验结果 | 第42-50页 |
2.3.1 靶向TRβ基因的miRNAs预测结果 | 第42-43页 |
2.3.2 TRβ基因3'UTR荧光报告载体构建 | 第43-44页 |
2.3.3 TRβ与预测miRNAs的靶向验证 | 第44-47页 |
2.3.4 miRNAs在牙鲆变态中的表达调控 | 第47-50页 |
2.4 讨论 | 第50-52页 |
小结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
发表文章 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |