| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-27页 |
| 1.1 光信号途径蛋白FHY3/FAR | 第12-18页 |
| 1.1.1 FHY3/FAR1概述 | 第12页 |
| 1.1.2 FHY3/FAR1调控植物生长发育 | 第12-18页 |
| 1.1.2.1 调控远红光信号转导 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 调控叶绿素合成及叶绿体发育 | 第14-15页 |
| 1.1.2.3 调控淀粉合成 | 第15页 |
| 1.1.2.4 调控生物钟基因节律性表达 | 第15-16页 |
| 1.1.2.5 调控肌醇合成及氧化胁迫响应 | 第16-17页 |
| 1.1.2.6 调控脱落酸信号响应 | 第17页 |
| 1.1.2.7 调控花分生组织形成 | 第17-18页 |
| 1.2 光形态建成抑制因子DET | 第18-24页 |
| 1.2.1 COP/DET/FUS概述 | 第18-19页 |
| 1.2.2 DET1调控植物生长发育 | 第19-24页 |
| 1.2.2.1 影响种子萌发 | 第19-20页 |
| 1.2.2.2 抑制光形态建成 | 第20-21页 |
| 1.2.2.3 调节生物钟 | 第21-22页 |
| 1.2.2.4 影响植物开花 | 第22-24页 |
| 1.3 植物激素脱落酸信号转导 | 第24-25页 |
| 1.3.1 脱落酸概述 | 第24页 |
| 1.3.2 ABA信号转导 | 第24-25页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-41页 |
| 2.1 材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.1.2 载体与菌株 | 第27页 |
| 2.1.3 酶和各种生化试剂 | 第27页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第27-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-41页 |
| 2.2.1 酵母双杂交 | 第29-30页 |
| 2.2.1.1 酵母感受态制备 | 第29页 |
| 2.2.1.2 诱饵载体转化酵母感受态 | 第29-30页 |
| 2.2.1.3 诱饵载体与cDNA文库杂交 | 第30页 |
| 2.2.2 植物总RNA提取 | 第30-31页 |
| 2.2.3 植物基因组DNA提取 | 第31页 |
| 2.2.4 反转录合成cDNA第一链 | 第31-32页 |
| 2.2.5 载体构建 | 第32-33页 |
| 2.2.5.1 PCR扩增片段 | 第32页 |
| 2.2.5.2 目的片段与载体连接 | 第32-33页 |
| 2.2.5.3 连接产物转化大肠杆菌 | 第33页 |
| 2.2.6 冻融法转化农杆菌感受态细胞及菌落PCR验证 | 第33-34页 |
| 2.2.7 花序侵染法转化拟南芥 | 第34页 |
| 2.2.8 蛋白质免疫印迹法(Westernblot) | 第34-36页 |
| 2.2.8.1 植物蛋白质提取 | 第34-35页 |
| 2.2.8.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳及转膜 | 第35-36页 |
| 2.2.8.3 免疫印迹 | 第36页 |
| 2.2.9 染色质免疫沉淀(ChIP) | 第36-38页 |
| 2.2.9.1 染色体与蛋白交联 | 第36-37页 |
| 2.2.9.2 染色质准备 | 第37页 |
| 2.2.9.3 免疫沉淀 | 第37页 |
| 2.2.9.4 Elution和解交联 | 第37-38页 |
| 2.2.9.5 DNA提取纯化 | 第38页 |
| 2.2.10 原生质体瞬时转化实验 | 第38-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-58页 |
| 3.1 BD-FHY3筛选酵母文库 | 第41-42页 |
| 3.2 DET1与FHY3相互作用 | 第42-44页 |
| 3.2.1 酵母双杂交 | 第42-43页 |
| 3.2.2 免疫共沉淀(Co-IP) | 第43-44页 |
| 3.3 FHY3蛋白的泛素化降解不受DET1及COP10的调控 | 第44-46页 |
| 3.4 DET1影响FHY3对下游靶基因的调控 | 第46-58页 |
| 3.4.1 DET1间接结合FHY3靶基因启动子FBS顺式作用元件 | 第46-47页 |
| 3.4.2 DET1与FHY3表达节律分析 | 第47-49页 |
| 3.4.3 ABA诱导DET1结合FHY3下游靶基因ABI5启动子 | 第49-50页 |
| 3.4.4 DET1抑制FHY3对下游靶基因的激活 | 第50-52页 |
| 3.4.4.1 酵母转录激活实验 | 第50-51页 |
| 3.4.4.2 原生质体瞬时转化实验 | 第51-52页 |
| 3.4.5 FHY3及DET1缺失突变体对ABA敏感度分析 | 第52-56页 |
| 3.4.6 FHY3缺失部分恢复det1对ABA敏感表型 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第70页 |
