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罗非鱼NCC活性调控蛋白及效应因子的鉴定与功能分析

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
1 文献综述第11-23页
    1.1 鱼类免疫系统研究第11页
        1.1.1 免疫器官第11页
        1.1.2 免疫细胞第11页
        1.1.3 免疫分子第11页
    1.2 鱼类NCC的研究进展第11-20页
        1.2.1 NCC的发现第12页
        1.2.2 NCC的形态特征第12-13页
        1.2.3 NCC的分离纯化第13-14页
        1.2.4 NCC的免疫功能第14-15页
        1.2.5 NCC的活性调控机制第15-16页
        1.2.6 NCC的表面受体第16-18页
        1.2.7 NCC的效应因子第18-20页
    1.3 C型凝集素第20-21页
    1.4 铁转运蛋白第21页
    1.5 研究目的和意义第21-23页
2 罗非鱼NCCRP-1基因的表达特征及其互作蛋白的获取及验证第23-46页
    2.1 材料与方法第23-34页
        2.1.1 实验材料第23-25页
        2.1.2 实验方法第25-34页
    2.2 结果与分析第34-43页
        2.2.1 On-NCCRP-1序列分析第34-36页
        2.2.2 On-NCCRP-1在罗非鱼各组织中的表达第36-37页
        2.2.3 不同刺激物刺激后On-NCCRP-1在组织以及NCC中的表达第37页
        2.2.4 罗非鱼On-NCCRP-1亚细胞定位第37-38页
        2.2.5 NCC细胞质蛋白与细胞膜蛋白的提取第38页
        2.2.6 酵母双杂交诱饵载体及cDNA文库构建第38-39页
        2.2.7 酵母双杂交肝脏文库和头肾文库筛选第39-40页
        2.2.8 潜在互作基因的克隆第40页
        2.2.9 酵母双杂交点对点验证第40-43页
    2.3 讨论第43-46页
3 依赖于NCCRP-1受体介导的NCC活性调控第46-64页
    3.1 材料与方法第46-50页
        3.1.1 实验材料第46-47页
        3.1.2 实验方法第47-50页
    3.2 结果与分析第50-61页
        3.2.1 On-C-typelectin序列分析第50-53页
        3.2.2 感染细菌前后罗非鱼On-C-typelectin的表达第53-54页
        3.2.3 原核表达鉴定第54-55页
        3.2.4 蛋白纯化以及WB检测第55-56页
        3.2.5 抗On-NCCRP-1抗体处理后NCC效应相关基因的表达第56页
        3.2.6 C-typelectin和serotransferrin对NCC效应基因表达的影响第56-57页
        3.2.7 C-typelectin和serotransferrin对NCC杀伤活性的影响第57-59页
        3.2.8 On-NCCRP-1和On-SKP1酵母双杂交第59-60页
        3.2.9 On-NCCRP-1过表达对NF-κB转录信号的影响第60-61页
    3.3 讨论第61-64页
4 不依赖于NCCRP-1受体介导的NCC活性调控第64-83页
    4.1 材料与方法第64-67页
        4.1.1 实验材料第64页
        4.1.2 实验方法第64-67页
    4.2 实验结果与分析第67-81页
        4.2.1 On-CD28和On-CD80/86的序列特征第67-74页
        4.2.2 On-CD28和On-CD80/86的亚细胞定位第74页
        4.2.3 On-CD80/86分别与On-CD28、On-NCCRP-1的相互作用第74-76页
        4.2.4 On-CD28和On-CD80/86在罗非鱼各组织中的表达第76-79页
        4.2.5 无乳链球菌刺激HKLs后On-CD28和On-CD80/86的表达第79页
        4.2.6 On-CD80/86的原核表达、蛋白纯化以及WB检测第79-80页
        4.2.7 On-CD80/86对NCC效应基因表达的影响第80-81页
        4.2.8 On-CD80/86对NCC杀伤活性的影响第81页
    4.3 讨论第81-83页
5 NCC效应分子NK-lysin的序列分析及其功能研究第83-92页
    5.1 材料与方法第83-85页
        5.1.1 实验材料第83页
        5.1.2 实验方法第83-85页
    5.2 实验结果与分析第85-90页
        5.2.1 On-NKL的序列分析第85-87页
        5.2.2 On-NKLmRNA的组织分布和细胞特异性表达第87页
        5.2.3 On-NKLmRNA在细菌刺激后的表达水平第87-88页
        5.2.4 无乳链球菌刺激NCC后On-NKL的表达第88页
        5.2.5 On-NKL在罗非鱼体内过表达及其生物学效应第88-90页
    5.3 讨论第90-92页
6 结论第92-94页
参考文献第94-106页
附录1第106-107页
附录2第107-108页
致谢第108-109页
作者简介第109-111页
导师简介第111页

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