| 目录 | 第6-8页 |
| 致谢 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 缩略词列表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-31页 |
| 1.1 蛋白二硫键异构酶(PDI)的结构与功能 | 第14-19页 |
| 1.1.1 蛋白二硫键异构酶的结构特点 | 第14-15页 |
| 1.1.2 蛋白二硫键异构酶行使的功能 | 第15-17页 |
| 1.1.3 蛋白二硫键异构酶的催化特性 | 第17-18页 |
| 1.1.4 蛋白二硫键异构酶的分子伴侣活性 | 第18-19页 |
| 1.1.5 蛋白二硫键异构酶在植物逆境抗性的作用 | 第19页 |
| 1.2 高温胁迫对水稻结实及品质性状的影响 | 第19-20页 |
| 1.3 稻米贮藏蛋白的含量与组成 | 第20-25页 |
| 1.3.1 稻米贮藏蛋白组分及其主要调控基因 | 第20-23页 |
| 1.3.2 稻米贮藏蛋白的合成、积累及运输过程 | 第23-25页 |
| 1.3.3 高温胁迫对稻米贮藏蛋白合成代谢的影响 | 第25页 |
| 1.4 植物组织中热激蛋白及其对逆境胁迫的响应机制 | 第25-26页 |
| 1.5 RNA干扰技术 | 第26-29页 |
| 1.5.1 RNA干扰的基本原理 | 第27-28页 |
| 1.5.2 RNA干扰的生物学特性 | 第28页 |
| 1.5.3 发卡结构对RNA干扰的影响 | 第28页 |
| 1.5.4 RNA干扰技术在稻米品质改良中的应用 | 第28-29页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第29-31页 |
| 第二章 蛋白二硫键异构酶基因沉默和超表达后代结实特性分析 | 第31-57页 |
| 2.1 引言 | 第31-32页 |
| 2.2 材料与方法 | 第32-40页 |
| 2.2.1 试验材料与试剂 | 第32页 |
| 2.2.2 PDI基因的参数分析 | 第32页 |
| 2.2.3 水稻籽粒胚乳总RNA提取及cDNA的合成 | 第32-33页 |
| 2.2.4 PDI基因RNAi和超表达目标片段的选择、扩增及克隆与鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.5 表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 2.2.6 表达载体的农杆菌转化、植株后代获得及阳性鉴定 | 第36-37页 |
| 2.2.7 T_2代转基因水稻器官特异性的半定量及荧光定量检测 | 第37页 |
| 2.2.8 T_2代转基因水稻籽粒中淀粉合成相关基因的荧光定量检测 | 第37-38页 |
| 2.2.9 转基因T_2代水稻的农艺性状与结实特性分析 | 第38页 |
| 2.2.10 转基因水稻T_2代籽粒的理化指标测定 | 第38-40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-54页 |
| 2.3.1 水稻PDI基因参数及序列特征 | 第40页 |
| 2.3.2 水稻PDI氨基酸序列特征 | 第40-42页 |
| 2.3.3 水稻PDI基因家族的聚类分析 | 第42-43页 |
| 2.3.4 RNAi表达载体pTCK303-RiOsPDI和超表达载体pTCK303-OsPDI的农杆菌转化 | 第43-45页 |
| 2.3.5 转基因T_0代植株的获得与T_1代的分离鉴定 | 第45-46页 |
| 2.3.6 转基因T_2代植株的农艺性状表现及结实特性分析 | 第46-47页 |
| 2.3.7 靶基因在转基因T_2代植株不同器官中的表达量分析 | 第47-49页 |
| 2.3.8 转基因T_2代植株籽粒灌浆期中蛋白二硫键含量的变化 | 第49-50页 |
| 2.3.9 转基因T_2代水稻籽粒的淀粉含量、组分及灌浆籽粒中淀粉相关基因表达的检测分析 | 第50-51页 |
| 2.3.10 PDI沉默和超表达对水稻籽粒的贮藏蛋白含量的影响 | 第51-52页 |
| 2.3.11 转基因T_2代植株高温胁迫下的理化组分分析 | 第52-53页 |
| 2.3.12 SDS-PAGE蛋白电泳分析 | 第53-54页 |
| 2.4 讨论 | 第54-57页 |
| 第三章 蛋白二硫键异构酶基因沉默与超表达对水稻高温结实特性与籽粒灌浆生理的影响 | 第57-71页 |
| 3.1 引言 | 第57-58页 |
| 3.2 材料与方法 | 第58-59页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第58页 |
| 3.2.2 人工气候箱控温处理 | 第58页 |
| 3.2.3 转基因T_2代植株籽粒的荧光定量PCR检测 | 第58页 |
| 3.2.4 蛋白质二硫键含量的测定 | 第58-59页 |
| 3.2.5 直链淀粉和总蛋白含量的测定 | 第59页 |
| 3.2.6 理化指标的测定 | 第59页 |
| 3.3 结果与分析 | 第59-67页 |
| 3.3.1 PDI沉默和超表达水稻的高温结实特性及其品质稳定性分析 | 第59-62页 |
| 3.3.2 转基因T_2代植株高温胁迫下可溶性糖含量和千粒重的动态变化分析 | 第62页 |
| 3.3.3 高温胁迫下水稻籽粒器官中可溶性蛋白、MDA和脯氨酸含量的差异变化 | 第62-64页 |
| 3.3.4 高温胁迫下水稻籽粒器官中热激蛋白相关基因的表达特征分析 | 第64-66页 |
| 3.3.5 高温胁迫下水稻籽粒器官中游离巯基和蛋白二硫键含量变化 | 第66-67页 |
| 3.4 讨论 | 第67-71页 |
| 全文展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 附录 | 第82页 |
