| 符号说明 | 第4-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 引言 | 第14-35页 |
| 1.1 生物质谱简介 | 第14-17页 |
| 1.1.1 电离方式 | 第14-15页 |
| 1.1.2 质谱在蛋白质和多肽分子量测定中的应用 | 第15-16页 |
| 1.1.3 质谱在蛋白质翻译后修饰分析中的应用 | 第16页 |
| 1.1.4 质谱在生物大分子相互作用研究中的应用 | 第16-17页 |
| 1.2 LC-MS的分类和特点 | 第17-21页 |
| 1.2.1 液质联用技术在蛋白分析中的应用 | 第18-19页 |
| 1.2.2 液质联用技术在其他物质分析中的应用 | 第19页 |
| 1.2.4 多肽和蛋白质序列测定方法 | 第19页 |
| 1.2.5 蛋白质和多肽识别技术简介 | 第19-21页 |
| 1.3 MALDI-TOF-MS技术简介 | 第21-31页 |
| 1.3.1 MALDI-TOF MS的基本原理 | 第21页 |
| 1.3.2 MALDI-TOF MS现状及应用领域 | 第21-23页 |
| 1.3.3 基于MALDI-TOF MS定量分析方法 | 第23-27页 |
| 1.3.3.1 内标物选择及对定量结果的影响 | 第24-25页 |
| 1.3.3.2 内标加入量的影响 | 第25页 |
| 1.3.3.3 基质种类的影响 | 第25-26页 |
| 1.3.3.4 点样方式 | 第26-27页 |
| 1.3.3.5 无内标物定量分析方法 | 第27页 |
| 1.3.4 MADLI-TOF MS定量分析应用研究进展 | 第27-31页 |
| 1.3.4.1 酶学研究 | 第27-28页 |
| 1.3.4.2 生物标志物检测 | 第28-29页 |
| 1.3.4.3 在微生物检测中的应用 | 第29-30页 |
| 1.3.4.4 在小分子化合物定量检测中的应用 | 第30-31页 |
| 1.4 基于MALDI-TOF MS的微层析阵列的研究 | 第31-33页 |
| 1.4.1 样品预处理装置发展现状 | 第31-32页 |
| 1.4.2 毛细管内壁硅烷化衍生氨基 | 第32页 |
| 1.4.3 基于魔芋葡甘聚糖的亲和层析介质 | 第32-33页 |
| 1.4.4 基于微层析阵列的Biomarker检测 | 第33页 |
| 1.5 选题依据与研究内容 | 第33-35页 |
| 1.5.1 立题依据 | 第33-34页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第34-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-46页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第35-37页 |
| 2.1.1 原料 | 第35页 |
| 2.1.2 化学试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-41页 |
| 2.2.1 基于MALDI-TOF MS的生物标志物的定量检测 | 第37-38页 |
| 2.2.1.1 氨基乙醛修饰血管紧张素Ⅱ | 第37页 |
| 2.2.1.2 修饰后样品纯化 | 第37页 |
| 2.2.1.3 内标法绘制标准曲线 | 第37-38页 |
| 2.2.1.4 B型脑钠尿肽标准曲线绘制 | 第38页 |
| 2.2.2 基于MALDI-TOF MS的生物标志物的定量检测的分析方法 | 第38-39页 |
| 2.2.2.1 高效液相色谱质谱联用分析 | 第38页 |
| 2.2.2.2 MALDI-TOF MS分析 | 第38-39页 |
| 2.2.3 基于质谱检测的肉类溯源性研究 | 第39-41页 |
| 2.2.3.1 肌红蛋白提取 | 第39页 |
| 2.2.3.2 胰蛋白酶酶解 | 第39页 |
| 2.2.3.3 混合肉制品肌红蛋白提取 | 第39页 |
| 2.2.3.4 混合肉制品胰蛋白酶酶解 | 第39页 |
| 2.2.3.5 MALDI-TOF MS检测 | 第39-40页 |
| 2.2.3.6 高效液相色谱质谱联用分析 | 第40-41页 |
| 2.3 基于MALDI-TOF MS微层析阵列的研究 | 第41-46页 |
| 2.3.1 毛细管层析柱制备方法 | 第41-43页 |
| 2.3.1.1 毛细管内表面处理方法 | 第41页 |
| 2.3.1.2 氨基衍生方法 | 第41页 |
| 2.3.1.3 KGM活化 | 第41-42页 |
| 2.3.1.4 毛细管中偶联活化的KGM | 第42页 |
| 2.3.1.5 蛋白质偶联 | 第42页 |
| 2.3.1.6 环氧基封闭 | 第42-43页 |
| 2.3.2 分析方法 | 第43-44页 |
| 2.3.2.1 总氨基酸含量 | 第43页 |
| 2.3.2.2 活化KGM中环氧基含量测定 | 第43页 |
| 2.3.2.3 XPS分析方法 | 第43页 |
| 2.3.2.4 MALDI-TOF MS分析方法 | 第43-44页 |
| 2.3.3 毛细管层析柱性能评价方法 | 第44-46页 |
| 2.3.3.1 蛋白质在固相表面上的偶联位点识别方法 | 第44页 |
| 2.3.3.2 蛋白质在固相表面上的偶联位点识别分析方法 | 第44页 |
| 2.3.3.3 BSA模型检测方法 | 第44-45页 |
| 2.3.3.4 胰蛋白酶抑制剂检测方法 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-65页 |
| 3.1 肉类溯源性检测与研究 | 第46-53页 |
| 3.1.1 基于MALDI的肉类溯源性检测 | 第46-48页 |
| 3.1.1.1 不同肉类的MALDI-TOF MS检测结果 | 第46-48页 |
| 3.1.2 基于LC-MS的肉类溯源性检测 | 第48-53页 |
| 3.1.2.1 不同肉类肌红蛋白特征多肽提取 | 第48-49页 |
| 3.1.2.2 不同肉类肌红蛋白酶解后LC-MS分析结果 | 第49-51页 |
| 3.1.2.3 混合肉制品肌红蛋白酶解后LC-MS分析结果 | 第51-53页 |
| 3.2 基于MALDI-TOF MS的生物标志物的定量检测 | 第53-59页 |
| 3.2.1 B型脑钠尿肽结果分析 | 第53-57页 |
| 3.2.1.1 BNP与BNP+K | 第53-55页 |
| 3.2.1.2 不同比例的BNP与BNP+K MALDI-TOF MS检测结果 | 第55-56页 |
| 3.2.1.3 BNP与BNP+K标准曲线 | 第56-57页 |
| 3.2.2 血管紧张素Ⅱ结果分析 | 第57-59页 |
| 3.2.2.1 血管紧张素Ⅱ衍生氨基乙醛结果分析 | 第57-58页 |
| 3.2.2.2 血管紧张素Ⅱ与衍生产物标准曲线 | 第58-59页 |
| 3.3 基于MALDI-TOF MS微层析阵列的研究 | 第59-65页 |
| 3.3.1 氨基硅烷修饰前后毛细管的XPS分析结果 | 第59-60页 |
| 3.3.2 活化KGM的环氧基含量分析 | 第60-61页 |
| 3.3.3 蛋白偶联量分析 | 第61页 |
| 3.3.4 蛋白质在固相表面上的偶联位点识别方法 | 第61-63页 |
| 3.3.5 毛细管层析柱性能测试 | 第63-65页 |
| 3.3.5.1 BSA模型检测方法 | 第63-64页 |
| 3.3.5.2 胰蛋白酶抑制剂检测方法 | 第64-65页 |
| 3.3.5.3 微层析阵列应用效果 | 第65页 |
| 4 讨论 | 第65-68页 |
| 4.1 基于质谱检测的肉类溯源性研究 | 第65-66页 |
| 4.2 基于MALDI-TOF MS的生物标志物的定量检测 | 第66-67页 |
| 4.3 基于MALDI-TOF MS的微层析阵列的研究 | 第67-68页 |
| 5 结论 | 第68-70页 |
| 5.1 主要研究成果 | 第68-69页 |
| 5.2 创新点 | 第69-70页 |
| 5.3 工作展望 | 第70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间发表的论文目录 | 第80页 |
