| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| 1.1 课题背景 | 第9-10页 |
| 1.2 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.2.1 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)概述 | 第10-11页 |
| 1.2.2 Bt毒蛋白的分类和毒性 | 第11-12页 |
| 1.2.3 Bt的结构 | 第12-13页 |
| 1.2.4 Bt的抗虫机理 | 第13-15页 |
| 1.2.5 Bt的应用和害虫抗性的产生 | 第15-17页 |
| 1.2.6 提高水稻抗虫性的方法和策略 | 第17-18页 |
| 1.3 本实验研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 供试水稻品种 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试剂和仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-25页 |
| 2.2.1 植物表达载体构建 | 第19页 |
| 2.2.2 水稻的转化 | 第19-20页 |
| 2.2.3 PCR检测 | 第20-21页 |
| 2.2.4 Southern Blot | 第21页 |
| 2.2.5 绝对定量Real-Time PCR分析转基因植株拷贝数 | 第21-22页 |
| 2.2.6 半定量RT-PCR检测 | 第22-23页 |
| 2.2.7 相对定量Real-Time PCR检测 | 第23-24页 |
| 2.2.8 Elisa定量检测Cry1Ab蛋白表达量 | 第24-25页 |
| 第三章 结果与分析 | 第25-37页 |
| 3.1 转双价抗鳞翅目、同翅目基因cry1Ab/cry30Fa1水稻的培育 | 第25-31页 |
| 3.1.1 植物表达载体构建 | 第25-26页 |
| 3.1.2 水稻转化 | 第26页 |
| 3.1.3 转化植株中目的基因的PCR检测 | 第26-27页 |
| 3.1.4 转化植株的转基因拷贝数分析 | 第27-29页 |
| 3.1.5 转化植株中目的基因mRNA的检测 | 第29-30页 |
| 3.1.6 Elisa定量检测转基因T_0代植株Cry1Ab蛋白表达水平 | 第30-31页 |
| 3.2 转双价抗鳞翅目基因cry1Ab/cry1Ca水稻的培育 | 第31-37页 |
| 3.2.1 植物表达载体构建 | 第31-32页 |
| 3.2.2 水稻转化 | 第32-33页 |
| 3.2.3 转化植株中目的基因的PCR检测 | 第33页 |
| 3.2.4 绝对定量Real-Time PCR分析转基因拷贝数 | 第33-34页 |
| 3.2.5 半定量RT-PCR检测 | 第34-36页 |
| 3.2.6 Elisa定量检测转基因T_0代植株cry1Ab的蛋白表达 | 第36-37页 |
| 第四章 讨论 | 第37-40页 |
| 4.1 转基因T_0代植株的分子水平检测 | 第37页 |
| 4.2 转基因T_0代植株的蛋白水平分析 | 第37-39页 |
| 4.3 后续工作与展望 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 附录1 | 第46-51页 |
| 附录2 | 第51-53页 |
| 附录3 | 第53-58页 |
| 附录4 | 第58-60页 |
| 附录5 | 第60-61页 |
| 附录6 | 第61-62页 |
| 附录7 | 第62-63页 |
| 附录8 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
