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橡胶树HbDAHPS基因的克隆及其响应非生物胁迫的研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
缩略词第8-10页
1 前言第10-18页
    1.1 莽草酸途径第10-11页
    1.2 DAHPS第11-15页
        1.2.1 细菌中DAHPS的研究概述第12-13页
        1.2.2 植物中DAHPS的研究概述第13-15页
    1.3 我国橡胶树育种研究现状第15-16页
    1.4 本研究背景、目的及意义第16-17页
    1.5 本研究的技术路线第17-18页
2 材料与方法第18-44页
    2.1 材料与试剂第18-19页
        2.1.1 植物材料第18页
        2.1.2 质粒及菌株第18页
        2.1.3 试剂第18-19页
        2.1.4 实验仪器第19页
    2.2 实验方法第19-44页
        2.2.1 总RNA的提取与质量检测第19-21页
        2.2.2 cDNA第一链的合成第21-22页
        2.2.3 橡胶树叶片DNA的提取与质量检测第22-23页
        2.2.4 经典RACE法扩增HbDAHPS基因5’端序列第23-27页
        2.2.5 HbDAHPS基因的PCR扩增及其质粒提取第27-29页
        2.2.6 HbDAHPS生物信息学分析第29-30页
        2.2.7 HbDAHPS基因响应非生物胁迫的表达分析第30-32页
        2.2.8 HbDAHPS转化拟南芥表达载体的构建第32-36页
        2.2.9 农杆菌介导HbDAHPS基因的转化和筛选第36-37页
        2.2.10 转基因拟南芥植株的PCR检测与Southern杂交第37-41页
        2.2.11 转基因拟南芥的GUS染色鉴定第41页
        2.2.12 拟南芥的胁迫处理第41页
        2.2.13 拟南芥生理指标测定第41-44页
3 结果与分析第44-69页
    3.1 橡胶树HbDAHPS基因全长CDNA的克隆第44-45页
        3.1.1 橡胶树总RNA的提取与质量检测第44页
        3.1.2 橡胶树HbDAHPS基因全长cDNA的克隆第44-45页
    3.2 橡胶树HbDAHPS基因DNA序列的获得和结构分析第45-47页
        3.2.1 橡胶树DNA的提取与质量检测第45-46页
        3.2.2 橡胶树HbDAHPS基因DNA序列的获得和结构分析第46-47页
    3.3 橡胶树HbDAHPS基因的生物信息学分析第47-53页
        3.3.1 HbDAHPS基因蛋白的理化特性分析第47-48页
        3.3.2 HbDAHPS蛋白亚细胞定位、结构域分析及其功能预测第48-50页
        3.3.3 HbDAHPS蛋白的信号肽及跨膜区预测第50-51页
        3.3.4 HbDAHPS同源性分析第51-53页
        3.3.5 HbDAHPS系统进化树分析第53页
    3.4 HbDAHPS的组织特异性分析第53-54页
    3.5 橡胶树HbDAHPS基因在非生物胁迫下的表达分析第54-61页
        3.5.1 HbDAHPS基因在草甘膦胁迫下的表达分析第54-55页
        3.5.2 HbDAHPS基因在干旱胁迫下的表达分析第55-56页
        3.5.3 HbDAHPS基因在PEG胁迫下的表达分析第56-57页
        3.5.4 HbDAHPS基因在盐胁迫下的表达分析第57页
        3.5.5 HbDAHPS基因响应几种激素诱导的表达分析第57-59页
        3.5.6 HbDAHPS基因在低温胁迫下的表达分析第59-61页
    3.6 植物表达载体PCAMBIA2301-MSP-HbDAHPS的构建第61-62页
    3.7 转基因拟南芥的筛选与鉴定第62-64页
        3.7.1 转基因拟南芥的PCR鉴定第62页
        3.7.2 转基因拟南芥的Southern鉴定第62-63页
        3.7.3 转基因拟南芥的GUS染色鉴定第63-64页
    3.8 转HbDAHPS基因拟南芥的表型观察和分析第64-69页
        3.8.1 转HbDAHPS基因株系的抗旱性研究第64-65页
        3.8.2 转HbDAHPS基因株系的耐盐性研究第65-66页
        3.8.3 转HbDAHPS基因株系对PEG的耐受性研究第66-67页
        3.8.4 转HbDAHPS基因株系响应低温胁迫的研究第67-69页
4 讨论第69-73页
    4.1 关于HbDAHPS的生物信息学分析第69-70页
    4.2 HbDAHPS的功能第70-73页
5 结论第73-74页
参考文献第74-79页
附录第79-81页
作者在读期间科研成果简介第81-82页
致谢第82页

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