摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
第一章 绪论 | 第8-42页 |
·单核细胞增生性李斯特菌 | 第8-27页 |
·李斯特菌与单核细胞增生性李斯特菌 | 第8-9页 |
·单核细胞增生性李斯特菌的生活周期 | 第9-14页 |
·单核细胞增生性李斯特菌的主要毒力因子 | 第14-21页 |
·李斯特菌感染的免疫学研究进展 | 第21-27页 |
·天然免疫识别与I 型干扰素应答 | 第27-34页 |
·天然免疫识别 | 第27-31页 |
·I 型干扰素 | 第31-34页 |
·SUMO 化修饰研究进展 | 第34-42页 |
·蛋白质翻译后修饰 | 第34-35页 |
·SUMO 化修饰概述 | 第35页 |
·SUMO 化修饰的反应过程 | 第35页 |
·参与SUMO 化修饰过程的酶 | 第35-36页 |
·SUMO 化修饰的功能 | 第36-39页 |
·SUMO 化修饰与泛素化修饰 | 第39-41页 |
·SUMO 化修饰与疾病 | 第41-42页 |
第二章 材料和方法 | 第42-56页 |
·细胞培养和细胞转染 | 第42-43页 |
·细胞株 | 第42页 |
·细胞培养 | 第42页 |
·细胞冻存 | 第42-43页 |
·细胞复苏 | 第43页 |
·细胞的转染 | 第43页 |
·质粒和菌株 | 第43-50页 |
·用于转染的大量Endofree 质粒的提取 | 第44页 |
·李斯特菌LLO 表达载体的构建和蛋白纯化 | 第44-50页 |
·病毒的扩增和滴度测定 | 第50-51页 |
·EMCV 的扩增 | 第50页 |
·EMCV 的纯化 | 第50-51页 |
·单增李斯特菌的培养 | 第51-52页 |
·李斯特菌培养 | 第51页 |
·BHI 的配制 | 第51页 |
·BHI 固体培养基的配制 | 第51-52页 |
·RT-PCR 及Real Time PCR 检测基因的表达 | 第52-53页 |
·Trizol 细胞总RNA 的提取 | 第52页 |
·反转录 | 第52页 |
·病毒RNA 的提取 | 第52-53页 |
·提取培养上清的病毒RNA | 第52-53页 |
·用 TRIzol 试剂提取附着于细胞的 EMCV 病毒 RNA | 第53页 |
·Real time PCR | 第53页 |
·免疫共沉淀和免疫印记实验 | 第53-55页 |
·荧光素酶报告基因活性检测方法 | 第55页 |
·统计学处理 | 第55-56页 |
第三章 实验结果 | 第56-71页 |
·单增李斯特菌能显著下调MDA-5 水平 | 第56-58页 |
·单增李斯特菌能下调过表达情况下的MDA-5 水平 | 第56-57页 |
·单增李斯特菌也能下调Hela 细胞中的内源MDA-5 水平 | 第57-58页 |
·单增李斯特菌的毒力因子LLO 能够导致MDA-5 水平下调 | 第58-63页 |
·LLO 缺陷的单增李斯特菌不能下调MDA-5 水平 | 第58-59页 |
·体外纯化的LLO 蛋白也能下调MDA-5 水平 | 第59-63页 |
·单核增生李斯特菌感染下调MDA5 蛋白水平不是发生在转录水平 | 第63-64页 |
·单核增生李斯特菌感染可能在翻译后水平上下调MDA5 蛋白水平 | 第64-65页 |
·单核增生李斯特菌感染下调MDA5 蛋白水平依赖于泛素-蛋白酶体途径 | 第65-67页 |
·单核增生李斯特菌感染下调MDA5 蛋白水平可能与SUMO 化修饰相关 | 第67-68页 |
·单核增生李斯特菌感染可以下调MDA5 介导的I 型干扰素应答 | 第68-70页 |
·单核增生李斯特菌感染可以增强MDA5 特异性病毒的复制 | 第70-71页 |
第四章 讨论 | 第71-75页 |
参考文献 | 第75-93页 |
致谢 | 第93-95页 |
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第95页 |