摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 绪论 | 第11-16页 |
1.1 Hsp90基因的研究概况 | 第11-12页 |
1.1.1 Hsp90基因的克隆 | 第11页 |
1.1.2 Hsp90基因家族 | 第11-12页 |
1.1.3 Hsp90的调控机制 | 第12页 |
1.2 Hsp90-一类重要的分子伴侣 | 第12-14页 |
1.2.1 Hsp90的结构特点及生化特性 | 第12-13页 |
1.2.2 Hsp90分子伴侣的功能研究 | 第13-14页 |
1.3 Hsp90-逆境敏感蛋白 | 第14页 |
1.4 Hsp90与发育调控 | 第14-15页 |
1.5 本课题的研究背景、目的及意义 | 第15-16页 |
2 逆境胁迫下水稻rHsp90基因的克隆及表达特性的研究 | 第16-28页 |
2.1 材料和方法 | 第16-20页 |
2.1.1 植物材料及逆境处理 | 第16-17页 |
2.1.2 实验试剂 | 第17页 |
2.1.3 水稻rHsp90基因的克隆及序列分析 | 第17-18页 |
2.1.4 水稻rHsp90基因探针的获得 | 第18页 |
2.1.5 水稻基因组rHsp90基因的Southernblot分析 | 第18-19页 |
2.1.6 Northernblot检测逆境胁迫下水稻rHsp90基因的转录表达特性 | 第19-20页 |
2.1.7 半定量PCR(Semi-quantitativeRT-PCR)分析 | 第20页 |
2.2 结果与分析 | 第20-27页 |
2.2.1 水稻rHsp90基因的克隆及序列分析 | 第20-22页 |
2.2.2 水稻rHsp90基因检测探针的标记合成 | 第22-23页 |
2.2.3 水稻rHsp90基因的Southernblot分析 | 第23-24页 |
2.2.4 不同组织中水稻rHsp90基因的表达特性 | 第24页 |
2.2.5 不同逆境胁迫下水稻rHsp90基因表达特性的研究 | 第24-25页 |
2.2.6 不同盐逆境胁迫时间下水稻rHsp90基因表达特性的研究 | 第25-26页 |
2.2.7 不同热激逆境胁迫下水稻rHsp90基因表达特性的研究 | 第26-27页 |
2.3 本章小结 | 第27-28页 |
3 水稻rHsp90基因在酵母及烟草中的表达和功能分析 | 第28-40页 |
3.1 材料和方法 | 第28-32页 |
3.1.1 植物材料及逆境处理 | 第28页 |
3.1.2 菌株、表达载体以及培养基 | 第28-29页 |
3.1.3 实验试剂 | 第29页 |
3.1.4 pYES2-rHsp90酵母重组质粒的构建以及转化 | 第29-30页 |
3.1.5 水稻rHsp90基因在酵母中的表达 | 第30页 |
3.1.6 逆境胁迫下转基因酵母的耐性分析 | 第30-31页 |
3.1.7 pB1121-rHsp90植物表达载体的构建及转化 | 第31-32页 |
3.1.8 烟草的遗传转化与鉴定 | 第32页 |
3.1.9 转基因烟草植株的耐盐性分析 | 第32页 |
3.2 结果与分析 | 第32-39页 |
3.2.1 pYES2-rHsp90重组质粒的构建及鉴定 | 第32-33页 |
3.2.2 水稻rHsp90基因在酵母中的表达研究 | 第33-34页 |
3.2.3 水稻rHsp90基因在酵母中的耐性分析 | 第34-35页 |
3.2.4 盐逆境胁迫下水稻rHsp90基因在酵母中的生长曲线 | 第35页 |
3.2.5 植物表达载体的构建及鉴定 | 第35-36页 |
3.2.6 烟草的遗传转化 | 第36-37页 |
3.2.7 转基因烟草植株的分子鉴定 | 第37页 |
3.2.8 转基因烟草植株的耐盐性分析 | 第37-39页 |
3.3 本章小结 | 第39-40页 |
4 水稻rHsp90基因在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第40-47页 |
4.1 材料和方法 | 第40-42页 |
4.1.1 菌株、表达载体及培养基 | 第40页 |
4.1.2 实验试剂 | 第40页 |
4.1.3 pGEX-6p-3-rHsp90原核表达载体的构建及转化 | 第40-41页 |
4.1.4 GST-rHsp90融合蛋白的小量诱导表达 | 第41页 |
4.1.5 GST-rHsp90及rHsp90重组蛋白的纯化 | 第41-42页 |
4.2 结果与讨论 | 第42-46页 |
4.2.1 大肠杆菌表达载体pGEX-6p-3-rHsp90重组质粒的构建及鉴定 | 第42-43页 |
4.2.2 GST-rHsp90融合蛋白在BL21中的表达 | 第43页 |
4.2.3 GST-rHsp90融合蛋白的纯化以及rHsp90蛋白的获得 | 第43-46页 |
4.3 本章小结 | 第46-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
附录 | 第55-56页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
独创性声明 | 第58页 |
学位论文版权使用授权书 | 第58页 |