| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 前言 | 第7-14页 |
| 1. Wnt信号通路简介 | 第7-11页 |
| 1.1 经典Wnt信号通路中的关键蛋白 | 第7-10页 |
| 1.2 经典Wnt信号通路调控机理 | 第10-11页 |
| 1.3 Wnt信号通路与人类疾病的关系 | 第11页 |
| 2. KCTD1基因简介 | 第11-13页 |
| 3. 课题的研究思路和意义 | 第13-14页 |
| 第一部分 材料与方法 | 第14-28页 |
| 1. 材料 | 第14-17页 |
| 1.1 细胞株和菌种 | 第14页 |
| 1.2 载体和工具酶 | 第14页 |
| 1.3 抗体与试剂 | 第14-15页 |
| 1.4 所需溶液 | 第15-17页 |
| 2. 实验方法 | 第17-28页 |
| 2.0 质粒构建 | 第17-18页 |
| 2.1 细胞培养 | 第18-20页 |
| 2.3 萤光素酶分析实验 | 第20-21页 |
| 2.4 蛋白质免疫印迹 | 第21-22页 |
| 2.5 免疫共沉淀实验 | 第22-23页 |
| 2.6 GST pull-down实验 | 第23-26页 |
| 2.7 His pull-down分析 | 第26页 |
| 2.8 细胞免疫荧光实验 | 第26-27页 |
| 2.9 泛素化实验 | 第27-28页 |
| 第二部分 结果与分析 | 第28-41页 |
| 1. KCTD1抑制转录因子TCF/LEF转录活性 | 第28-29页 |
| 2. β-catenin与KCTD1蛋白在体内、体外相互作用 | 第29-34页 |
| 3. KCTD1过表达促进β-catenin蛋白降解,并且该降解过程由蛋白酶体介导和依赖于CK1/GSK-3β介导的磷酸化作用 | 第34-37页 |
| 4. β-TrCP促进KCTD1对β-catenin蛋白泛素化降解,并且KCTD1下调Wnt下游靶基因及AP-2α的表达 | 第37-39页 |
| 5. APC和P53调控KCTD1诱导的β-catenin蛋白降解 | 第39-41页 |
| 第三部分 讨论 | 第41-45页 |
| 参考文献 | 第45-53页 |
| 致谢 | 第53-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
