| 缩略词表 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 溶菌酶概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 溶菌酶的研究历史 | 第11-12页 |
| 1.1.2 溶菌酶的分类 | 第12-14页 |
| 1.2 溶菌酶的应用 | 第14-15页 |
| 1.2.1 溶菌酶在食品工业中的应用 | 第14页 |
| 1.2.2 溶菌酶在水产养殖中的应用 | 第14-15页 |
| 1.2.3 溶菌酶在医疗保健中的应用 | 第15页 |
| 1.2.4 溶菌酶在生物工程中的应用 | 第15页 |
| 1.3 溶菌酶的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.4 溶菌酶研究中使用的技术方法 | 第17-19页 |
| 1.4.1 大肠杆菌表达系统 | 第17页 |
| 1.4.2 酵母表达系统 | 第17-18页 |
| 1.4.3 枯草芽孢杆菌表达系统 | 第18页 |
| 1.4.4 昆虫表达系统 | 第18-19页 |
| 1.5 研究的主要内容,方法及意义 | 第19-21页 |
| 1.5.1 研究的主要内容 | 第19页 |
| 1.5.2 研究的主要方法及过程 | 第19-20页 |
| 1.5.3 研究的意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-39页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第21-25页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 工具酶与试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 特异性引物 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第22-23页 |
| 2.1.5 主要溶液和缓冲液 | 第23-25页 |
| 2.1.6 培养基 | 第25页 |
| 2.2 方法和步骤 | 第25-36页 |
| 2.2.1 重组表达质粒的构建 | 第25-30页 |
| 2.2.2 表达工程菌的构建 | 第30-31页 |
| 2.2.3 工程菌的发酵及重组蛋白的分离纯化 | 第31-34页 |
| 2.2.4 蛋白含量的测定 | 第34-35页 |
| 2.2.5 重组蛋白抑菌活性的测定 | 第35-36页 |
| 2.3 分子动力学模拟(MD) | 第36-39页 |
| 2.3.1 MD简介 | 第36页 |
| 2.3.2 MD在蛋白质研究中的应用 | 第36-37页 |
| 2.3.3 海参溶菌酶C端多肽MD过程 | 第37-39页 |
| 第三章 结果与分析 | 第39-56页 |
| 3.1 重组表达质粒的构建 | 第39-43页 |
| 3.1.1 质粒的提取 | 第39页 |
| 3.1.2 质粒的双酶切和回收 | 第39-41页 |
| 3.1.3 目的基因片段与载体的连接 | 第41-42页 |
| 3.1.4 表达质粒的验证 | 第42-43页 |
| 3.2 表达工程菌株的构建 | 第43页 |
| 3.3 工程菌的发酵表达及重组蛋白的分离纯化 | 第43-49页 |
| 3.3.1 重组蛋白的表达验证 | 第43-45页 |
| 3.3.2 工程菌最佳表达条件的确定 | 第45-46页 |
| 3.3.3 工程菌发酵及重组蛋白的分离纯化 | 第46-47页 |
| 3.3.4 重组蛋白含量的测定 | 第47页 |
| 3.3.5 抑菌活性的测定 | 第47-49页 |
| 3.4 海参溶菌酶C端多肽的分子动力学模拟 | 第49-56页 |
| 3.4.1 SjLys-C多肽MD轨迹的RMSD分析 | 第49-50页 |
| 3.4.2 SjLys-C多肽MD轨迹的Rg分析 | 第50-51页 |
| 3.4.3 SjLys-C多肽MD轨迹的溶剂可及表面积分析 | 第51页 |
| 3.4.4 SjLys-C多肽MD轨迹的RMSF分析 | 第51-52页 |
| 3.4.5 SjLys-C多肽MD轨迹的活性位点距离分析 | 第52-53页 |
| 3.4.6 SjLys-C多肽MD轨迹的二级及三级结构分析 | 第53页 |
| 3.4.7 SjLys-C多肽低温退火MD轨迹的结构分析 | 第53-56页 |
| 第四章 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
