| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-28页 |
| 1.1 线虫 | 第11-17页 |
| 1.1.1 秀丽隐杆线虫的简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 植物寄生型线虫 | 第13-17页 |
| 1.2 假单胞菌属 | 第17-21页 |
| 1.2.1 丁香假单胞菌简介 | 第19-20页 |
| 1.2.2 丁香假单胞菌MB03简介 | 第20-21页 |
| 1.3 微生物防治病原线虫最新研究进展 | 第21-24页 |
| 1.3.1 真菌资源防治病原线虫最新研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3.2 细菌资源防治病原线虫最新研究进展 | 第22-24页 |
| 1.3.3 放线菌资源防治病原线虫最新研究进展 | 第24页 |
| 1.4 潜在毒性基因的筛选策略及潜在毒性蛋白表达系统 | 第24-26页 |
| 1.4.1 潜在毒性基因的筛选策略 | 第25页 |
| 1.4.2 潜在毒性蛋白表达系统 | 第25-26页 |
| 1.5 转录调控因子InpR简介 | 第26-27页 |
| 1.6 课题研究目的及意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-40页 |
| 2.1.1 培养基 | 第28页 |
| 2.1.2 引物 | 第28-33页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第33-37页 |
| 2.1.4 线虫 | 第37页 |
| 2.1.5 试剂 | 第37-40页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-51页 |
| 2.2.1 载体质粒的制备和目的基因的扩增及回收操作 | 第40-42页 |
| 2.2.2 酶切、酶切产物回收与酶连 | 第42-43页 |
| 2.2.3 大肠杆菌的钙转及转化子的筛选 | 第43-44页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE样品制备和电泳 | 第44-45页 |
| 2.2.5 大肠杆菌的诱导表达、亲和纯化 | 第45-47页 |
| 2.2.6 蛋白浓度的测定 | 第47页 |
| 2.2.7 秀丽隐杆线虫的饲养 | 第47-48页 |
| 2.2.8 秀丽隐杆线虫的裂解与同步化 | 第48页 |
| 2.2.9 线虫的LC_(50)测定 | 第48页 |
| 2.2.10 纯蛋白对线虫产卵率的影响实验 | 第48-49页 |
| 2.2.11 纯蛋白对线虫行为反应的影响实验 | 第49页 |
| 2.2.12 纯蛋白对L1期线虫生长抑制的影响 | 第49页 |
| 2.2.13 纯蛋白对线虫运动性的影响 | 第49-50页 |
| 2.2.14 纯蛋白在线虫体内的分布实验(FITC染色实验) | 第50页 |
| 2.2.15 南方根结线虫的培养 | 第50页 |
| 2.2.16 生物信息学分析 | 第50-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-93页 |
| 3.1 丁香假单胞菌MB03中杀虫毒性基因的筛选 | 第51-55页 |
| 3.1.1 筛选自结构基因组的潜在毒性基因 | 第52-53页 |
| 3.1.2 筛选自已测定的丁香假单胞菌MB03与秀丽隐杆线虫互作转录组的潜在毒性基因 | 第53-54页 |
| 3.1.3 筛选自结构基因组和转录组的潜在毒性基因的衍生研究 | 第54-55页 |
| 3.2 潜在毒性基因异源表达重组菌的构建及诱导表达 | 第55-64页 |
| 3.2.1 潜在毒性基因的扩增 | 第55-57页 |
| 3.2.2 重组表达载体的构建 | 第57-62页 |
| 3.2.3 潜在毒性基因的诱导表达 | 第62-64页 |
| 3.3 24株异源表达重组菌菌体的线虫生测及其基因的详细信息 | 第64-67页 |
| 3.3.1 潜在毒性基因异源表达重组菌菌体的毒杀线虫活性测定 | 第64-66页 |
| 3.3.2 24株异源表达重组菌的基因详细信息 | 第66-67页 |
| 3.4 潜在毒性基因纯化蛋白与秀丽隐杆线虫作用的研究 | 第67-93页 |
| 3.4.1 一类甲基受体趋化蛋白MCP与秀丽隐杆线虫作用的研究 | 第67-73页 |
| 3.4.2 YbgI03(GL001171)蛋白与秀丽隐杆线虫作用的研究 | 第73-80页 |
| 3.4.3 Spr03(GL001094)蛋白与秀丽隐杆线虫作用的研究 | 第80-87页 |
| 3.4.4 GL000116、GL001656、GL001678和GL004219号蛋白与秀丽隐杆线虫作用的研究 | 第87-93页 |
| 4 小结与讨论 | 第93-98页 |
| 4.1 小结 | 第93-96页 |
| 4.2 讨论 | 第96-98页 |
| 4.2.1 MCP类蛋白的杀虫 | 第96页 |
| 4.2.2 YbgI03 (GL001171)蛋白杀虫机制推测 | 第96-97页 |
| 4.2.3 Spr03 (GL001094)蛋白杀虫机制推测 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
