中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
缩略词 | 第9-10页 |
1 绪论 | 第10-15页 |
1.1 引言 | 第10页 |
1.2 研究背景 | 第10-13页 |
1.2.1 昆虫病原真菌致病机制的研究进展 | 第10-12页 |
1.2.2 荧光增白剂高度敏感蛋白基因cwh功能的研究进展 | 第12-13页 |
1.3 研究目的 | 第13-14页 |
1.4 技术路线 | 第14页 |
1.5 本研究的创新之处 | 第14-15页 |
2 绿僵菌Macwh的克隆与基因功能研究 | 第15-56页 |
2.1 实验材料 | 第15-18页 |
2.1.1 供试菌株及昆虫 | 第15页 |
2.1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
2.1.3 主要培养基 | 第16-17页 |
2.1.4 主要实验溶液 | 第17-18页 |
2.1.5 主要设备 | 第18页 |
2.1.6 主要应用软件 | 第18页 |
2.2 主要实验方法 | 第18-35页 |
2.2.1 Macwh基因的生物信息学分析 | 第18-19页 |
2.2.2 Macwh敲除突变载体和回复突变载体的构建 | 第19-25页 |
2.2.3 农杆菌AGL-1 感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
2.2.4 电转化农杆菌 | 第26页 |
2.2.5 农杆菌介导的蝗绿僵菌的转化 | 第26页 |
2.2.6 敲除菌株和回复菌株的筛选及验证 | 第26-29页 |
2.2.7 蝗绿僵菌基因组的微量提取 | 第29-30页 |
2.2.8 蝗绿僵菌基因组的大量提取 | 第30页 |
2.2.9 RNA的提取及反转录 | 第30-32页 |
2.2.10 qRT-PCR | 第32页 |
2.2.11 蝗绿僵菌的毒力分析 | 第32-33页 |
2.2.12 Macwh对蝗绿僵菌孢子特性的影响 | 第33-34页 |
2.2.13 Macwh对蝗绿僵菌孢子细胞壁组分和结构的影响 | 第34-35页 |
2.3 实验结果与分析 | 第35-53页 |
2.3.1 Macwh生物信息学分析 | 第35-36页 |
2.3.2 Macwh单敲除及回复菌株,Macwh1-Macwh2双敲除菌株的构建 | 第36-40页 |
2.3.3 Macwh对生长和产孢的影响 | 第40-41页 |
2.3.4 Macwh对逆境敏感性的影响 | 第41-43页 |
2.3.5 Macwh对细胞壁组分和结构的影响 | 第43-46页 |
2.3.6 Macwh对蝗绿僵菌毒力的影响 | 第46-50页 |
2.3.7 Macwh在穿透昆虫体壁中的作用 | 第50-53页 |
2.4 讨论 | 第53-56页 |
3 主要结论与后续工作建议 | 第56-57页 |
3.1 主要结论 | 第56页 |
3.2 后续工作 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
附录 | 第63-64页 |
A. 序列 | 第63-64页 |
B. 作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第64页 |