| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1. 双酚A的研究概述 | 第13-16页 |
| 1.1 双酚A的来源 | 第13-14页 |
| 1.2 双酚A的作用方式 | 第14-15页 |
| 1.3 双酚A与DNA甲基化 | 第15-16页 |
| 2. 禽类胚胎期性腺的发育概况 | 第16-21页 |
| 2.1 禽类胚胎期卵巢发育概况 | 第16-17页 |
| 2.2 哺乳动物胚胎期减数分裂的过程的概况 | 第17-19页 |
| 2.3 雌性生殖细胞减数分裂起始调控 | 第19-20页 |
| 2.4 原始卵泡的形成与卵子的发生 | 第20-21页 |
| 3. 本研究的目的 | 第21页 |
| 4. 意义 | 第21-23页 |
| 第二章 双酚A对体外培养的鸡胚卵母细胞减数分裂的作用 | 第23-35页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第23-29页 |
| 1.1 实验动物及样品采集 | 第23页 |
| 1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 1.3 主要仪器 | 第23-24页 |
| 1.4 主要溶液及其配置 | 第24页 |
| 1.4.1 双酚A配制 | 第24页 |
| 1.4.2 E2配制 | 第24页 |
| 1.4.3 ICI182780的配制 | 第24页 |
| 1.4.4 PBS配制 | 第24页 |
| 1.4.5 RNA提取相关试剂配制 | 第24页 |
| 1.4.6 4%多聚甲醛固定液 | 第24页 |
| 1.5 鸡胚卵巢组织体外培养 | 第24-25页 |
| 1.5.1 培养基的准备 | 第24-25页 |
| 1.5.2 胚胎卵巢组织的培养 | 第25页 |
| 1.6 引物设计 | 第25-26页 |
| 1.7 总RNA提取与cDNA的合成 | 第26-27页 |
| 1.7.1 总RNA提取 | 第26页 |
| 1.7.2 cDNA的合成 | 第26-27页 |
| 1.8 实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 1.9 Western Blotting | 第28-29页 |
| 1.9.1 样品制备和定量 | 第28页 |
| 1.9.2 SDS- PAGE电泳分析 | 第28页 |
| 1.9.3 蛋白质转膜 | 第28页 |
| 1.9.4 转印膜封闭 | 第28页 |
| 1.9.5 一抗杂交 | 第28页 |
| 1.9.6 二抗杂交 | 第28页 |
| 1.9.7 信号检测 | 第28-29页 |
| 1.10 数据分析 | 第29页 |
| 2. 实验结果 | 第29-32页 |
| 2.1 cDNA质量检测 | 第29页 |
| 2.2 不同浓度的双酚A对卵母细胞减数分裂的作用 | 第29-30页 |
| 2.3 双酚A对不同时期卵母细胞减数分裂的作用以及Dnmts的表达 | 第30-31页 |
| 2.4 雌激素受体在鸡胚卵巢组织中的表达 | 第31-32页 |
| 3. 讨论 | 第32-33页 |
| 4. 小结 | 第33-35页 |
| 第三章 双酚A对卵母细胞减数分裂调控机制的研究 | 第35-51页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第35-41页 |
| 1.1 实验动物及样品采集 | 第35页 |
| 1.2 主要试剂以及溶液配制 | 第35页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第35页 |
| 1.2.2 主要溶液及其配置 | 第35页 |
| 1.3 主要仪器 | 第35-36页 |
| 1.4 卵巢组织切片制作与HE染色 | 第36-37页 |
| 1.4.1 石蜡切片制作 | 第36页 |
| 1.4.2 HE染色 | 第36-37页 |
| 1.5 观察鸡胚胎期卵巢组织的形态 | 第37页 |
| 1.6 卵巢组织冰冻切片制作 | 第37-38页 |
| 1.6.1 冰冻切片制作 | 第37页 |
| 1.6.2 免疫荧光染色 | 第37-38页 |
| 1.7 RNA的提取 | 第38页 |
| 1.8 QRT-PCR | 第38-39页 |
| 1.9 甲基化亚硫酸氢钠测序 | 第39-41页 |
| 1.9.1 基因启动子中CPG区域的寻找及引物设计 | 第39-40页 |
| 1.9.2 BSP扩增反应 | 第40-41页 |
| 1.10 Western Blotting | 第41页 |
| 1.11 数据分析 | 第41页 |
| 2. 实验结果 | 第41-48页 |
| 2.1 不同浓度的双酚A在鸡胚卵巢组织中的表达 | 第41-42页 |
| 2.1.1 cDNA质量检测 | 第41-42页 |
| 2.1.2 不同浓度的双酚A对鸡胚卵母细胞减数分裂的影响 | 第42页 |
| 2.2 鸡胚胎期卵巢组织发育的形态特征 | 第42-43页 |
| 2.3 γH2AX在胚胎期卵巢组织中的表达 | 第43-44页 |
| 2.4 双酚A在不同时期鸡胚卵巢组织中的表达情况 | 第44-45页 |
| 2.5 双酚A对ERβ蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
| 2.6 双酚A对卵巢中Dazl和Stra8的甲基化的影响 | 第46-47页 |
| 2.7 双酚A对原始卵泡形成的作用 | 第47-48页 |
| 3. 讨论 | 第48-50页 |
| 4. 小结 | 第50-51页 |
| 全文结论 | 第51-53页 |
| 全文创新点 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 附录 | 第63-65页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第65页 |
