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猪带绦虫HSP70-4真核表达及其免疫佐剂效应研究

摘要第5-6页
abstract第6-7页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-20页
    1.1 猪带绦虫概述第12-14页
        1.1.1 猪带绦虫及猪囊尾蚴病第12页
        1.1.2 猪囊尾蚴病免疫学诊断的研究进展第12-13页
        1.1.3 猪囊尾蚴病的治疗与预防第13-14页
    1.2 热休克蛋白70概述第14-19页
        1.2.1 热休克蛋白发现及分类第14页
        1.2.2 HSP70家族的结构特征及分类第14-15页
        1.2.3 HSP70的生物学功能第15-17页
        1.2.4 HSP70在寄生虫中的研究进展第17-19页
    1.3 研究目的与意义第19-20页
第二章 TsHSP70-4 基因克隆及序列分析第20-27页
    2.1 材料与方法第20-21页
        2.1.1 虫株、菌株及试剂第20页
        2.1.2 主要仪器第20页
        2.1.3 引物的设计与合成第20页
        2.1.4 猪带绦虫总RNA的提取第20-21页
        2.1.5 c DNA的合成第21页
        2.1.6 TsHSP70-4 基因的扩增第21页
        2.1.7 TsHSP70-4 生物信息学分析第21页
    2.2 实验结果第21-26页
        2.2.1 总RNA的提取第21-22页
        2.2.2 TsHSP70-4 基因的扩增与测序第22-23页
        2.2.3 TsHSP70-4 生物信息学分析第23-26页
    2.3 讨论第26-27页
第三章 TsHSP70-4 真核表达第27-33页
    3.1 材料与方法第27-29页
        3.1.1 载体、菌株与试剂第27页
        3.1.2 主要仪器第27页
        3.1.3 重组质粒p PIC9K-TsHSP70-4 的构建第27-28页
        3.1.4 重组质粒p PIC9K-TsHSP70-4 线性化第28页
        3.1.5 酵母感受态细胞的制备第28页
        3.1.6 电击转化与菌落筛选第28-29页
        3.1.7 TsHSP70-4 重组蛋白的诱导表达第29页
        3.1.8 TsHSP70-4 重组蛋白的纯化与鉴定第29页
    3.2 实验结果第29-32页
        3.2.1 重组质粒p PIC9K-TsHSP70-4 线性化第29-30页
        3.2.2 TsHSP70-4 重组蛋白的诱导表达第30-31页
        3.2.3 TsHSP70-4 重组蛋白的纯化第31页
        3.2.4 纯化后的TsHSP70-4 的Western-blot及质谱鉴定第31-32页
    3.3 讨论第32-33页
第四章 TsHSP704TSOL18真核表达第33-39页
    4.1 材料与方法第33-34页
        4.1.1 载体、菌株与试剂第33页
        4.1.2 主要仪器第33页
        4.1.3 重组质粒p PIC9K-TsHSP704TSOL18的构建第33页
        4.1.4 重组质粒p PIC9K-TsHSP704TSOL18线性化第33-34页
        4.1.5 酵母感受态细胞的制备第34页
        4.1.6 电击转化与菌落筛选第34页
        4.1.7 TsHSP704TSOL18重组蛋白的诱导表达第34页
        4.1.8 TsHSP704TSOL18重组蛋白的纯化与鉴定第34页
    4.2 实验结果第34-37页
        4.2.1 重组质粒p PIC9K-TsHSP704TSOL18线性化第34-35页
        4.2.2 TsHSP704TSOL18重组蛋白的诱导表达第35-36页
        4.2.3 TsHSP704TSOL18重组蛋白的纯化第36页
        4.2.4 TsHSP704TSOL18重组蛋白的Western-blot鉴定第36-37页
    4.3 讨论第37-39页
第五章 TsHSP70-4 的免疫佐剂效应第39-47页
    5.1 材料与方法第39-41页
        5.1.1 主要试剂第39页
        5.1.2 主要仪器第39页
        5.1.3 实验动物第39页
        5.1.4 实验小鼠分组第39-40页
        5.1.5 实验小鼠免疫与采血第40页
        5.1.6 实验小鼠血清TSOL18抗体的检测第40-41页
        5.1.7 实验小鼠IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ 的检测第41页
        5.1.8 实验小鼠全血T淋巴细胞亚群的测定第41页
    5.2 实验结果第41-45页
        5.2.1 实验小鼠血清TSOL18抗体的检测第41-42页
        5.2.2 实验小鼠IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ 的检测第42-44页
        5.2.3 实验小鼠全血T淋巴细胞亚群的测定第44-45页
    5.3 讨论第45-47页
第六章 全文结论第47-48页
参考文献第48-53页
致谢第53-54页
作者简历第54页

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