| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| ·环糊精葡萄糖基转移酶(CGT酶)概述 | 第9-10页 |
| ·CGT酶的来源 | 第9页 |
| ·CGT酶的催化机制 | 第9-10页 |
| ·CGT酶的产物特异性 | 第10页 |
| ·CGT酶在基因工程菌中的表达 | 第10-15页 |
| ·CGT酶在基因工程菌中的表达现状 | 第10-11页 |
| ·毕赤酵母重组蛋白表达系统 | 第11-13页 |
| ·枯草杆菌重组蛋白表达系统 | 第13-15页 |
| ·立题依据及意义 | 第15-16页 |
| ·主要研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第17-23页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·菌种和质粒 | 第17页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-23页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第18页 |
| ·胶回收目的片段 | 第18-19页 |
| ·重组表达载体pPIC9K-cgt的构建 | 第19页 |
| ·重组表达载体pPIC9K-cgt的线性化 | 第19页 |
| ·毕赤酵母感受态细胞的制备与转化 | 第19-20页 |
| ·毕赤酵母高拷贝转化子的筛选及鉴定 | 第20页 |
| ·重组毕赤酵母的培养及诱导表达 | 第20页 |
| ·重组表达载体pMA5-cgt和pGJ-cgt的构建 | 第20-21页 |
| ·枯草杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第21页 |
| ·重组枯草杆菌的培养及表达 | 第21-22页 |
| ·分析方法 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-47页 |
| ·重组P.pastoris KM 71/pPCGT的构建与表达 | 第23-29页 |
| ·重组质粒pPCGT的构建 | 第23-24页 |
| ·重组质粒pPCGT的线性化 | 第24-25页 |
| ·毕赤酵母高拷贝整合菌株的筛选 | 第25-26页 |
| ·重组P.pastoris KM71/pPCGT的表达 | 第26页 |
| ·α-CGT酶在P pastoris中表达可行性分析 | 第26-29页 |
| ·重组B.subtilis WB600/pMCGT的构建、表达及摇瓶初步优化 | 第29-33页 |
| ·重组质粒pMCGT的构建 | 第30页 |
| ·重组B.subtilis WB600/pMCGT的表达 | 第30-31页 |
| ·重组B.subtilis WB600/pMCGT的摇瓶条件初步优化 | 第31-33页 |
| ·重组B.subtilis WB600/pGCGT的构建、表达及发酵优化 | 第33-47页 |
| ·重组质粒pGCGT的构建 | 第34-35页 |
| ·重组B.subtilis WB600/pGCGT的表达 | 第35页 |
| ·重组B.subtilis WB600/pGCGT的摇瓶发酵条件优化 | 第35-43页 |
| ·重组B.subtilis WB600/pGCGT在5L罐上的发酵 | 第43-47页 |
| 第四章 结论与展望 | 第47-49页 |
| ·结论 | 第47-48页 |
| ·展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57页 |
