| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 符号说明及缩略词 | 第11-13页 |
| 第一章 背景介绍 | 第13-27页 |
| 1.1 吸水链霉菌5008 | 第13-18页 |
| 1.1.1 链霉菌概述 | 第13-14页 |
| 1.1.2 链霉菌孢子发育研究进展 | 第14-15页 |
| 1.1.3 吸水链霉菌井岗变种5008及其基因组概述 | 第15-18页 |
| 1.2 双组份信号转导系统Two-component signal transduction systems (TCSs) | 第18-22页 |
| 1.2.1 双组份信号转导概述 | 第18-20页 |
| 1.2.2 双组份信号转导系统的多样性和复杂性 | 第20页 |
| 1.2.3 天蓝色链霉菌中TCSs研究进展 | 第20-21页 |
| 1.2.4 吸水链霉菌5008中TCSs研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3 井冈霉素概论 | 第22-27页 |
| 1.3.1 井冈霉素与水稻纹枯病 | 第22-24页 |
| 1.3.2 吸水链霉菌5008中井冈霉素的生物合成基因簇 | 第24-27页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第27-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-33页 |
| 2.1.1 菌株 | 第27页 |
| 2.1.2 质粒 | 第27-28页 |
| 2.1.3 培养基和试剂 | 第28-32页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第32-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-50页 |
| 2.2.1 链霉菌培养及菌种保藏 | 第33页 |
| 2.2.2 重组穿梭质粒构建 | 第33-39页 |
| 2.2.3 大肠杆菌与链霉菌之间的跨属接合转移 | 第39页 |
| 2.2.4 双交换突变菌株的筛选与鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.5 双交换突变菌株的表型分析和产素分析 | 第40-41页 |
| 2.2.6 双交换突变菌株的RNA提取 | 第41-43页 |
| 2.2.7 突变株和野生型菌株RT-PCR分析 | 第43-44页 |
| 2.2.8 双交换缺失突变株的回补实验 | 第44-46页 |
| 2.2.9 大肠杆菌蛋白表达纯化 | 第46-50页 |
| 2.2.9.1 目的基因表达载体的构建 | 第46页 |
| 2.2.9.2 目的蛋白的诱导表达 | 第46-47页 |
| 2.2.9.3 目的蛋白的分析 | 第47-48页 |
| 2.2.9.4 表达条件的优化 | 第48页 |
| 2.2.9.5 目的蛋白的提取 | 第48-50页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第50-65页 |
| 3.1 重组穿梭质粒的构建 | 第50-54页 |
| 3.1.1 目的片段左右同源臂的扩增 | 第50-51页 |
| 3.1.2 左右同源臂与克隆载体pCR-Blunt连接 | 第51-54页 |
| 3.2 基因敲除菌株的PCR验证 | 第54-56页 |
| 3.2.1 SHJG4527/28基因敲除菌株的PCR验证 | 第54页 |
| 3.2.2. SHJG4305/06基因敲除菌株的PCR验证 | 第54-55页 |
| 3.2.3. SHJG4927/28基因敲除菌株的PCR验证 | 第55页 |
| 3.2.4 SHJG1922基因敲除菌株的PCR验证 | 第55-56页 |
| 3.2.5 SHJG6929基因敲除菌株的PCR验证 | 第56页 |
| 3.3 基因突变菌株的表型分析 | 第56-62页 |
| 3.3.1 Δ4527/4528的表型分析 | 第56-60页 |
| 3.3.2 突变株Δ6929的表型 | 第60-62页 |
| 3.4 缺失突变型菌株回补实验结果 | 第62-65页 |
| 3.4.1 回补质粒构建 | 第62-63页 |
| 3.4.2 目的基因回补片段PCR扩增结果 | 第63-65页 |
| 第四章 总结与展望 | 第65-67页 |
| 4.1 本研究总结 | 第65-66页 |
| 4.2 本研究展望 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67-73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 学位论文评闻及答辩情况表 | 第78页 |
