| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 植物芽的再生 | 第11-17页 |
| 1.1.1 植物芽再生的理论基础 | 第12页 |
| 1.1.2 愈伤组织的形成 | 第12-14页 |
| 1.1.3 植物芽再生的调控机理 | 第14-16页 |
| 1.1.4 植物不同生态型芽的再生 | 第16-17页 |
| 1.2 植物类受体激酶 | 第17-21页 |
| 1.2.1 植物类受体激酶的分类 | 第17-19页 |
| 1.2.2 植物类受体激酶的功能 | 第19-20页 |
| 1.2.2.1 调控分生组织的活性 | 第19页 |
| 1.2.2.2 调控器官的形成 | 第19-20页 |
| 1.2.2.3 调控植物的抗病防御反应 | 第20页 |
| 1.2.3 植物类受体激酶的信号转导 | 第20-21页 |
| 1.3 植物葡萄糖 | 第21-24页 |
| 1.3.1 植物葡萄糖的合成与降解 | 第21-22页 |
| 1.3.2 植物葡萄糖介导的信号途径 | 第22-23页 |
| 1.3.3 葡萄糖调控植物的生长发育 | 第23-24页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 生化试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第25页 |
| 2.1.4 引物设计及常用引物 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-48页 |
| 2.2.1 拟南芥的种植和组织培养 | 第26-28页 |
| 2.2.1.1 处理拟南芥种子 | 第26-27页 |
| 2.2.1.2 拟南芥的组织培养 | 第27-28页 |
| 2.2.2 载体构建 | 第28-33页 |
| 2.2.2.1 PCR扩增目的片段 | 第28页 |
| 2.2.2.2 PCR产物回收 | 第28-29页 |
| 2.2.2.3 克隆载体的连接 | 第29页 |
| 2.2.2.4 大肠杆菌TOP10感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| 2.2.2.5 大肠杆菌的转化 | 第30页 |
| 2.2.2.6 菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第30-31页 |
| 2.2.2.7 质粒DNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.2.8 酶切回收 | 第32页 |
| 2.2.2.9 表达载体的连接 | 第32-33页 |
| 2.2.2.10 表达载体的验证 | 第33页 |
| 2.2.3 拟南芥突变体的鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.3.1 基因组DAN的提取 | 第33-34页 |
| 2.2.3.2 突变体的鉴定 | 第34页 |
| 2.2.4 拟南芥的遗传转化 | 第34-35页 |
| 2.2.4.1 农杆菌感受态的制备 | 第34-35页 |
| 2.2.4.2 农杆菌的转化 | 第35页 |
| 2.2.4.3 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第35页 |
| 2.2.4.4 转基因植株的鉴定 | 第35页 |
| 2.2.5 基因表达水平的检测 | 第35-37页 |
| 2.2.5.1 RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.5.2 RNA的反转录 | 第36-37页 |
| 2.2.5.3 实时定量PCR | 第37页 |
| 2.2.6 GUS染色 | 第37-38页 |
| 2.2.7 石蜡切片 | 第38-39页 |
| 2.2.7.1 取材固定 | 第38页 |
| 2.2.7.2 脱水与浸蜡 | 第38-39页 |
| 2.2.7.3 脱蜡与染色 | 第39页 |
| 2.2.8 酵母双杂交筛库 | 第39-40页 |
| 2.2.9 蛋白的表达与纯化 | 第40-43页 |
| 2.2.9.1 蛋白的体外表达 | 第40-41页 |
| 2.2.9.2 His蛋白的纯化 | 第41页 |
| 2.2.9.3 GST蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| 2.2.9.4 SDS-PAGE检测蛋白 | 第42-43页 |
| 2.2.10 WesternBlot | 第43-44页 |
| 2.2.11 蛋白质相互作用 | 第44-48页 |
| 2.2.11.1 酵母双杂交 | 第44-46页 |
| 2.2.11.2 体外Pull-down实验 | 第46-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-67页 |
| 3.1 GU-0生态型拟南芥芽再生能力受到抑制 | 第48-49页 |
| 3.2 GU-0生态型拟南芥芽再生关键调控因子的鉴定 | 第49-56页 |
| 3.2.1 BSA分析群体的获得 | 第49-50页 |
| 3.2.2 候选基因区间的定位 | 第50-53页 |
| 3.2.3 候选基因突变体表型分析 | 第53-56页 |
| 3.3 受体激酶GSO2调控植物芽的再生 | 第56-59页 |
| 3.3.1 受体激酶GSO2功能缺失导致芽再生能力降低 | 第56-57页 |
| 3.3.2 植物芽再生过程中GSO2基因表达模式分析 | 第57-59页 |
| 3.3.3 GSO2亚细胞定位分析 | 第59页 |
| 3.4 受体激酶GSO2互作蛋白的筛选 | 第59-61页 |
| 3.5 受体激酶GSO2与葡萄糖调控因子RHIP1互作 | 第61-63页 |
| 3.6 RHIP1突变芽再生能力降低 | 第63-64页 |
| 3.7 GSO2通过介导葡萄糖信号途径调控芽的再生 | 第64-67页 |
| 4 讨论 | 第67-69页 |
| 4.1 受体激酶GSO2是调控GU-0生态型拟南芥芽再生的关键因子 | 第67页 |
| 4.2 受体激酶调控植物芽的再生 | 第67-68页 |
| 4.3 葡萄糖调控植物芽的再生 | 第68页 |
| 4.4 GSO2通过调节葡萄糖的信号途径调控芽的再生 | 第68-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
