| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-16页 |
| 1.1 PHA简介 | 第8-9页 |
| 1.2 PHA的理化性质与改性研究 | 第9-10页 |
| 1.3 PHA的功能与应用 | 第10-12页 |
| 1.3.1 PHA在材料学方面的应用 | 第10页 |
| 1.3.2 PHA在医学及组织工程方面的应用 | 第10-11页 |
| 1.3.3 PHA在其他方面的应用 | 第11-12页 |
| 1.4 PHA的生产方法 | 第12页 |
| 1.5 PHA家族蛋白的研究现状 | 第12-14页 |
| 1.5.1 PHA家族蛋白简介 | 第12页 |
| 1.5.2 PHA的合成代谢途径 | 第12-13页 |
| 1.5.3 PHA代谢途径中关键酶的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第14-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-24页 |
| 2.1 试验材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.2.1 常用的酶与试剂盒 | 第16页 |
| 2.1.2.2 常用药品 | 第16-17页 |
| 2.1.3 主要设备 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第18页 |
| 2.1.5 主要溶液配制 | 第18-19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 感受态细胞的制备 | 第19页 |
| 2.2.2 引物的设计与合成 | 第19-20页 |
| 2.2.3 PCR扩增目的基因 | 第20页 |
| 2.2.4 目的片段切胶回收 | 第20-21页 |
| 2.2.5 表达载体的构建 | 第21-22页 |
| 2.2.6 蛋白的原核表达 | 第22-23页 |
| 2.2.6.1 与pET28a表达载体相连接时不同条件下的小量诱导蛋白表达 | 第22-23页 |
| 2.2.6.2 与 pColdⅡ表达载体相连接时小量诱导蛋白表达 | 第23页 |
| 2.2.7 大量诱导蛋白表达与纯化 | 第23页 |
| 2.2.8 结晶条件筛选 | 第23-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-43页 |
| 3.1 phaB、phaE、phaA和phaC基因的克隆及鉴定 | 第24-26页 |
| 3.2 蛋白SpPhaB、SpPhaE、SpPhaA和SpPhaC表达优化 | 第26-41页 |
| 3.2.1 与pET28a表达载体相连接时不同条件下的小量诱导蛋白表达 | 第26-37页 |
| 3.2.1.1 不同IPTG浓度诱导对蛋白表达的影响 | 第26-30页 |
| 3.2.1.2 不同诱导时间对蛋白表达的影响 | 第30-33页 |
| 3.2.1.3 不同诱导温度对蛋白表达的影响 | 第33-37页 |
| 3.2.2 与 pColdⅡ表达载体相连接时不同条件下小量诱导蛋白表达 | 第37-39页 |
| 3.2.3 SpPhaB 和 SpPhaE 蛋白的大量诱导与纯化 | 第39-41页 |
| 3.3 SpPhaB和SpPhaE结晶 | 第41-43页 |
| 第四章 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
