| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-28页 |
| 1.1 RNAi干扰途径和染色体分离 | 第10-20页 |
| 1.1.1 细胞增殖概述 | 第10-11页 |
| 1.1.2 有丝分裂概述 | 第11-12页 |
| 1.1.3 中期染色体结构概述 | 第12页 |
| 1.1.4 染色体异常概述 | 第12-13页 |
| 1.1.5 着丝粒概述 | 第13-14页 |
| 1.1.6 卫星序列 | 第14-16页 |
| 1.1.7 着丝粒蛋白C1 | 第16页 |
| 1.1.8 小RNA和RNAi干扰途径 | 第16-19页 |
| 1.1.9 课题概述 | 第19-20页 |
| 1.2 环状RNA和基因表达调控 | 第20-28页 |
| 1.2.1 非编码RNA概述 | 第20页 |
| 1.2.2 环状RNA概述 | 第20-22页 |
| 1.2.3 促进环状RNA产生的序列和蛋白 | 第22页 |
| 1.2.4 作为miRNA海绵的环状RNA | 第22-23页 |
| 1.2.5 U1 snRNA概述 | 第23-24页 |
| 1.2.6 环状RNA与转录调控 | 第24-25页 |
| 1.2.7 课题概述 | 第25-28页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第28-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-30页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-52页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第30页 |
| 2.2.2 细胞冻存 | 第30-31页 |
| 2.2.3 细胞培养与传代 | 第31页 |
| 2.2.4 细胞总RNA提纯 | 第31-32页 |
| 2.2.5 细胞转染 | 第32页 |
| 2.2.6 反转录实验 | 第32-33页 |
| 2.2.7 体外转录RNA探针 | 第33页 |
| 2.2.8 细胞成像 | 第33-34页 |
| 2.2.9 感受态细菌的制备 | 第34页 |
| 2.2.10 普通PCR扩增技术 | 第34-35页 |
| 2.2.11 PCR产物回收 | 第35页 |
| 2.2.12 Western Blot检测 | 第35-36页 |
| 2.2.13 后期相细胞的制备 | 第36-37页 |
| 2.2.14 中期相细胞的制备 | 第37-38页 |
| 2.2.15 分离提纯人类中期染色体 | 第38-39页 |
| 2.2.16 提纯人类中期染色体RNA | 第39页 |
| 2.2.17 分离提纯细胞核和细胞质 | 第39-40页 |
| 2.2.18 RNA免疫共沉淀(RIP) | 第40-41页 |
| 2.2.19 荧光原位杂交 | 第41-42页 |
| 2.2.20 荧光探针的制备 | 第42-43页 |
| 2.2.21 流式细胞术 | 第43页 |
| 2.2.22 RNA深度测序策略 | 第43-44页 |
| 2.2.23 Northern Blot检测 | 第44-45页 |
| 2.2.24 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第45-47页 |
| 2.2.25 Biotin-oligo pulldown of RNA技术 | 第47-48页 |
| 2.2.26 质粒和质粒构建 | 第48页 |
| 2.2.27 实时定量PCR技术 | 第48-49页 |
| 2.2.28 免疫荧光 | 第49-50页 |
| 2.2.29 Nuclear Run-on检测 | 第50-51页 |
| 2.2.30 数据分析 | 第51-52页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第52-86页 |
| 3.1 RNAi干扰途径参与哺乳动物染色体分离 | 第52-70页 |
| 3.1.1 敲低Dicer或AGO2导致哺乳动物染色体分离错误 | 第52-54页 |
| 3.1.2 AGO2是一种染色体蛋白 | 第54-56页 |
| 3.1.3 α-satellite RNA是一种染色体非编码RNA | 第56-58页 |
| 3.1.4 Dicer和AG02调控α-satellite RNA水平和CENPC1定位 | 第58-60页 |
| 3.1.5 ASAT siRNA的发现以及它在染色体分离中的功能 | 第60-64页 |
| 3.1.6 AGO2的切割活性对染色体分离非常重要 | 第64-66页 |
| 3.1.7 讨论 | 第66-70页 |
| 3.2 外显子-内含子环状RNA在细胞核中调控基因表达 | 第70-86页 |
| 3.2.1 一类与RNA Pol Ⅱ结合的环状RNA | 第70-72页 |
| 3.2.2 EIciRNA顺式调节基因表达 | 第72-76页 |
| 3.2.3 EIciRNA与Pol Ⅱ,U1 snRNP和gene promoters相互作用 | 第76-79页 |
| 3.2.4 U1 snRNP是EIciRNA发挥顺式作用的关键因子 | 第79-80页 |
| 3.2.5 U1 snRNA-EIciRNA的相互作用 | 第80-82页 |
| 3.2.6 讨论 | 第82-86页 |
| 参考文献 | 第86-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第98页 |
