摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第11-20页 |
1 气肿疽概述 | 第11页 |
2 病原学研究 | 第11-13页 |
2.1 形态与染色特性 | 第11-12页 |
2.2 培养与生化特性 | 第12页 |
2.3 气肿疽梭菌抗原 | 第12-13页 |
3 流行病学 | 第13-14页 |
3.1 传染来源 | 第13页 |
3.2 传播途径 | 第13页 |
3.3 易感动物 | 第13页 |
3.4 流行情况 | 第13-14页 |
4 临床症状及病理变化 | 第14-15页 |
5 防控与治疗 | 第15页 |
5.1 防控措施 | 第15页 |
5.2 治疗方法 | 第15页 |
6 检测诊断方法 | 第15-18页 |
6.1 临床综合诊断 | 第15-16页 |
6.2 病原学诊断 | 第16-17页 |
6.3 毒素检查 | 第17-18页 |
6.4 血清学试验 | 第18页 |
7 免疫学研究 | 第18页 |
8 研究进展 | 第18-19页 |
9 研究目的与意义 | 第19-20页 |
材料与方法 | 第20-35页 |
1 材料 | 第20-25页 |
1.1 样本与菌株 | 第20页 |
1.2 实验动物 | 第20页 |
1.3 载体与细胞株 | 第20页 |
1.4 抗体与培养液 | 第20页 |
1.5 主要酶与试剂 | 第20-21页 |
1.6 主要仪器设备 | 第21页 |
1.7 主要配制溶液 | 第21-25页 |
2 方法 | 第25-35页 |
2.1 血涂片染色镜检 | 第25页 |
2.2 细菌分离与纯化 | 第25页 |
2.3 生化试验 | 第25页 |
2.4 动物实验 | 第25-26页 |
2.5 气肿疽梭菌的检测和鉴定 | 第26-28页 |
2.6 气肿疽梭菌CctA基因的克隆 | 第28-30页 |
2.7 CctA基因的序列测定及分析 | 第30-31页 |
2.8 重组质粒pVAX1-CctA的构建 | 第31-32页 |
2.9 Vero细胞的培养和传代 | 第32-33页 |
2.10 重组质粒pVAX1-CctA的表达分析 | 第33-35页 |
结果 | 第35-46页 |
1 血涂片染色镜检 | 第35页 |
2 细菌培养结果 | 第35-36页 |
3 生化试验结果 | 第36页 |
4 动物实验结果 | 第36页 |
5 PCR检测结果 | 第36-37页 |
6 统计学分析结果 | 第37-39页 |
6.1 PCR法与血液涂片镜检法的比较 | 第37页 |
6.2 不同县市牛感染气肿疽的情况 | 第37-38页 |
6.3 不同饲养方式牛感染气肿疽的情况 | 第38页 |
6.4 不同品种牛感染气肿疽的情况 | 第38页 |
6.5 不同年龄牛感染气肿疽的情况 | 第38-39页 |
6.6 不同地理条件下牛感染气肿疽情况 | 第39页 |
7 CctA基因的扩增 | 第39-40页 |
8 重组质粒pMD 19-T-CctA的鉴定 | 第40-41页 |
8.1 重组质粒pMD 19-T-CctA的PCR鉴定 | 第40-41页 |
8.2 重组质粒pMD 19-T-CctA的双酶切鉴定 | 第41页 |
9 CctA基因克隆产物的序列测定及分析 | 第41-43页 |
9.1 CctA基因核苷酸和氨基酸同源性比对分析 | 第41-42页 |
9.2 CctA基因核苷酸和氨基酸遗传进化树分析 | 第42-43页 |
10 重组表达质粒pVAX1-CctA的鉴定 | 第43-44页 |
10.1 重组质粒pVAX1-CctA的PCR鉴定 | 第43-44页 |
10.2 重组质粒pVAX1-CctA的双酶切鉴定 | 第44页 |
11 pVAX1-CctA质粒中CctA基因表达的鉴定 | 第44-46页 |
11.1 IFAT检测CctA基因的表达 | 第44-45页 |
11.2 Western blotting检测CctA基因的表达 | 第45-46页 |
讨论 | 第46-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
附录A (作者简介) | 第56-57页 |
附录B (在研期间发表的论文) | 第57页 |