摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 文献综述 | 第11-23页 |
1.1 鱼类免疫系统研究 | 第11页 |
1.1.1 免疫器官 | 第11页 |
1.1.2 免疫细胞 | 第11页 |
1.1.3 免疫分子 | 第11页 |
1.2 鱼类NCC的研究进展 | 第11-20页 |
1.2.1 NCC的发现 | 第12页 |
1.2.2 NCC的形态特征 | 第12-13页 |
1.2.3 NCC的分离纯化 | 第13-14页 |
1.2.4 NCC的免疫功能 | 第14-15页 |
1.2.5 NCC的活性调控机制 | 第15-16页 |
1.2.6 NCC的表面受体 | 第16-18页 |
1.2.7 NCC的效应因子 | 第18-20页 |
1.3 C型凝集素 | 第20-21页 |
1.4 铁转运蛋白 | 第21页 |
1.5 研究目的和意义 | 第21-23页 |
2 罗非鱼NCCRP-1基因的表达特征及其互作蛋白的获取及验证 | 第23-46页 |
2.1 材料与方法 | 第23-34页 |
2.1.1 实验材料 | 第23-25页 |
2.1.2 实验方法 | 第25-34页 |
2.2 结果与分析 | 第34-43页 |
2.2.1 On-NCCRP-1序列分析 | 第34-36页 |
2.2.2 On-NCCRP-1在罗非鱼各组织中的表达 | 第36-37页 |
2.2.3 不同刺激物刺激后On-NCCRP-1在组织以及NCC中的表达 | 第37页 |
2.2.4 罗非鱼On-NCCRP-1亚细胞定位 | 第37-38页 |
2.2.5 NCC细胞质蛋白与细胞膜蛋白的提取 | 第38页 |
2.2.6 酵母双杂交诱饵载体及cDNA文库构建 | 第38-39页 |
2.2.7 酵母双杂交肝脏文库和头肾文库筛选 | 第39-40页 |
2.2.8 潜在互作基因的克隆 | 第40页 |
2.2.9 酵母双杂交点对点验证 | 第40-43页 |
2.3 讨论 | 第43-46页 |
3 依赖于NCCRP-1受体介导的NCC活性调控 | 第46-64页 |
3.1 材料与方法 | 第46-50页 |
3.1.1 实验材料 | 第46-47页 |
3.1.2 实验方法 | 第47-50页 |
3.2 结果与分析 | 第50-61页 |
3.2.1 On-C-typelectin序列分析 | 第50-53页 |
3.2.2 感染细菌前后罗非鱼On-C-typelectin的表达 | 第53-54页 |
3.2.3 原核表达鉴定 | 第54-55页 |
3.2.4 蛋白纯化以及WB检测 | 第55-56页 |
3.2.5 抗On-NCCRP-1抗体处理后NCC效应相关基因的表达 | 第56页 |
3.2.6 C-typelectin和serotransferrin对NCC效应基因表达的影响 | 第56-57页 |
3.2.7 C-typelectin和serotransferrin对NCC杀伤活性的影响 | 第57-59页 |
3.2.8 On-NCCRP-1和On-SKP1酵母双杂交 | 第59-60页 |
3.2.9 On-NCCRP-1过表达对NF-κB转录信号的影响 | 第60-61页 |
3.3 讨论 | 第61-64页 |
4 不依赖于NCCRP-1受体介导的NCC活性调控 | 第64-83页 |
4.1 材料与方法 | 第64-67页 |
4.1.1 实验材料 | 第64页 |
4.1.2 实验方法 | 第64-67页 |
4.2 实验结果与分析 | 第67-81页 |
4.2.1 On-CD28和On-CD80/86的序列特征 | 第67-74页 |
4.2.2 On-CD28和On-CD80/86的亚细胞定位 | 第74页 |
4.2.3 On-CD80/86分别与On-CD28、On-NCCRP-1的相互作用 | 第74-76页 |
4.2.4 On-CD28和On-CD80/86在罗非鱼各组织中的表达 | 第76-79页 |
4.2.5 无乳链球菌刺激HKLs后On-CD28和On-CD80/86的表达 | 第79页 |
4.2.6 On-CD80/86的原核表达、蛋白纯化以及WB检测 | 第79-80页 |
4.2.7 On-CD80/86对NCC效应基因表达的影响 | 第80-81页 |
4.2.8 On-CD80/86对NCC杀伤活性的影响 | 第81页 |
4.3 讨论 | 第81-83页 |
5 NCC效应分子NK-lysin的序列分析及其功能研究 | 第83-92页 |
5.1 材料与方法 | 第83-85页 |
5.1.1 实验材料 | 第83页 |
5.1.2 实验方法 | 第83-85页 |
5.2 实验结果与分析 | 第85-90页 |
5.2.1 On-NKL的序列分析 | 第85-87页 |
5.2.2 On-NKLmRNA的组织分布和细胞特异性表达 | 第87页 |
5.2.3 On-NKLmRNA在细菌刺激后的表达水平 | 第87-88页 |
5.2.4 无乳链球菌刺激NCC后On-NKL的表达 | 第88页 |
5.2.5 On-NKL在罗非鱼体内过表达及其生物学效应 | 第88-90页 |
5.3 讨论 | 第90-92页 |
6 结论 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-106页 |
附录1 | 第106-107页 |
附录2 | 第107-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
作者简介 | 第109-111页 |
导师简介 | 第111页 |