摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
缩略词 | 第8-10页 |
1 前言 | 第10-18页 |
1.1 莽草酸途径 | 第10-11页 |
1.2 DAHPS | 第11-15页 |
1.2.1 细菌中DAHPS的研究概述 | 第12-13页 |
1.2.2 植物中DAHPS的研究概述 | 第13-15页 |
1.3 我国橡胶树育种研究现状 | 第15-16页 |
1.4 本研究背景、目的及意义 | 第16-17页 |
1.5 本研究的技术路线 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-44页 |
2.1 材料与试剂 | 第18-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第18页 |
2.1.2 质粒及菌株 | 第18页 |
2.1.3 试剂 | 第18-19页 |
2.1.4 实验仪器 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-44页 |
2.2.1 总RNA的提取与质量检测 | 第19-21页 |
2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第21-22页 |
2.2.3 橡胶树叶片DNA的提取与质量检测 | 第22-23页 |
2.2.4 经典RACE法扩增HbDAHPS基因5’端序列 | 第23-27页 |
2.2.5 HbDAHPS基因的PCR扩增及其质粒提取 | 第27-29页 |
2.2.6 HbDAHPS生物信息学分析 | 第29-30页 |
2.2.7 HbDAHPS基因响应非生物胁迫的表达分析 | 第30-32页 |
2.2.8 HbDAHPS转化拟南芥表达载体的构建 | 第32-36页 |
2.2.9 农杆菌介导HbDAHPS基因的转化和筛选 | 第36-37页 |
2.2.10 转基因拟南芥植株的PCR检测与Southern杂交 | 第37-41页 |
2.2.11 转基因拟南芥的GUS染色鉴定 | 第41页 |
2.2.12 拟南芥的胁迫处理 | 第41页 |
2.2.13 拟南芥生理指标测定 | 第41-44页 |
3 结果与分析 | 第44-69页 |
3.1 橡胶树HbDAHPS基因全长CDNA的克隆 | 第44-45页 |
3.1.1 橡胶树总RNA的提取与质量检测 | 第44页 |
3.1.2 橡胶树HbDAHPS基因全长cDNA的克隆 | 第44-45页 |
3.2 橡胶树HbDAHPS基因DNA序列的获得和结构分析 | 第45-47页 |
3.2.1 橡胶树DNA的提取与质量检测 | 第45-46页 |
3.2.2 橡胶树HbDAHPS基因DNA序列的获得和结构分析 | 第46-47页 |
3.3 橡胶树HbDAHPS基因的生物信息学分析 | 第47-53页 |
3.3.1 HbDAHPS基因蛋白的理化特性分析 | 第47-48页 |
3.3.2 HbDAHPS蛋白亚细胞定位、结构域分析及其功能预测 | 第48-50页 |
3.3.3 HbDAHPS蛋白的信号肽及跨膜区预测 | 第50-51页 |
3.3.4 HbDAHPS同源性分析 | 第51-53页 |
3.3.5 HbDAHPS系统进化树分析 | 第53页 |
3.4 HbDAHPS的组织特异性分析 | 第53-54页 |
3.5 橡胶树HbDAHPS基因在非生物胁迫下的表达分析 | 第54-61页 |
3.5.1 HbDAHPS基因在草甘膦胁迫下的表达分析 | 第54-55页 |
3.5.2 HbDAHPS基因在干旱胁迫下的表达分析 | 第55-56页 |
3.5.3 HbDAHPS基因在PEG胁迫下的表达分析 | 第56-57页 |
3.5.4 HbDAHPS基因在盐胁迫下的表达分析 | 第57页 |
3.5.5 HbDAHPS基因响应几种激素诱导的表达分析 | 第57-59页 |
3.5.6 HbDAHPS基因在低温胁迫下的表达分析 | 第59-61页 |
3.6 植物表达载体PCAMBIA2301-MSP-HbDAHPS的构建 | 第61-62页 |
3.7 转基因拟南芥的筛选与鉴定 | 第62-64页 |
3.7.1 转基因拟南芥的PCR鉴定 | 第62页 |
3.7.2 转基因拟南芥的Southern鉴定 | 第62-63页 |
3.7.3 转基因拟南芥的GUS染色鉴定 | 第63-64页 |
3.8 转HbDAHPS基因拟南芥的表型观察和分析 | 第64-69页 |
3.8.1 转HbDAHPS基因株系的抗旱性研究 | 第64-65页 |
3.8.2 转HbDAHPS基因株系的耐盐性研究 | 第65-66页 |
3.8.3 转HbDAHPS基因株系对PEG的耐受性研究 | 第66-67页 |
3.8.4 转HbDAHPS基因株系响应低温胁迫的研究 | 第67-69页 |
4 讨论 | 第69-73页 |
4.1 关于HbDAHPS的生物信息学分析 | 第69-70页 |
4.2 HbDAHPS的功能 | 第70-73页 |
5 结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-79页 |
附录 | 第79-81页 |
作者在读期间科研成果简介 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |