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逆境胁迫下水稻(Oryza sativa L.)rHsp90基因的克隆及功能分析

摘要第3-5页
Abstract第5页
1 绪论第11-16页
    1.1 Hsp90基因的研究概况第11-12页
        1.1.1 Hsp90基因的克隆第11页
        1.1.2 Hsp90基因家族第11-12页
        1.1.3 Hsp90的调控机制第12页
    1.2 Hsp90-一类重要的分子伴侣第12-14页
        1.2.1 Hsp90的结构特点及生化特性第12-13页
        1.2.2 Hsp90分子伴侣的功能研究第13-14页
    1.3 Hsp90-逆境敏感蛋白第14页
    1.4 Hsp90与发育调控第14-15页
    1.5 本课题的研究背景、目的及意义第15-16页
2 逆境胁迫下水稻rHsp90基因的克隆及表达特性的研究第16-28页
    2.1 材料和方法第16-20页
        2.1.1 植物材料及逆境处理第16-17页
        2.1.2 实验试剂第17页
        2.1.3 水稻rHsp90基因的克隆及序列分析第17-18页
        2.1.4 水稻rHsp90基因探针的获得第18页
        2.1.5 水稻基因组rHsp90基因的Southernblot分析第18-19页
        2.1.6 Northernblot检测逆境胁迫下水稻rHsp90基因的转录表达特性第19-20页
        2.1.7 半定量PCR(Semi-quantitativeRT-PCR)分析第20页
    2.2 结果与分析第20-27页
        2.2.1 水稻rHsp90基因的克隆及序列分析第20-22页
        2.2.2 水稻rHsp90基因检测探针的标记合成第22-23页
        2.2.3 水稻rHsp90基因的Southernblot分析第23-24页
        2.2.4 不同组织中水稻rHsp90基因的表达特性第24页
        2.2.5 不同逆境胁迫下水稻rHsp90基因表达特性的研究第24-25页
        2.2.6 不同盐逆境胁迫时间下水稻rHsp90基因表达特性的研究第25-26页
        2.2.7 不同热激逆境胁迫下水稻rHsp90基因表达特性的研究第26-27页
    2.3 本章小结第27-28页
3 水稻rHsp90基因在酵母及烟草中的表达和功能分析第28-40页
    3.1 材料和方法第28-32页
        3.1.1 植物材料及逆境处理第28页
        3.1.2 菌株、表达载体以及培养基第28-29页
        3.1.3 实验试剂第29页
        3.1.4 pYES2-rHsp90酵母重组质粒的构建以及转化第29-30页
        3.1.5 水稻rHsp90基因在酵母中的表达第30页
        3.1.6 逆境胁迫下转基因酵母的耐性分析第30-31页
        3.1.7 pB1121-rHsp90植物表达载体的构建及转化第31-32页
        3.1.8 烟草的遗传转化与鉴定第32页
        3.1.9 转基因烟草植株的耐盐性分析第32页
    3.2 结果与分析第32-39页
        3.2.1 pYES2-rHsp90重组质粒的构建及鉴定第32-33页
        3.2.2 水稻rHsp90基因在酵母中的表达研究第33-34页
        3.2.3 水稻rHsp90基因在酵母中的耐性分析第34-35页
        3.2.4 盐逆境胁迫下水稻rHsp90基因在酵母中的生长曲线第35页
        3.2.5 植物表达载体的构建及鉴定第35-36页
        3.2.6 烟草的遗传转化第36-37页
        3.2.7 转基因烟草植株的分子鉴定第37页
        3.2.8 转基因烟草植株的耐盐性分析第37-39页
    3.3 本章小结第39-40页
4 水稻rHsp90基因在大肠杆菌中的表达与纯化第40-47页
    4.1 材料和方法第40-42页
        4.1.1 菌株、表达载体及培养基第40页
        4.1.2 实验试剂第40页
        4.1.3 pGEX-6p-3-rHsp90原核表达载体的构建及转化第40-41页
        4.1.4 GST-rHsp90融合蛋白的小量诱导表达第41页
        4.1.5 GST-rHsp90及rHsp90重组蛋白的纯化第41-42页
    4.2 结果与讨论第42-46页
        4.2.1 大肠杆菌表达载体pGEX-6p-3-rHsp90重组质粒的构建及鉴定第42-43页
        4.2.2 GST-rHsp90融合蛋白在BL21中的表达第43页
        4.2.3 GST-rHsp90融合蛋白的纯化以及rHsp90蛋白的获得第43-46页
    4.3 本章小结第46-47页
结论第47-48页
参考文献第48-55页
附录第55-56页
攻读学位期间发表的学术论文第56-57页
致谢第57-58页
独创性声明第58页
学位论文版权使用授权书第58页

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