| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 前言 | 第12-19页 |
| 1.1 琼胶降解菌研究概况 | 第12页 |
| 1.2 琼胶酶的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 琼胶酶的分类 | 第12页 |
| 1.2.2 琼胶酶的来源及酶学性质 | 第12-13页 |
| 1.2.3 琼胶酶的分子生物学研究 | 第13-14页 |
| 1.2.4 琼胶酶的应用与开发 | 第14页 |
| 1.3 琼胶寡糖的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3.1 琼胶寡糖的制备 | 第15页 |
| 1.3.2 琼胶寡糖的应用 | 第15-16页 |
| 1.4 海洋细菌的分类及鉴定 | 第16-17页 |
| 1.4.1 细菌分类学 | 第16页 |
| 1.4.2 海洋细菌的培养、分类及鉴定概况 | 第16-17页 |
| 1.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术 | 第17-18页 |
| 1.5.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳的概念及分类 | 第17页 |
| 1.5.2 SDS-PAGE的基本原理及应用 | 第17-18页 |
| 1.6 本论文的研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 琼胶酶高产细菌的筛选及鉴定 | 第19-34页 |
| 2.1 仪器、材料及试剂 | 第19-22页 |
| 2.1.1 样品采集与处理 | 第19页 |
| 2.1.2 仪器 | 第19页 |
| 2.1.3 试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.4 溶液的配制 | 第21-22页 |
| 2.1.5 培养基 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 琼胶酶高产菌的筛选与保藏 | 第22页 |
| 2.2.2 革兰氏染色 | 第22-23页 |
| 2.2.3 16S rDNA鉴定 | 第23-25页 |
| 2.2.3.1 参考文献,自行改进了细菌基因组DNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.3.2 16S rDNA的PCR扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.3.3 回收、连接与转化 | 第24页 |
| 2.2.3.4 重组质粒的鉴定与序列的测定 | 第24-25页 |
| 2.2.3.5 序列分析 | 第25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-32页 |
| 2.3.1 产琼胶酶菌株的筛选 | 第25-28页 |
| 2.3.2 革兰氏染色结果 | 第28页 |
| 2.3.3 16S rDNA分子鉴定结果 | 第28-32页 |
| 2.3.3.1 16S rDNA目的片段的克隆结果 | 第28-29页 |
| 2.3.3.2 16S rDNA目的片段的序列分析 | 第29-31页 |
| 2.3.3.3 系统发育树的构建 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 产酶条件及酶反应活性条件的研究 | 第34-57页 |
| 3.1 仪器与试剂 | 第34-35页 |
| 3.1.1 仪器 | 第34页 |
| 3.1.2 试剂 | 第34-35页 |
| 3.1.3 溶液的配制 | 第35页 |
| 3.2 方法 | 第35-38页 |
| 3.2.1 酶活力测定的方法 | 第35-36页 |
| 3.2.2 细菌产酶条件的研究 | 第36-38页 |
| 3.2.2.1 琼胶浓度对产酶活性的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.2.2 培养基盐度对产酶活性的影响 | 第37页 |
| 3.2.2.3 培养温度对产酶活性的影响 | 第37页 |
| 3.2.2.4 培养时间对产酶活性的影响 | 第37页 |
| 3.2.2.5 细菌产酶条件的优化 | 第37-38页 |
| 3.2.3 酶反应活性条件的研究 | 第38页 |
| 3.2.3.1 酶反应最适pH值 | 第38页 |
| 3.2.3.2 酶反应最适温度 | 第38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-54页 |
| 3.3.1 FG1产酶条件与酶反应条件的研究结果 | 第38-44页 |
| 3.3.1.1 琼胶浓度对产酶的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.1.2 培养基盐度对产酶的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.1.3 培养温度对产酶的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.1.4 培养时间对产酶的影响 | 第41页 |
| 3.3.1.5 正交试验优化FG1的产酶条件 | 第41-42页 |
| 3.3.1.6 酶反应最适pH值 | 第42-43页 |
| 3.3.1.7 酶反应最适温度 | 第43-44页 |
| 3.3.2 FG2产酶条件与酶反应活性条件的研究结果 | 第44-49页 |
| 3.3.2.1 琼胶浓度对产酶的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.2.2 培养基盐度对产酶的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.2.3 培养温度对产酶的影响 | 第46页 |
| 3.3.2.4 培养时间对产酶的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.2.5 正交试验优化FG2的产酶条件 | 第47页 |
| 3.3.2.6 酶反应最适pH值 | 第47-48页 |
| 3.3.2.7 酶反应最适温度 | 第48-49页 |
| 3.3.3 FG3产酶条件与酶反应活性条件的研究结果 | 第49-54页 |
| 3.3.3.1 琼胶浓度对产酶的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.3.2 培养基盐度对产酶的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.3.3 培养温度对产酶的影响 | 第51页 |
| 3.3.3.4 培养时间对产酶的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.3.5 正交试验优化FG3的产酶条件 | 第52-53页 |
| 3.3.3.6 酶反应最适pH值 | 第53页 |
| 3.3.3.7 酶反应最适温度 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-57页 |
| 3.4.1 琼胶浓度对产酶的影响 | 第54-55页 |
| 3.4.2 培养基盐度对产酶的影响 | 第55页 |
| 3.4.3 培养温度对产酶的影响 | 第55页 |
| 3.4.4 培养时间对产酶的影响 | 第55-56页 |
| 3.4.6 酶反应最适pH | 第56页 |
| 3.4.7 酶反应最适温度 | 第56-57页 |
| 第四章 蛋白表达的SDS-PAGE分析 | 第57-64页 |
| 4.1 仪器与试剂 | 第57-58页 |
| 4.1.1 仪器 | 第57页 |
| 4.1.2 试剂 | 第57页 |
| 4.1.3 主要溶液的配制 | 第57-58页 |
| 4.2 方法 | 第58-59页 |
| 4.2.1 硫酸铵沉淀 | 第58页 |
| 4.2.2 SDS-PAGE测定蛋白质分子量 | 第58-59页 |
| 4.3 结果与分析 | 第59-62页 |
| 4.3.1 FG1培养物中蛋白质粗体物的SDS-PAGE电泳图谱 | 第60页 |
| 4.3.2 FG2培养物中蛋白质粗体物的SDS-PAGE电泳图谱 | 第60-61页 |
| 4.3.3 FG3培养物中蛋白质粗体物的SDS-PAGE电泳图谱 | 第61-62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 总结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
