| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-31页 |
| 1. JNK信号通路与细胞凋亡 | 第13-17页 |
| 1.1 JNK信号通路 | 第13-15页 |
| 1.1.1 JNK编码的基因 | 第14页 |
| 1.1.2 JNK上游信号通路 | 第14-15页 |
| 1.1.3 JNK下游信号通路 | 第15页 |
| 1.1.4 JNK信号通路的激活 | 第15页 |
| 1.2 JNK信号通路介导的细胞凋亡 | 第15-17页 |
| 1.2.1 Bcl-2家族对细胞凋亡的调控 | 第16页 |
| 1.2.2 P53蛋白对细胞凋亡的调控 | 第16-17页 |
| 2. 热应激 | 第17-22页 |
| 2.1 奶牛热应激 | 第18-19页 |
| 2.2 热休克蛋白家族与HSP72 | 第19-21页 |
| 2.2.1 热休克蛋白家族简介 | 第19-20页 |
| 2.2.2 HSP72与JNK信号通路 | 第20-21页 |
| 2.3 细胞热应激与JNK信号通路 | 第21-22页 |
| 2.3.1 细胞热应激与氧化应激 | 第21-22页 |
| 2.3.2 热应激与JNK信号通路调控 | 第22页 |
| 3. 总结 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-31页 |
| 第二章 JNK抑制剂对热处理下奶牛乳腺上皮细胞增殖及凋亡的影响 | 第31-43页 |
| 1. 材料与方法 | 第31-33页 |
| 1.1 试验动物 | 第31页 |
| 1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 1.3 主要仪器 | 第31-32页 |
| 1.4 试验方法 | 第32-33页 |
| 1.4.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第32页 |
| 1.4.2 奶牛乳腺上皮细胞的纯化、传代 | 第32-33页 |
| 1.4.3 奶牛乳腺上皮细胞的鉴定 | 第33页 |
| 2. 测定指标及方法 | 第33-34页 |
| 2.1 试验分组与处理 | 第33页 |
| 2.2 MTT法检测奶牛乳腺上皮细胞活力 | 第33-34页 |
| 2.3 细胞流式术检测奶牛乳腺上皮细胞的凋亡 | 第34页 |
| 2.4 数据统计与分析 | 第34页 |
| 3. 结果 | 第34-39页 |
| 3.1 奶牛乳腺上皮细胞的形态学观察 | 第34-35页 |
| 3.2 奶牛乳腺上皮细胞的角蛋白-18鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3 JNK抑制剂对热处理下的奶牛乳腺上皮细胞活力的影响 | 第36-37页 |
| 3.4 JNK抑制剂对热处理下的奶牛乳腺上皮细胞凋亡的影响 | 第37-39页 |
| 4. 讨论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 第三章 JNK抑制剂对热处理下奶牛乳腺上皮细胞的氧化性损伤影响 | 第43-59页 |
| 1. 材料与方法 | 第43-46页 |
| 1.1 试验动物 | 第43页 |
| 1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
| 1.3 主要仪器 | 第44页 |
| 1.4 试验方法 | 第44-46页 |
| 1.4.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第44页 |
| 1.4.2 细胞样品中总RNA的提取 | 第44-45页 |
| 1.4.3 总RNA反转录为cDNA | 第45页 |
| 1.4.4 细胞中总蛋白的提取 | 第45页 |
| 1.4.5 总蛋白浓度测定 | 第45-46页 |
| 2. 测定指标及方法 | 第46-49页 |
| 2.1 试验分组与处理 | 第46页 |
| 2.2 奶牛乳腺上皮细胞内ROS水平检测 | 第46页 |
| 2.3 奶牛乳腺上皮细胞内SOD活性检测 | 第46-47页 |
| 2.4 奶牛乳腺上皮细胞内MDA含量检测 | 第47页 |
| 2.5 奶牛乳腺上皮细胞内GSH含量检测 | 第47页 |
| 2.6 Real-time PCR分析HSP72 mRNA的表达 | 第47-48页 |
| 2.7 Western blot分析HSP72蛋白的表达 | 第48-49页 |
| 2.8 数据统计与分析 | 第49页 |
| 3. 结果 | 第49-55页 |
| 3.1 JNK抑制剂对热处理下奶牛乳腺上皮细胞内ROS水平的影响 | 第49-51页 |
| 3.2 JNK抑制剂对热处理下奶牛乳腺上皮细胞内抗氧化指标的影响 | 第51-53页 |
| 3.3 JNK抑制剂对热处理下奶牛乳腺上皮细胞内热应激蛋白HSP72表达的影响 | 第53-55页 |
| 4. 讨论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 第四章 JNK信号通路对热处理下奶牛乳腺上皮细胞凋亡相关基因表达的影响 | 第59-73页 |
| 1. 材料与方法 | 第59-60页 |
| 1.1 试验动物 | 第59页 |
| 1.2 主要试剂 | 第59-60页 |
| 1.3 主要仪器 | 第60页 |
| 1.4 试验方法 | 第60页 |
| 1.4.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第60页 |
| 1.4.2 细胞样品中总RNA的提取 | 第60页 |
| 1.4.3 总RNA反转录为cDNA | 第60页 |
| 1.4.4 细胞中总蛋白的提取 | 第60页 |
| 1.4.5 总蛋白浓度测定 | 第60页 |
| 2. 测定指标及方法 | 第60-61页 |
| 2.1 试验分组与处理 | 第60页 |
| 2.2 Real-timePCR分析JNK、Bax、Bcl-2、P53和PUMA mRNA的表达 | 第60-61页 |
| 2.3 Western blot分析p-JNK、Bax、Bcl-2、P53和PUMA蛋白的表达 | 第61页 |
| 2.4 数据统计与分析 | 第61页 |
| 3. 结果 | 第61-68页 |
| 3.1 热处理对奶牛乳腺上皮细胞内JNK mRNA表达水平的影响 | 第61-62页 |
| 3.2 热处理对奶牛乳腺上皮细胞内p-JNK蛋白表达水平的影响 | 第62-63页 |
| 3.3 热处理对奶牛乳腺上皮细胞内Bax和Bcl-2表达水平的影响 | 第63-66页 |
| 3.4 热处理对奶牛乳腺上皮细胞内P53和PUMA表达水平的影响 | 第66-68页 |
| 4. 讨论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 全文结论 | 第73-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
