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洛美沙星单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的初步建立

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
英文缩写词表第11-14页
第一章 前言第14-18页
    1 洛美沙星概述第14-15页
        1.1 洛美沙星的理化性质第14-15页
        1.2 洛美沙星抗菌机理及药代动力学第15页
        1.3 洛美沙星临床中的不良反应第15页
    2 洛美沙星检测方法研究进展第15-17页
        2.1 微生物法第15-16页
        2.2 理化检测法第16-17页
            2.2.1 毛细管电泳法第16页
            2.2.2 紫外分光光度法第16页
            2.2.3 荧光分光光度法第16页
            2.2.4 化学发光法第16-17页
            2.2.5 高效液相色谱法第17页
        2.3 免疫学方法第17页
    3 实验研究的目的及意义第17-18页
第二章 洛美沙星人工抗原的合成与鉴定第18-29页
    1 材料与方法第18-22页
        1.1 实验动物第18页
        1.2 主要试剂第18页
        1.3 主要仪器第18页
        1.4 主要溶液系统第18-19页
        1.5 洛美沙星人工抗原的制备及纯化第19-21页
            1.5.1 透析袋的处理第19页
            1.5.2 免疫原合成及初步纯化第19-20页
            1.5.3 检测原合成及初步纯化第20-21页
        1.6 人工抗原的鉴定第21-22页
            1.6.1 人工抗原的初步鉴定第21-22页
            1.6.2 人工抗原免疫学方法的鉴定第22页
    2 结果第22-27页
        2.1 蛋白浓度测定结果第22-23页
        2.2 紫外分光光度法鉴定结果第23-26页
            2.2.1 免疫原A第23页
            2.2.2 免疫原B第23-24页
            2.2.3 检测原第24页
            2.2.4 偶联比的测定第24-26页
        2.3 SDS-PAGE鉴定结果第26页
        2.4 免疫学方法鉴定结果第26-27页
    3 讨论第27-29页
第三章 洛美沙星单克隆抗体的制备及鉴定第29-43页
    1 材料和方法第29-37页
        1.1 实验动物与生物材料第29页
        1.2 主要试剂第29页
        1.3 实验仪器与耗材第29-30页
        1.4 主要溶液系统第30-31页
            1.4.1 ELISA工作液第30页
            1.4.2 细胞培养溶液第30-31页
            1.4.3 纯化使用液第31页
        1.5 洛美沙星单克隆抗体的制备第31-36页
            1.5.1 动物免疫程序第31-32页
            1.5.2 ELISA筛选方法的建立第32-33页
            1.5.3 细胞融合与培养第33-35页
            1.5.4 杂交瘤细胞株稳定性测试及建株第35页
            1.5.5 单克隆抗体大量制备第35页
            1.5.6 单克隆抗体纯化第35-36页
        1.6 单克隆抗体的鉴定第36-37页
            1.6.1 蛋白浓度及纯化回收率测定第36页
            1.6.2 SDS-PAGE鉴定抗体纯化效果第36页
            1.6.3 单克隆抗体效价测定第36页
            1.6.4 单克隆抗体亚型鉴定第36-37页
            1.6.5 单克隆抗体特异性鉴定第37页
    2 结果第37-41页
        2.1 包被抗原的工作浓度及阳性血清效价的确定第37页
        2.2 融合前SP2/0及杂交瘤细胞生长状态第37-38页
        2.3 单抗细胞株的建立和稳定性第38页
        2.4 腹水的制备第38-39页
        2.5 单克隆抗体的鉴定第39-41页
            2.5.1 单抗蛋白浓度及纯化回收率测定第39页
            2.5.2 SDS-PAGE检测单抗纯化效果第39-40页
            2.5.3 单抗效价的测定第40页
            2.5.4 单抗亚型鉴定第40-41页
            2.5.5 单抗的特异性鉴定第41页
    3 讨论第41-43页
第四章 鲜奶中洛美沙星ELISA检测方法的初步建立第43-50页
    1 材料和方法第43-45页
        1.1 实验样品第43页
        1.2 主要仪器和试剂第43页
        1.3 ELISA工作液第43页
        1.4 ELISA检测方法的建立第43-44页
            1.4.1 最佳封闭液的确定第43页
            1.4.2 抗原抗体最佳工作浓度的确定第43页
            1.4.3 CiELISA标准工作曲线及相关参数第43-44页
        1.5 样品添加回收实验第44-45页
            1.5.1 样品前处理方法第44页
            1.5.2 样品基质干扰第44页
            1.5.3 标准曲线的绘制第44页
            1.5.4 样品中洛美沙星回收率的测定第44-45页
    2 结果第45-49页
        2.1 ELISA检测方法的建立第45-47页
            2.1.1 最佳封闭液的确定第45页
            2.1.2 抗原抗体最佳工作浓度的确定第45-46页
            2.1.3 CiELISA标准工作曲线及相关参数第46-47页
        2.2 洛美沙星单克隆抗体的初步应用第47-49页
            2.2.1 样品基质干扰第47-48页
            2.2.2 样品溶液中标准曲线的绘制第48页
            2.2.3 样品中洛美沙星回收率的测定第48-49页
    3 讨论第49-50页
全文结论第50-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页
攻读学位期间发表的学术论文目录第58-59页

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