中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略词表 | 第6-10页 |
第一章 前言 | 第10-18页 |
1.1 乙烯对植物生长发育的影响 | 第10-12页 |
1.1.1 乙烯的发现过程 | 第10页 |
1.1.2 乙烯调节植物发育的研究进展 | 第10-11页 |
1.1.3 乙烯的经济价值 | 第11-12页 |
1.2 乙烯的合成过程 | 第12-14页 |
1.2.1 乙烯的生物合成过程 | 第12-13页 |
1.2.2 乙烯生物合成的关键酶 | 第13-14页 |
1.2.3 乙烯生物合成调控 | 第14页 |
1.3 乙烯信号传导途径 | 第14-17页 |
1.3.1 ETR1蛋白及同源物的作用 | 第14-15页 |
1.3.2 CTR1:Raf相关蛋白激酶 | 第15-16页 |
1.3.3 EIN2:具转导中介作用的膜内在蛋白 | 第16页 |
1.3.4 EIN3:乙烯信号途径的核定位因子 | 第16-17页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-32页 |
2.1 实验材料 | 第18-21页 |
2.1.1 拟南芥材料 | 第18页 |
2.1.2 工具酶及试剂 | 第18-19页 |
2.1.3 常用培养基配方 | 第19-21页 |
2.1.4 常用试剂 | 第21页 |
2.1.5 试剂盒 | 第21页 |
2.1.6 化学试剂 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-32页 |
2.2.1 拟南芥无菌苗培养 | 第21-22页 |
2.2.2 拟南芥的土壤栽培 | 第22页 |
2.2.3 CTAB法提取植物DNA | 第22页 |
2.2.4 ecs1与乙烯相关单突变体双突变体的构建及鉴定 | 第22-23页 |
2.2.5 酵母双杂载体构建 | 第23-27页 |
2.2.6 RNA干扰载体的构建 | 第27-28页 |
2.2.7 构建35S启动子下融合GFP的ACS5和ACS6基因的超表达载体 | 第28-29页 |
2.2.8 Floral Dipping法转化拟南芥 | 第29页 |
2.2.9 转基因植株筛选 | 第29页 |
2.2.10 RNA的提取 | 第29-30页 |
2.2.11 cDNA第一链的合成 | 第30页 |
2.2.12 RT-PCR | 第30页 |
2.2.13 qRT-PCR | 第30-32页 |
第三章 结果与分析 | 第32-47页 |
3.1 ecs1突变体表现出乙烯三重反应,内源乙烯含量增多 | 第32-36页 |
3.1.1 ecs1下胚轴变短扭曲,根长变短,根毛数增多 | 第32-33页 |
3.1.2 ecs1突变体的根表皮细胞变粗短 | 第33-34页 |
3.1.3 ecs1突变体对乙烯前体ACC敏感性降低 | 第34页 |
3.1.4 乙烯抑制剂AVG、AgNO_3能部分恢复ecs1的表型 | 第34-36页 |
3.2 拟南芥乙烯信号通路和合成通路中的相关基因与ECS1基因的酵母双杂实验 | 第36页 |
3.3 乙烯相关突变体与ecs1的双突变体的构建及表型分析 | 第36-43页 |
3.3.1 etr1 ecs1双突变体表现为ecs1的表型 | 第37-39页 |
3.3.2 ctr1 ecs1双突变体表现为ctr1-1表型的加剧 | 第39-41页 |
3.3.3 ein3 ecs1双突变体表现为ecs1的表型 | 第41-43页 |
3.4 ACS5、ACS6基因超表达植株部分模拟ecs1的表型 | 第43-46页 |
3.5 RNAi干扰ECS1基因的研究 | 第46-47页 |
第四章 讨论 | 第47-51页 |
4.1 ecs1是一个乙烯相关的突变体 | 第47页 |
4.2 ECS1调控下胚轴和根的表型部分依赖于乙烯信号通路 | 第47-48页 |
4.3 ECS1可能影响了乙烯合成通路 | 第48-50页 |
4.4 RNA干扰ECS1基因不能使ecs1的表型恢复 | 第50-51页 |
小结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
致谢 | 第61页 |