| 内容摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-31页 |
| 1.1 染色质的动态调节 | 第11-13页 |
| 1.2 DNA甲基化 | 第13-14页 |
| 1.3 DNA甲基化与转录抑制 | 第14页 |
| 1.4 甲基化诱导基因沉默的机制 | 第14-15页 |
| 1.5 DNA甲基转移酶 | 第15-19页 |
| 1.6 DNA去甲基化 | 第19-20页 |
| 1.7 TET(Ten-Eleven Translocation)双加氧酶家族 | 第20-24页 |
| 1.8 Tet蛋白和5hmC在细胞核内的功能 | 第24-26页 |
| 1.9 OGT(O-linked -N-乙酰葡萄糖胺转移酶) | 第26-31页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第31-58页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-42页 |
| 2.1.1 常用试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.2 酶类 | 第32页 |
| 2.1.3 试剂盒 | 第32页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第32-33页 |
| 2.1.5 缓冲液配方 | 第33-37页 |
| 2.1.6 蛋白表达质粒 | 第37-38页 |
| 2.1.7 抗体 | 第38-40页 |
| 2.1.8 基因克隆引物 | 第40-41页 |
| 2.1.9 小鼠 | 第41-42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-58页 |
| 2.2.1 总RNA提取 | 第42页 |
| 2.2.2 反转录获得cDNA | 第42-43页 |
| 2.2.3 PCR扩增目的片段 | 第43-44页 |
| 2.2.4 PCR产物回收 | 第44-45页 |
| 2.2.5 PCR产物和载体的酶切及连接 | 第45页 |
| 2.2.6 转化大肠杆菌感受态 | 第45-46页 |
| 2.2.7 挑取单克隆 | 第46页 |
| 2.2.8 碱裂解法小量提取质粒 | 第46-47页 |
| 2.2.9 定点突变 | 第47-48页 |
| 2.2.10 细胞传代 | 第48页 |
| 2.2.11 细胞冻存 | 第48-49页 |
| 2.2.12 细胞复苏 | 第49页 |
| 2.2.13 细胞转染 | 第49-50页 |
| 2.2.14 免疫共沉淀 | 第50页 |
| 2.2.15 免疫印迹 | 第50-51页 |
| 2.2.16 银染 | 第51-52页 |
| 2.2.17 质谱鉴定蛋白 | 第52-53页 |
| 2.2.18 基因组DNA抽提 | 第53-54页 |
| 2.2.19 Dot Blotting | 第54页 |
| 2.2.20 免疫染色 | 第54-55页 |
| 2.2.21 甲基化免疫染色 | 第55页 |
| 2.2.22 免疫组化 | 第55-58页 |
| 第三章 实验结果 | 第58-80页 |
| 引言 | 第58-59页 |
| 3.1 构建人源全长TET1,TET2,TET3的表达质粒 | 第59-60页 |
| 3.2 OGT是与TET3结合的主要蛋白 | 第60-62页 |
| 3.3 鉴定TET3和OGT相互作用的区域 | 第62-64页 |
| 3.4 OGT催化TET3发生O-GlcNAc糖基化修饰 | 第64-65页 |
| 3.5 OGT以一种酶活依赖的方式促进TET3出核 | 第65-67页 |
| 3.6 TET3核定位序列的鉴定 | 第67页 |
| 3.7 OGT促进TET3出核 | 第67-70页 |
| 3.8 OGT通过影响TET3的亚细胞定位来负调控TET3催化5hmC的活性 | 第70-71页 |
| 3.9 LMB拮抗OGT对TET3的负调控效应 | 第71-72页 |
| 3.10 DON拮抗OGT对TET3的负调控效应 | 第72-73页 |
| 3.11 OGT催化TET1和TET2发生O-GlcNAc修饰 | 第73-74页 |
| 3.12 OGT不影响TET1,TET2的亚细胞定位以及其酶活性 | 第74-76页 |
| 3.13 葡萄糖的浓度能够调节TET3的O-GlcNAc修饰以及亚细胞定位 | 第76-77页 |
| 3.14 OGA影响TET3的O-GlcNAc修饰水平以及其亚细胞定位 | 第77-79页 |
| 3.15 高血糖促使Tet3出核 | 第79-80页 |
| 第四章 讨论 | 第80-83页 |
| 附录：缩略词 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-100页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
