| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 绪论 | 第7-11页 |
| 1.1 引言 | 第7页 |
| 1.2 转录因子的研究现状 | 第7-8页 |
| 1.3 Dof转录因子的研究进展 | 第8-9页 |
| 1.3.1 Dof转录因子的结构 | 第8页 |
| 1.3.2 Dof转录因子和植物激素 | 第8-9页 |
| 1.3.3 Dof转录因子和逆境胁迫 | 第9页 |
| 1.4 柽柳简介 | 第9页 |
| 1.5 前期研究 | 第9页 |
| 1.6 研究内容及技术路线 | 第9-11页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第10页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第10-11页 |
| 2 柽柳Dof家族基因的克隆与分析 | 第11-23页 |
| 2.1 实验材料 | 第11页 |
| 2.1.1 植物材料的处理 | 第11页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第11页 |
| 2.1.3 溶液配制 | 第11页 |
| 2.2 实验方法 | 第11-14页 |
| 2.2.1 RNA的提取,纯化和反转录 | 第11-12页 |
| 2.2.2 实时荧光定量RT-PCR | 第12-14页 |
| 2.3 结果与分析 | 第14-22页 |
| 2.3.1 ThDof家族基因的生物信息学分析 | 第14-16页 |
| 2.3.2 ThDof基因在根、茎和叶中的转录 | 第16-17页 |
| 2.3.3 ThDof基因响应不同胁迫表达模式分析 | 第17-22页 |
| 2.4 讨论 | 第22页 |
| 2.5 本章小结 | 第22-23页 |
| 3 柽柳ThDof6基因启动子的克隆及表达分析 | 第23-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第23页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 3.1.2 菌种与载体 | 第23页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第23页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第23页 |
| 3.2 实验方法 | 第23-30页 |
| 3.2.1 柽柳基因组DNA提取 | 第23-24页 |
| 3.2.2 ThDof6基因的启动子克隆 | 第24-27页 |
| 3.2.3 ThDof6基因启动子的表达特性分析 | 第27-30页 |
| 3.3 结果与分析 | 第30-36页 |
| 3.3.1 ThDof6基因启动子序列的获得 | 第30-33页 |
| 3.3.2 ThDof6基因启动子序列的生物信息学分析 | 第33-34页 |
| 3.3.3 ThDof6基因启动子驱动GUS的表达 | 第34-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-37页 |
| 3.5 本章小结 | 第37-38页 |
| 4 ThDof6转录因子的表达及功能分析 | 第38-56页 |
| 4.1 实验材料 | 第38-40页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第38页 |
| 4.1.2 试剂 | 第38页 |
| 4.1.3 载体与菌种 | 第38页 |
| 4.1.4 药品及培养基配置 | 第38-40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-44页 |
| 4.2.1 植物过表达载体pROKⅡ -ThDof6的构建 | 第40-41页 |
| 4.2.2 突变体拟南芥和转基因拟南芥的检测 | 第41页 |
| 4.2.3 突变体拟南芥的表达量分析 | 第41-42页 |
| 4.2.4 转基因拟南芥在非生物胁迫下的抗逆分析 | 第42-44页 |
| 4.3 结果与分析 | 第44-54页 |
| 4.3.1 植物过表达载体pROKⅡ- ThDof6的构建 | 第44-45页 |
| 4.3.2 转基因拟南芥的筛选与检测 | 第45页 |
| 4.3.3 突变体纯合株系的筛选 | 第45页 |
| 4.3.4 突变体拟南芥表达量分析 | 第45-46页 |
| 4.3.5 非生物胁迫下转基因拟南芥成苗的抗逆分析 | 第46-47页 |
| 4.3.6 非生物胁迫下转基因拟南芥的生理生化指标分析 | 第47-48页 |
| 4.3.7 非生物胁迫下转基因拟南芥幼苗的抗逆分析 | 第48-50页 |
| 4.3.8 非生物胁迫下转基因拟南芥的萌发能力分析 | 第50页 |
| 4.3.9 非生物胁迫下转基因拟南芥的组织化学染色分析 | 第50-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54页 |
| 4.5 本章小结 | 第54-56页 |
| 5 ThDof6调控的下游基因的研究 | 第56-66页 |
| 5.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第56页 |
| 5.1.2 实验试剂及仪器 | 第56-57页 |
| 5.2 实验方法 | 第57-64页 |
| 5.2.1 芯片RNA样品的制备 | 第57-59页 |
| 5.2.2 盐胁迫下ThDof6过表达植株与野生型植株的差异基因表达 | 第59-63页 |
| 5.2.3 差异基因的Pathway分析 | 第63-64页 |
| 5.2.4 差异基因的GO富集度分析 | 第64页 |
| 5.3 讨论 | 第64-65页 |
| 5.4 本章小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 附录 | 第70-93页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
