摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
1 引言 | 第10-15页 |
1.1 概述 | 第10页 |
1.2 研究背景 | 第10-11页 |
1.3 国内外研究进展 | 第11-14页 |
1.3.1 Orexin对摄食和能量代谢的调节 | 第11页 |
1.3.2 Orexin细胞增殖和凋亡的调控 | 第11-12页 |
1.3.3 Orexin对动物机体生殖功能的调节 | 第12页 |
1.3.4 孕酮的合成与分泌 | 第12页 |
1.3.5 Orexin A与受体结合的信号通路 | 第12-13页 |
1.3.6 Orexin A调节黄体颗粒细胞分泌孕酮与激活PKA促进StAR合成有关 | 第13-14页 |
1.4 研究意义 | 第14-15页 |
2 实验材料 | 第15-17页 |
2.1 主要试剂 | 第15页 |
2.2 主要仪器 | 第15页 |
2.3 常用试剂的配制 | 第15-17页 |
3 实验方法 | 第17-26页 |
3.1 绵羊卵巢颗粒细胞的获取及培养 | 第17页 |
3.2 绵羊卵巢颗粒细胞鉴定 | 第17-18页 |
3.2.1 HE染色 | 第17页 |
3.2.2 免疫荧光 | 第17-18页 |
3.3 细胞周期同步化处理及其检测 | 第18-19页 |
3.3.1 细胞周期同步化处理 | 第18页 |
3.3.2 细胞周期检测 | 第18-19页 |
3.4 卵巢颗粒细胞黄体化处理及鉴定 | 第19页 |
3.5 Orexin A对卵巢黄体化颗粒细胞活性的影响 | 第19-20页 |
3.5.1 细胞生长标准曲线的制作 | 第19页 |
3.5.2 Orexin A对卵巢黄体化颗粒细胞活性影响的检测 | 第19-20页 |
3.6 不同浓度orexin A对黄体化颗粒细胞分泌孕酮的影响 | 第20-21页 |
3.7 不同浓度orexin A受体抑制剂Almorexant对卵巢黄体化颗粒细胞cAMP表达量的影响 | 第21页 |
3.8 cAMP-PKA信号通路对orexin A调节绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮的影响 | 第21-26页 |
3.8.1 Almorexant、Orexin Receptor Agonist、H-89对orexin A调节绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮含量的影响 | 第21页 |
3.8.2 Almorexant、Orexin Receptor Agonist、H-89对卵巢黄体化颗粒细胞内PKA及StAR蛋白表达的影响 | 第21-26页 |
4 实验结果 | 第26-37页 |
4.1 绵羊卵巢颗粒细胞培养镜下检测结果 | 第26页 |
4.2 绵羊卵巢颗粒细胞鉴定结果 | 第26-27页 |
4.3 细胞周期同步化处理及检测结果 | 第27-28页 |
4.4 卵巢颗粒细胞黄体化结果 | 第28-29页 |
4.5 Orexin A及其缓冲液对卵巢黄体化颗粒细胞活性影响的检测结果 | 第29-31页 |
4.5.1 细胞生长标准曲线 | 第29-30页 |
4.5.2 orexin A对卵巢黄体化颗粒细胞活性影响的检测结果 | 第30-31页 |
4.6 不同浓度orexin A影响黄体化颗粒细胞分泌孕酮的检测结果 | 第31-32页 |
4.7 不同浓度orexin A受体抑制剂Almorexant对卵巢黄体化颗粒细胞cAMP表达量的影响 | 第32-34页 |
4.8 cAMP-PKA信号通路对orexinA调节蒙古绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮的影响 | 第34-37页 |
4.8.1 Almorexant、Orexin Receptor Agonist、H-89对orexinA调节蒙古绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮含量的影响 | 第34-35页 |
4.8.2 Almorexant、Orexin Receptor Agonist、H-89对卵巢黄体化颗粒细胞内PKA及StAR蛋白表达的影响 | 第35-37页 |
5 讨论 | 第37-42页 |
5.1 关于原代卵巢颗粒细胞的培养 | 第37页 |
5.2 关于绵羊卵巢颗粒细胞鉴定 | 第37-38页 |
5.3 Orexin A及其缓冲液对卵巢黄体化颗粒细胞活性的影响 | 第38页 |
5.4 细胞周期同步化处理及其检测 | 第38-39页 |
5.5 不同浓度orexin A影响黄体化颗粒细胞分泌孕酮的检测结果 | 第39-40页 |
5.6 不同浓度orexin A受体抑制剂Almorexant对卵巢黄体化颗粒细胞cAMP表达量的影响 | 第40页 |
5.7 cAMP-PKA信号通路对orexin A调节蒙古绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮的影响 | 第40-42页 |
6 结论 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
作者简介 | 第48页 |