| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 第一章 概述 | 第11-21页 |
| 1.1 癌症当中的EMT过程 | 第11页 |
| 1.2 涉及EMT过程的一些关键基因 | 第11-13页 |
| 1.3 miRNA的发现及产生过程 | 第13-15页 |
| 1.4 miRNA的作用机制 | 第15-17页 |
| 1.5 miRNAs在癌症的转移和侵袭方面的研究现状 | 第17-19页 |
| 1.6 本文主要内容 | 第19-21页 |
| 第二章 目标基因的miRNAs预测及筛选 | 第21-30页 |
| 2.1 miRNA与靶基因的识别原则 | 第21-22页 |
| 2.2 几种常用的预测软件 | 第22-23页 |
| 2.3 CDH1 3'UTR区上miRNA结合位点的确定 | 第23-28页 |
| 2.4 与靶基因CHDH1相互作用的miRNA的确定 | 第28-29页 |
| 2.5 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 材料与方法 | 第30-46页 |
| 3.1 实验用品 | 第30-34页 |
| 3.1.1 实验所用主要仪器 | 第30页 |
| 3.1.2 细胞系,菌株和载体 | 第30-32页 |
| 3.1.3 实验所用主要试剂及相关溶液配制 | 第32-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-36页 |
| 3.2.1 Hela细胞系与细胞培养 | 第34-35页 |
| 3.2.2 构建miRNA的表达载体 | 第35-36页 |
| 3.2.3 miRNA靶基因的验证 | 第36页 |
| 3.3 具体实验操作 | 第36-44页 |
| 3.3.1 PCR模板制作 | 第36-38页 |
| 3.3.2 设计PCR引物 | 第38-39页 |
| 3.3.3 PCR扩增目的片段构建表达载体 | 第39-42页 |
| 3.3.4 细胞转染,检测其对CDH1的调控 | 第42-43页 |
| 3.3.5 细胞划痕实验 | 第43-44页 |
| 3.4 本章小结 | 第44-46页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第46-57页 |
| 4.1 实验所得数据 | 第46-54页 |
| 4.1.1 构建n-cherry-RNAs表达载体 | 第46-50页 |
| 4.1.2 Luciferase检测报告：(红色数据为无效数据) | 第50-53页 |
| 4.1.3 细胞划痕实验 | 第53-54页 |
| 4.2 实验结果分析 | 第54-56页 |
| 4.3 本章小结 | 第56-57页 |
| 第五章 总结与展望 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
